Цвета блонд: Света много не бывает: какие оттенки блонда в моде?

Содержание

Холодный блонд — получаем цвет в домашнем окрашивании

Правила окрашивания и ухода.

Холодный цвет блонд — сложный оттенок, который требует соблюдения определенных правил при домашнем окрашивании. Получить красивый оттенок и сохранить его яркость помогут наши советы.


Окрашивание в холодный блонд

Чтобы получить красивый холодный оттенок блонд, необходимо осветлить волосы с помощью порошка, пудры или пасты. Они помогают разрушить естественный пигмент, чтобы окрашивание в холодный цвет блонд получилось чистым без желтизны.

Осветляющий состав будет зависеть от вашего исходного оттенка волос и от производителя средства. Правильно подобрать окислитель и провести процедуру осветления поможет наш мастер-класс.

После осветления, волосы можно будет тонировать в нужный оттенок блонд. Важно использовать не просто холодные оттенки, а специальные тона с цветовыми нюансами нейтрализующими желтизну, например, Elgon Moda&Styling 10/27 Яркий блонд Жемчужный или Elgon Get The Color 10/2 Яркий блонд Бежевый. Они имеют в составе перламутровый пигмент, который идеально справляется с желтизной после осветления.

Чтобы придать волосам холодный цвет блонд пепельного направления, добавьте в основной краситель Elgon Moda&Styling 10/71 Яркий блонд Прозрачная сирень или Elgon Get The Color 10/1 Яркий блонд Пепельный.


Смешивать красители можно только одной линии!

Как правильно провести процедуру тонирования смотрите в мастер-классе Тонирование осветленных волос красителем, а также читайте статью Как выбрать оттенок и сделать тонирование волос блондинке.


Поддержка цвета между окрашиваниями

Чтобы сохранить холодный цвет блонд между процедурами тонирования используйте уходовые средства со специальным антижелтым составом. Например, линия Inebrya No-yellow поможет сохранить холодный оттенок и нейтрализовать проявление желтизны, одновременно ухаживая за волосами оттенка блонд. Чтобы получить максимальный эффект важно использовать серию полностью: шампунь, бальзам и маску. Шампунь имеет более плотный холодный пигмент, а маска запечатывает этот пигмент и продлевает его стойкость.


Уход за волосами оттенка блонд

Осветление достаточно агрессивная процедура, которая может привести к сухости и ломкости волос. Поэтому важно использовать в уходе увлажняющие и восстанавливающие средства. Несколько раз в неделю после мытья наносите на волосы восстанавливающую маску для оттенков блонд Blonde Miracle Nectar Inebrya. Она помогает сохранить холодный оттенок, восстанавливает мягкость и блеск, препятствует дальнейшему повреждению волос. Перед укладкой волос используйте несмываемый двухфазный кондиционер для осветленных волос Inebrya R+B+E+C Bi-Phase Blonde Conditioner для увлажнения и защиты волос от агрессивного воздействия высоких температур и внешней среды.

Используйте наши рекомендации, чтобы получить красивый холодный цвет блонд и сохранить его красоту и яркость.

Как поддерживать светлый цвет волос? Рекомендации для блондинок на PEOPLETALK

В этом году ряды блондинок пополнили Ляйсан Утяшева, Жордин Вудс и Крис Дженнер. Уверены, их стилисты уже рассказали им, как правильно ухаживать за осветленными волосами. А ты знаешь, что нужно делать?


Дома

Купи косметику для поддержания цвета

Сразу после преображения обнови косметичку. Первым делом купи специальную серию средств для окрашенных волос. Запомни: использовать такие продукты важно именно в первые две недели. Они помогут сохранить свежие пигменты в структуре волоса.

Затем для поддержания цвета тебе пригодятся фиолетовые шампуни. Они нейтрализуют желтизну, которая со временем будет проявляться. Использовать их, кстати, нужно всего пару раз в неделю.

«Если хочешь сохранить именно холодный блонд, обрати внимание на серию средств на основе синих и серебристых пигментов», – подчеркивает Мария Усманова, стилист центра красоты «Белый Сад» в отеле «Метрополь».

Также запасись косметикой, в составе которой есть биофлаваноиды. Они обеспечивают защиту от потери яркости цвета.


Используй средства для восстановления

Обязательно раз в неделю делай маски с растительными маслами, протеинами, аминокислотами, кератином, керамидами. Они обеспечат восстановление ослабленным после окрашивания волосам.

На кончики наноси масляные эликсиры. Они будут защищать и питать волосы, а еще добавят им блеска. 


Не забудь про линии для увлажнения

Обесцвеченным волосам нужно увлажнение. И тут тебе в помощь серия средств для ухода с экстрактами африканского баобаба (он защищает от пересушивания), соцветий маллоу и пантенолом (контролируют увлажнение волос).


Перейди на серию с SPF

Не забывай про солнцезащитные средства. Осветленные волосы быстро выгорают, да и в целом, ультрафиолет не приносит пользы. Так что косметика с SPF – твой must have.


Обнови косметику для защиты

«Так как осветленные волосы очень хрупкие, перед укладкой обязательно распыляй мисты, – уточняет Мария Усманова, стилист центра красоты «Белый Сад» в отеле «Метрополь» – Они отвечают за мягкость волос, и работают как термозащита». 

Не забудь еще про кремы и масла с функцией защиты от высоких температур.

Кроме того, всем блондинкам нужно знать, что от хлорки, солей меди и других примесей, которые используют чаще всего в бассейнах, осветленные волосы могут позеленеть. На помощь опять придут защитные масла (подойдет любое растительное, например, оливковое, авокадо).


Откажись от…

Кстати, на время нужно будет забыть про шампунь для объема – его щелочная среда агрессивно воздействует на окрашенные волосы. 

А еще не стоит экспериментировать с народными рецептами: забудь про маски с ромашкой, медом и лимоном.


В салоне

Делай ухаживающие процедуры

Чтобы волосы были здоровыми, 1-2 раза в месяц делай салонные уходы. «Отдай предпочтение процедурам на основе арганового масла или сеансам, которые предполагают поэтапное нанесение нескольких масок – они глубоко питают и увлажняют даже сильно травмированные волосы», – советует Мария Усманова, стилист центра красоты «Белый Сад».


Обновляй оттенок

Для поддержания цвета делай тонирование у своего стилиста, эта процедура профессионального окрашивания с более продолжительным эффектом, её можно повторять раз в две недели.

6 трендов этого года для волос цвета блонд

Если вам повезло и волосы цвета блонд достались вам от природы – эта статья пригодится только в том случае, если вы захотите разнообразить его свежими оттенками. Для всех остальных обладательниц светлых локонов мы собрали самые красивые варианты окраски, которые набирают популярность во всем мире и в Instagram.

Белый лед

Кара Делевинь, Карли Клосс, Кристен Стюарт, а вместе с ними и героини сериала «Игры престолов» раньше других подхватили новый подход к окраске волос. Оттенок блонда, который мы назвали «белый лед», смотрится очень футуристично и эффектно, а еще придает любой внешности слегка андрогинный вид.

Лайфхак

Для поддержания этого небанального цвета пользуйтесь шампунем без сульфатов и палочкой-выручалочкой для блондинок, устраняющей желтизну – фиолетовым шампунем.

Желтый блонд

Культовый цвет нулевых вернулся спустя 17 лет. Однако теперь влюбленные в легкую желтизну могут быть спокойны – сегодня появилось множество средств, которые уберегут ваши волосы от повреждения.

Лайфхак

Пользуйтесь средствами, которые смягчат яркость желтизны и придадут ей нейтральные теплые оттенки.

Блонд «крем-сода»

Мы считаем, что это один из самых красивых среди множества оттенков светлого на волосах.

Лайфхак

Характерные золотые блики – вот что вы должны сказать своему мастеру перед окрашиванием. Именно они, в сочетании с цветом расплавленной карамели, создают на локонах wow-эффект.

Радужная пастель

Пастельный блонд радужных цветов – это всегда небанальный выбор. При этом, даже если вам очень хочется чего-то особенного, не останавливайте свой выбор на синих и зеленых тонах – их почти невозможно вымыть из локонов.

Лайфхак

Чтобы продлить насыщенность цвета, добавьте в привычный кондиционер для волос несколько капель желаемого оттенка. Или же смешайте вместе несколько капель красной, оранжевой и нежно-фиолетовой краски для поддержания сумеречно-пастельных тонов.

Игристый блонд

Под словом «игристый» мы сейчас подразумеваем игристое вино или шампанское. Блондинка в шампанском – именно так можно кратко охарактеризовать этот сияющий теплый блонд в сочетании с пепельными прядями и изысканным платиновым тоном.

Лайфхак

Прежде, чем вдохновляться шевелюрой актрисы Эммы Робертс, запомните одну вещь: для создания этого сложного цвета вам придется посетить процедуру окрашивания минимум трижды.

Сияющий блонд

Мы назвали его так из-за эффекта подсвеченности, который рождается благодаря контрасту природного цвета волос с мягко-золотистым.

Лайфхак

В результате этого окрашивания оттенок блонд локоны обретают только начиная с середины. А значит – этот тренд придется по душе тем, кто мечтает о светлом цвете волос, но боится утратить эластичность и здоровье шевелюры.

5 простых правил по выбору «своего» оттенка блонд

Уж сколько сложено легенд о роковых, прекрасных, наивных, обворожительных, милых блондинках! История насчитывает сотни светловолосых серцеедок. Каждая женщина, мы уверены, хотя бы раз примеряла на себя эту непростую роль. Хотя бы мысленно. Хотя бы теоретически. Как известно, «истинная красота и женственность вне времени» — технологии бегут вперед, превратить себя в идеальную блондинку не составит труда, сохранить цвет на волосах до 2-ух раз дольше тоже. Дело за малым: выбрать подходящий оттенок. 

 

Прежде, чем выбирать из пепельного и калифорнийского блонда, придется определиться с тоном кожи. 

Женщины с теплым цветом кожи с золотистым, оливковым или темно-коричневым оттенком обычно имеют глаза темного цвета, быстро загорают, а естественный цвет волос отражает золотом. 

1.Для темного или оливкового цвета кожи подойдут медовый или карамельный блонд, клубничный или сливочный. 

2.Обладательницам естественного каштанового цвета волос необходимо быть аккуратными с осветлением, чтобы лицо в результате не казалось блеклым: избегайте платины, светлого блонда или оранжевого. Лучше сделайте вместо этого светлое мелирование. 

3.Добавьте волосам больше цвета, если у вас нейтральный тон кожи. Вы можете попробовать золотистый блонд, бежевый блонд или даже светлый блонд. Пусть ваши волосы будут теплого оттенка, как и тон вашей кожи. Чтобы сделать омбре, основной цвет волос должен оставаться светло-коричневым, затем нужно добавить различные оттенки медового в середине и более светлый цвет на кончиках волос.

 

Обладательницы холодного светлого тона кожи с голубыми или зелеными глазами быстро сгорают на солнце и имеют светлые или каштановые от природы волосы, отражающие серебром. 

4.Обладательницам розоватого оттенка кожи подойдут холодные цвета блонда: песочный, пепельный, бежевый. Теплые оттенки блонда при такой коже еще больше подчеркнут красноту лица. 

5.Отдавайте предпочтение золотистым, клубничным или светлым оттенкам блонд, если у вас светлая кожа. Чем светлее ваша кожа, тем более светлый оттенок блонда вы можете выбрать и при этом выглядеть естественно. Попробуйте выбрать в качестве основного цвета сливочное масло, а пряди покрасить в карамельный. Добавьте цвету многогранности, смешав оттенки сливочного масла, меда и золота. 

 

Запомните: не существует просто белого цвета волос! 

Получите консультацию по выбору оттенка блонд у наших лучших мастеров в Санкт-Петербурге в салонах красоты Chicago – это абсолютно бесплатно!

оттенки, без желтизны, палитра – Thevolosy

Многие представительницы прекрасного пола утверждают, что цвет «блонд» привлекает многих мужчин. Соответственно, все стремятся сменить свой прежний природный цвет и покрасить свои роскошные пряди в светлый тон. На самом деле каждая женщина по-своему очаровательна. И вовсе не имеет значения, какого цвета ее волосы. Главное, уметь преподносить себя и в то же время выделяться среди окружающих.

Стоит подчеркнуть, что насыщенные цвета волос «блонд» действительно актуальны в нынешнем сезоне. На подиумах можно увидеть прекрасных красоток с роскошными светлыми прядями. Следовательно, опытные и профессиональные стилисты предлагают огромный выбор ярких оттенков прекрасным женщинам.

Для светловолосых красавиц специально представлена палитра различных тонов «блонда». Какой цвет подойдет к вашей внешности, об этом скажет сам стилист, который тщательно подберет индивидуальный оттенок. Ведь даже один тон может испортить всю картину. Поэтому к выбору цвета надо относиться с полной серьезностью.

Если вы хотите сменить свой имидж и придать своей внешности мистический образ, тогда следует поэкспериментировать с различными тонами, которые, в свою очередь, действительно актуальны в нынешнем сезоне. В Интернете можно посмотреть множество фотографий с известными знаменитостями. На представленных фото можно внимательно рассмотреть определенный образ. Но прежде чем перекрасить локоны в другой цвет, лучше проконсультироваться со своим парикмахером.

Быть блондинкой — Все буде добре — Выпуск 17 — 30.07.2012 — Все будет хорошо — Все будет хорошо

Выбор идеального оттенка

Многие девушки и женщины сталкиваются с некоторыми проблемами при выборе определенного оттенка. На самом деле попасть в точку и выбрать подходящий цвет волос — это действительно сложно. Стоит подчеркнуть немаловажный факт, что, по статистическим данным, практически каждая третья женщина призналась, что после окраски волос в цвет «блонд» без желтизны она почувствовала себя более привлекательной и сексуальной.

Важно знать, что перед окраской прядей нужно учесть некоторые качества. Для начала нужно определить, какого тона ваша кожа. Ведь от этого немаловажного фактора зависит весь образ в целом. В этом случае лучше довериться профессиональному стилисту, который отлично разбирается в этом деле.

Несмотря на то, что палитра оттенков достаточно разнообразна, светловолосые блондинки должны примерить на себе яркий, смелый и в то же время сияющий тон. Например, такой, как пепельный без желтизны или платиновый. Темнокожие красавицы могут позволить себе теплый, например, бежевый или золотистый оттенок. Но если цвет кожи более смуглый, тогда желательно выбрать более темные цвета.

Стоит отметить, что «бежевый блонд» отлично будет смотреться на женщинах более зрелого возраста. Ведь этот тон отлично закрашивает седину. Естественный и натуральный цвет волос скроет возраст и преобразит любую женщину. Безусловно, дамам в зрелом возрасте лучше воздержаться от ярких оттенков. Ведь неправильно подобранный цвет может состарить. Поэтому специалисты в основном рекомендуют обходиться мягкими медовыми тонами.

По утверждению специалистов, серьезная и сложная трансформация с окрашиванием волос должна осуществляться крайне осторожно. Поэтому не следует проводить эксперименты самостоятельно в домашних условиях — таким образом можно повредить структуру волос. Соответственно, процесс перехода из брюнетки в блондинку должен совершаться поэтапно. Преображаться постепенно – это действительно удобно и практично. Ведь таким образом намного проще смириться со своим новым образом. Теперь разберемся какие оттенки «блонда» актуальны в этом сезоне.

Как подобрать идеальный оттенок блонд

Почему у блондинок часто теряется естественный блеск?

 

Многие дамы часто задаются вопросом, почему после окрашивания волос здоровые локоны теряют свой блеск и становятся тусклыми. Стоит отметить, что существует действительно много причин, которые способствуют потере натурального и естественного сияния волос. Например, при долгом нахождении под солнцем ультрафиолетовые лучи повреждают структуру волос.

Немаловажную роль играет чрезмерное применение горячих устройств. При регулярном использовании фена, утюжка или выпрямителя пряди становятся ломкими, тусклыми и безжизненными. Они теряют свою природную красоту. Кроме того, во время использования щадящей краски локоны сразу портятся. Чтобы вернуть своим волосам прежний вид, необходимо воспользоваться эффективными и качественными шампунями.

*КАК ВОССТАНОВИТЬ и ОТРАСТИТЬ ОКРАШЕННЫЕ ВОЛОСЫ* Уход для БЛОНДИНОК

Правильный подбор оттенков

Некоторых женщин природа одарила светлыми прядями. Лишь определенная часть представительниц прекрасного пола прибегает к помощи профессионалов, чтобы добиться желаемого результата. Многочисленная палитра оттенков не имеет границ. Известные и ведущие производители с каждым разом выпускают новейшие краски, которые эффективно окрашивают пряди в другой цвет.

На практике доказано, что не следует смешивать цвета, так как результат может получиться плачевным. Поэтому опытные стилисты в особых случаях тщательно подбирают подходящий тон. Теперь рассмотрим по отдельности насыщенные оттенки этого сезона.

  • «Пепельный блонд»

Если вы все еще хотите окрасить шевелюру в «пепельный блонд» без желтизны, то это абсолютно верное решение, так как в модной тенденции этот оттенок лидирует среди других. Стоит подчеркнуть, что «пепельный блонд» создает достаточно мистический и холодный образ, таким образом подчеркивая индивидуальность женщины.

Многие голливудские актрисы часто любят окрашивать пряди в «пепельный блонд». Холодные оттенки вновь на пике популярности. Поэтому если вы хотите преобразить свою внешность, несомненно, следует попробовать окрасить локоны в «пепельный блонд» без намека желтизны. Правильно подобранная светлая краска отлично будет сочетаться с голубыми глазами. Пепельный оттенок без желтизны придаст стильному образу особенную индивидуальность.

Важно знать, что пепельный цвет всегда сочетается с другими тонами. Например, пепельно-бежевый или «пепельный блонд». Ведь сам по себе пепельный цвет может преобразить вас в образ пожилой бабушки. Вряд ли модная красавица захочет выглядеть подобным образом. От подбора правильной краски зависит конечный итог. Следует отметить, что производитель профессиональной краски «Эстель» представил новую линию под названием Deluxe Silver. Эта краска отлично закрашивает пряди в нежный оттенок. Главным преимуществом этой краски является то, что волосы окрашиваются в приятный пепельный тон без желтизны.

В ПЕПЕЛЬНЫЙ БЛОНД за 1 раз. СУПЕР-БЮДЖЕТНОЕ СРЕДСТВО

  • «Бежевый блонд»

Не стоит обходить стороной бежевый оттенок «блонда». Этот натуральный тон садится на волосы очень красиво. Стоит также отметить, что сам бежевый оттенок относится к уникальным тонам. В рядах этого замечательного цвета присутствуют такие оттенки, как «карамель», «пшеница» и др. Добиться желаемого результата в домашних условиях крайне сложно. На рынке представлены различные краски, которые эффективно окрашивают пряди. Следовательно, все парикмахеры выбирают наилучшие краски от производителя «Эстель», чтобы не повредить структуру волос.

Опытный колорист с точностью подберет бежевый оттенок, который подойдет к вашему образу, особенно при наличии длинных роскошных волос. Многие часто задаются вопросом, какому типу женщин подойдет натуральный бежевый тон. Ответить на этот вопрос затрудняются даже сами специалисты. Однако в основном в бежевый цвет любят окрашиваться женщины с азиатской внешностью.

Безусловно, бежевый цвет подходит смуглянкам с карими глазами. Соответственно, бежевый цвет пользуется огромной популярностью среди женщин с темной кожей. Разбавить бежевый цвет можно при окрашивании волос техникой мелирования. Можно, к примеру, совместить пепельный или пепельно-русый, в зависимости от цветотипа.

Окрашивание волос The color бежевый блондин

Разнообразие шампуней для холодных оттенков

Прежде чем приобрести краски и покрасить волосы в другие цвета, необходимо подобрать качественные и эффективные шампуни с бальзамом, которые восстановят структуру волос после проведенной процедуры. Ведь даже самая дорогостоящая краска повреждает корни и кончики волос. Самый распространенный серебристый шампунь для холодных оттенков «блонд» выпускает любимая и всеми известная марка под названием «Эстель».

Этот профессиональный шампунь Estel Prima Blonde восстанавливает и бережно очищает поврежденные пряди. И, конечно же, в свою очередь, отдает приятным серебристым блеском. Присутствие кератина и пантенола способствует полноценному восстановлению структуры поврежденных локонов за короткий промежуток времени. Производитель гарантирует шелковистость, блеск и естественное сияние.

После окрашивания волос необходимо пользоваться специальными увлажняющими средствами. Серебристая маска для холодных оттенков «блонд» от производителя «Эстель» широко распространена в нашей стране среди представительниц прекрасного пола. Многообещающая маска отлично справляется со всеми функциями. Линия косметики для волос Estel Prima Blonde восстанавливает сухие локоны и стимулирует рост волос. Именно эта серебристая маска для холодных оттенков «блонд» продается практически во всех магазинах и аптеках. Доступная цена заманивает многочисленных покупателей.

И, наконец, следует не обделить вниманием серебристый бальзам для холодных оттенков «блонд» под названием «Эстель Прима Блонд». Этот бальзам выпущен специально для проблемных волос. Всем известно, что после окрашивания волос, некоторые оттенки отдают желтизной. Следовательно, этот эффективный бальзам устранит проблему. После первого же смывания краски волосы станут мягкими и шелковистыми.

Кондиционер для сохранения цвета волос теплых оттенков блонд PRO:VOKE Liquid Blonde Colour Care Conditioner — LAMBRE

PRO:VOKE LIQUID BLONDE COLOUR CARE CONDITIONER, 400 МЛ

Кремообразный кондиционер для защиты цвета волос теплых оттенков блонд со светоотражающими частицами и маслом Таману. Обеспечивает яркий блеск иделает цвет волос более насыщенным.

— Помогает волосам сохранить влагу, напитывает их полезными веществами;

— обеспечивает легкое расчесывание, устраняет ломкость и спутывание, препятствует выпадению;

— защищает волосы от воздействия внешних факторов;

— придаёт красивый блеск, эластичность и упругость.

 

СОХРАНЕНИЕ И УСИЛЕНИЕ

Мы расскажем вам как правильно ухаживать за  светлыми волосами в теплых и холодных тонах, чтобы они всегда оставались здоровыми и блестящими.

Серия продуктов PRO: VOKE Liquid Blonde была специально разработана для блондинок с натуральными и окрашенными волосами теплых оттенков. Содержит золотистые светлые пигменты, которые используются для усиления светлых тонов волос, а не для нейтрализации нежелательных оттенков.

 

АКТИВНЫЕ ИНГРЕДИЕНТЫ

ПАНТЕНОЛ 

— Укрепляет корни волос и стимулирует рост новых луковиц, что препятствует выпадению;

— ускоряет рост волос в 2 раза, избавляет от перхоти;

— способствует увелечению обьёма и восстанавливает естественную структуру волоса. 

 

КЕРАТИН

— Натуральный компонент волоса, является основным структурным «материалом» рогового слоя кожи, волос, ногтей;

— увлажнение и питание волоса, благодаря чему тусклый и тонкий волос выглядит «заполненным»;

— устранение проблемы секущихся кончиков волос;

— улучшение структуры волос: непослушные кудри меньше пушатся и расправляются.

 

МАСЛО ТАМАНУ 

— Обладает заживляющими и восстанавливающими свойствами;

— считается одним из наиболее активных увлажняющих масел;

— восстанавливает волосы и кожу головы после активного пребывания на солнце.

 

ЛИМОННАЯ КИСЛОТА

— Сужает поры, решая тем самым проблему чрезмерного выделения жира;

— предотвращает пересыхание волос и кожи головы;

— укрепляет волосяные луковицы, таким убразом, предотвращает их выпадение;

— придаёт локонам блеск и мягкость.

 

Внимание: в случае попадания в глаза тщательно промойте их водой.

По результатам санитарно-эпидемиологической экспертизы продукт соответствует требованиям действующего законодательства. Только для наружного использования. Не тестируется на животных. Уровень pH от 3,50 до 4,50.

Производитель: Godrej Consumer Products (UK) Ltd, Falcon House, 115-123 Staines Road, Hounslow, Middlesex, TW3 3LL, PO Box 531, Hounslow, TW3 9LX TW3, United Kingdom.

Бонд цвета блонд – Газета Коммерсантъ № 135 (6129) от 27.07.2017

Премьера кино

В прокат выходит «Взрывная блондинка» — «круто сваренный» шпионский боевик в декорациях конца 1980-х. Боевая подготовка Шарлиз Терон, сыгравшей в фильме главную роль, впечатлила Юлию Шагельман.

Экранизация графического романа Энтони Джонстона и Сэма Харта «Самый холодный город» — первая полнометражная картина Дэвида Литча, бывшего каскадера, постановщика трюков и сорежиссера фильма «Джон Уик», где главный герой в исполнении Киану Ривза расправлялся с плохими парнями с помощью пистолетов и весьма немногочисленных добрых слов. Во «Взрывной блондинке» роль немногословного добра с кулаками досталась Шарлиз Терон, окончательно закрепляющей за собой приобретенный в «Безумном Максе» статус королевы экшена. И в этом качестве она настолько убедительна, что мысль о женской версии агента 007 уже не кажется абсурдной.

Героиня Терон Лоррейн Бротон — агент британской разведки, хичкоковская блондинка с ногами от ушей, пристрастием к «Столичной» со льдом и коллекцией шикарного нижнего белья. Руководство MI6 направляет ее в Берлин, где был убит еще один британский разведчик и пропал важнейший список агентов, который необходимо найти и вернуть. На дворе неприютный ноябрь 1989 года, остались считаные дни до падения стены, и обстановка в Берлине нервозная. Не зря перед началом миссии руководитель наставляет Лоррейн, что твой Мюллер: верить, мол, нельзя никому.

В Берлине она встречает шефа местной резидентуры MI6, ныне перешедшего на вольные хлеба, Дэвида Персиваля (Джеймс Макэвой) — скользкую личность с коварной улыбочкой и невообразимым гардеробом, которому позавидовал бы любой сутенер 1980-х или современный любитель винтажа. Кроме этого сомнительного коллеги в игру вступают двойной агент «Штази» (Эдди Марсан), соблазнительная французская шпионка (София Бутелла), выполняющая здесь традиционную роль «девушки Бонда» (а Бонд, что уже не совсем традиционно,— это сама Лоррейн), и, конечно, агенты КГБ, все как один мрачные бородатые головорезы во главе с человеком с типично русской фамилией Бремович (Роланд Мюллер). Русские придают всему происходящему комический оттенок, вряд ли запланированный авторами: с падения Берлинской стены прошло почти 30 лет, холодная война закончилась и началась снова, но в Голливуде так до сих пор и не нашли ни одного человека, способного произнести слово «tovarisch» без совершенно анекдотического акцента.

Берлинские события показаны в виде флешбэков, а обрамляет их сцена отчета мисс Бротон перед начальством из MI6 и ЦРУ. Холодный свет, обрюзгшие мужские лица, блондинка в белом — все это напоминает (скорее всего, неслучайно) культовую сцену допроса из «Основного инстинкта», разве что не столь откровенную, зато с похожим грубоватым юмором. «Взрывная блондинка», как это часто свойственно режиссерским дебютам, вообще полна киноманских аллюзий и цитат, включая довольно неожиданные в таком контексте, но не лишенные изящества отсылки к «Сталкеру» Тарковского и «Касабланке».

Конечно, в комнате для допросов, как и на берлинских злых улицах, каждый ведет свою игру, но разбираться в ней совершенно необязательно. Интрига нарочито запутана, но при этом знакома по сотням шпионских фильмов и легко предсказуема. Ведь сюжетные ходы в этом фильме нужны только для формальной связки боевых сцен, в которых Лоррейн расправляется с многочисленными противниками. Стреляет она редко, в ход идут впечатляющие навыки рукопашного боя, а также подручные предметы вроде туфель на шпильке, пожарного шланга, ключей, штопора, переносной электроплитки — список можно продолжать. Эти сцены действительно виртуозны и поставлены с подлинным размахом и мастерством, в которых заметно профессиональное прошлое режиссера Литча. Особенно эффектна драка в пустующем многоквартирном доме, которая длится почти восемь минут и снята практически без монтажных склеек.

Экранное время между поединками можно занять разглядыванием берлинских городских пейзажей, интерьеров, залитых разноцветным неоновым светом, костюмов и причесок 1980-х, воспроизведенных с искренней, хотя и несколько приукрашивающей нежностью и приправленных саундтреком из соответствующих эпохе хитов Дэвида Боуи, Джорджа Майкла, Depeche Mode, Duran Duran и т. д. А для самых стойких ближе к концу грянут «Кони привередливые», и такого ни в одном фильме о Бонде точно не было.

Какие цвета делают светлыми? Два цвета, которые делают блондина

Когда вы думаете о слове « блондин », вы, вероятно, думаете о цвете волос, как у Марго Робби или Тейлор Свифт. Вы также можете подумать о вещах, которые имеют этот фирменный цвет, включая кукурузные початки, подсолнухи и солому.

Если вы художник, то знаете, что есть много потенциальных объектов со светлым цветом. Из-за этого вам нужно убедиться, что вы знаете, как смешивать оттенки, чтобы получить правильную версию блонда.

Хотите знать, какие два цвета нужно смешать, чтобы получить именно этот оттенок? Возможно, вам придется сначала вернуться к базовой теории цвета.

Прочтите для освежения знаний…

Базовая теория цвета

В детстве мы узнали, что есть три основных цвета: желтый, красный и синий. Когда вы смешаете два из этих цветов, вы получите вторичные цвета: оранжевый, фиолетовый и зеленый. Тогда смешивание одного основного и одного вторичного цвета приведет к третичному цвету.

 

Глядя на цветовой круг, вы можете себе представить, что блонд и его различные варианты расположены между светло-оранжевым и желтым, тем более, что он рассматривается как разновидность желтого. Однако существуют и другие версии этого оттенка, такие как грязный, золотой, клубничный и платиновый.

Итак, если вы планируете нарисовать светловолосого человека или что-то, что окрашено в светлый цвет, вам нужно точно знать, как добиться этих оттенков.

Для этого вы хотите узнать об оттенках, оттенках, тонах и оттенках.Ознакомьтесь с обсуждением ниже…

Оттенки, тона, оттенки и оттенки

Говоря о цветах, многие люди путают слова оттенки, оттенки и тона.

Оглянитесь на цветовой круг. Вы заметите, что белый и черный не включены в него. Это связано с тем, что колесо имеет дело только с оттенками или медианой каждого цвета, когда речь идет о градации.

Когда вы создадите градиент, вы увидите, что есть самые темные, темные, средние, светлые и самые светлые варианты.Средний цвет называется оттенком.

 

Помните, что черный и белый — это не оттенки, а используемые для создания градиентов. Чтобы получить самую светлую и светлую версию оттенка, вам нужно будет добавить белила для создания оттенка. Однако, если вы хотите получить более темную версию, вам нужно добавить серый цвет, который придаст вам оттенок. Добавление черного дает самый темный вариант или оттенок.

Если вы не уверены, почему оттенки, тона и оттенки важны в создании блонда, то, возможно, самое время ответить на главный вопрос: какие цвета делают этот оттенок?

Какие два цвета делают блондина?

Создание блондина означает, что вы будете создавать версию желтого цвета, соответствующую описанию.Для этого просто смешайте первичный желтый оттенок и вторичный коричневый оттенок.

Верно, коричневый — вторичный цвет. Если у вас нет под рукой этого оттенка, лучше знать, какие цвета смешать, чтобы получить коричневый.

Для этого нужно просто смешать в равных частях синий и красный. С правильным количеством каждого оттенка вы создадите коричневый цвет вместо фиолетового.

Однако имейте в виду, что коричневый также может быть третичным и четвертичным цветом. Чтобы создать коричневый, используя один первичный и один вторичный, просто возьмите красный и смешайте с нужным количеством зеленого.

Чтобы создать этот оттенок, используя два третичных цвета, просто смешайте два третичных оттенка, которые дополняют друг друга, чтобы получить грязно-коричневый.

Короче говоря, если у вас закончился коричневый цвет, это не проблема. Вы даже можете смешать красный, синий и желтый, чтобы создать этот оттенок!

Помните, мы упомянули различные типы блонда, которые вы, возможно, захотите использовать в своей работе. Здесь на помощь приходят оттенки, тона и оттенки.

Если вы хотите использовать грязный блонд, добавление равных частей желтого и коричневого может дать вам этот цвет.

Более темная грязная версия может быть получена путем добавления серого, а самая темная — путем добавления черного. Просто не забудьте добавить контролируемое количество черного, так как слишком много может испортить смесь.

Однако, чтобы получить более золотистую версию, не забудьте добавить больше желтого. Теперь, если вы хотите создать платиновый блонд, просто добавляйте белила, пока не получите желаемый цвет. Добавьте немного красного, чтобы получить клубничный блонд.

Заключение

Существует множество версий этого оттенка, и знание того, как смешивать правильные цвета в нужном количестве, может избавить вас от головной боли.

Кроме того, этот оттенок понадобится вам не только для получения правильного цвета волос для вашей картины, но и для других светлых вещей, которые вы, возможно, захотите нарисовать.

Блонд / #faf0be шестнадцатеричный цвет

В цветовом пространстве RGB шестнадцатеричный #faf0be (также известный как Blond) состоит из 98 % красного, 94,1 % зеленого и 74,5 % синего. В то время как в цветовом пространстве CMYK оно состоит из 0 % голубого, 4 % пурпурного, 24 % желтого и 2 % черного. Он имеет угол оттенка 50 градусов, насыщенность 85.7% и легкость 86,3%. Шестнадцатеричный цвет #faf0be может быть получен путем смешивания #ffffff с #f5e17d. Ближайший цвет веб-безопасности: #ffffcc.

● Описание цвета #faf0be : Очень мягкий желтый .

Шестнадцатеричный цвет #faf0be имеет значения RGB R:250, G:240, B:190 и значения CMYK C:0, M:0.04, Ж:0,24, К:0,02. Его десятичное значение равно 16445630.

Шестигранник тройник faf0be #faf0be
RGB Десятичный 250, 240, 190 RGB(250,240,190)
RGB Проценты 98, 94.1, 74.5 rgb(98%,94.1%, 74,5%)
CMYK 0, 4, 24, 2
ВШЛ 50°, 85,7, 86,3 хсл(50,85,7%,86,3%)
HSV (или HSB ) 50°, 24, 98
Веб-сейф ffffcc #ffffcc
CIE-LAB 94.467, -4.308, 25.43
XYZ 79.877, 86.363, 61.174
хуу 0,351, 0,38, 86,363
CIE- ЛКХ 94.467, 25.792, 99.615
CIE-LUV 94.467, 8.751, 37.187
Охотничья лаборатория 92.932, -9.205, 26.023
Двоичный 11111010, 11110000, 10111110
Разделение дополнительных цветов
  • #f5e077
      #f5e077   RGB(245 224 119)  
  • #f6e58f
      #f6e58f   RGB(246 229 143)  
  • #f8eba6
      #f8eba6   rgb(248,235,166)  
  • #faf0be
      #faf0be   rgb(250,240,190)  
  • #fcf5d6
      #fcf5d6   RGB(252 245 214)  
  • #фефбед
      #fefbed   rgb(254,251,237)  
  • #фффффф
      #ffffff   rgb(255,255,255)  
Монохроматический цветной

Ниже вы можете увидеть некоторые цвета, близкие к #faf0be.Наличие набора связанных цветов может быть полезным, если вам нужна вдохновляющая альтернатива исходному выбору цвета.

  • #fae1be
      #fae1be   rgb(250,225,190)  
  • #fae6be
      #fae6be   rgb(250,230,190)  
  • #фаэббе
      #faebbe   rgb(250,235,190)  
  • #faf0be
      #faf0be   rgb(250,240,190)  
  • #faf5be
      #faf5be   rgb(250,245,190)  
  • #фафабе
      #fafabe   rgb(250,250,190)  
  • #f5fabe
      #f5fabe   rgb(245,250,190)  
Похожие цвета Текст с шестнадцатеричным цветом #faf0be

Этот текст имеет цвет шрифта #faf0be.

  Текст сюда  
#faf0be цвет фона

Этот абзац имеет цвет фона #faf0be.

  

Содержание здесь

#faf0be цвет рамки

Этот элемент имеет цвет границы #faf0be.

  
Содержание здесь
Коды CSS
  .текст {цвет:#faf0be;}  
  .background {фоновый цвет:#faf0be;}  
  .border {граница: 1px сплошная #faf0be;}  

Оттенок достигается добавлением черного к любому чистому оттенку, а оттенок создается путем смешивания белого с любым чистым цветом. В этом примере #080701 — самый темный цвет, а #fefdf5 — самый светлый.

  • #080701
      #080701   RGB(8,7,1)  
  • #1a1602
      #1a1602   RGB(26,22,2)  
  • #2c2503
      #2c2503   RGB(44,37,3)  
  • #3f3505
      #3f3505   RGB(63,53,5)  
  • №514406
      #514406   RGB(81,68,6)  
  • №635408
      #635408   RGB(99,84,8)  
  • №756309
      #756309   RGB(117,99,9)  
  • №87730а
      #87730a   RGB(135,115,10)  
  • #9a820c
      #9a820c   RGB(154,130,12)  
  • #ac910d
      #ac910d   RGB(172,145,13)  
  • #bea10f
      #bea10f   RGB(190,161,15)  
  • #d0b010
      #d0b010   RGB(208,176,16)  
  • #e2c011
      #e2c011   RGB(226,192,17)  
Вариант цвета оттенка
  • #edca1a
      #edca1a   rgb(237,202,26)  
  • #efce2c
      #efce2c   rgb(239,206,44)  
  • #f0d33f
      #f0d33f   RGB(240,211,63)  
  • #f2d751
      #f2d751   RGB(242,215,81)  
  • #f3db63
      #f3db63   RGB(243,219,99)  
  • #f4df75
      #f4df75   RGB(244 223 117)  
  • #f6e387
      #f6e387   RGB(246 227 135)  
  • #f7e89a
      #f7e89a   RGB(247 232 154)  
  • #f9ecac
      #f9ecac   rgb(249,236,172)  
  • #faf0be
      #faf0be   rgb(250,240,190)  
  • #fbf4d0
      #fbf4d0   rgb(251,244,208)  
  • #fdf8e2
      #fdf8e2   RGB(253 248 226)  
  • #fefdf5
      #fefdf5   rgb(254 253 245)  
Вариант цвета оттенка

Тон получается путем добавления серого к любому чистому оттенку.В данном случае #dcdcdc — менее насыщенный цвет, а #fdf2bb — наиболее насыщенный.

  • #dcdcdc
      #dcdcdc   RGB(220,220,220)  
  • #dfded9
      #dfded9   rgb(223,222,217)  
  • #e2e0d6
      #e2e0d6   RGB(226 224 214)  
  • #e4e2d4
      #e4e2d4   RGB(228,226,212)  
  • #e7e3d1
      #e7e3d1   RGB(231 227 209)  
  • #eae5ce
      #eae5ce   rgb(234,229,206)  
  • #ede7cb
      #ede7cb   RGB(237,231,203)  
  • #efe9c9
      #efe9c9   RGB(239,233,201)  
  • #f2ebc6
      #f2ebc6   rgb(242 235 198)  
  • #f5ecc3
      #f5ecc3   RGB(245,236,195)  
  • #f7eec1
      #f7eec1   RGB(247,238,193)  
  • #faf0be
      #faf0be   rgb(250,240,190)  
  • #fdf2bb
      #fdf2bb   rgb(253,242,187)  
Тон Цветовая вариация

Ниже вы можете увидеть, как #faf0be воспринимается людьми с нарушением цветового зрения.Это может быть полезно, если вам нужно обеспечить доступность цветовых комбинаций для пользователей с цветовой слепотой.

Монохромность
  • #ededed Ахроматопсия 0,005% населения
  • #f0eee4 Атипичная ахроматопсия 0,001% населения
Трихроматия
  • #fcefbf Протаномалия 1% мужчин, 0.01% женщин
  • #fdedd4 дейтераномалия 6% мужчин, 0,4% женщин
  • #fdece2 Тританомалия 0,01% населения

Fade Resist Honey Blond Кондиционер-краска

Вскружите голову с помощью идеальной краски для блестящих и блестящих волос — теперь с новой формулой кондиционера! Добейтесь стойкого мерцающего цвета волос с помощью Dark & ​​Lovely Fade Resist — золотого стандарта великолепного цвета волос.Любимая всеми перманентная краска для волос стала еще лучше благодаря нашей новой технологии Moisture Seal. Fade Resist придает ослепительный блеск и защищает волосы от ломкости. Интенсивное увлажнение обеспечивает шелковистый, роскошный стойкий цвет волос, который держится до 8 недель. Покажите своим волосам, что вы заботитесь о них во время окрашивания — ваша устойчивая к выцветанию прическа будет вам благодарна!
OUR BEST CARE – НОВЫЙ питательный кондиционер с аргановым маслом и витамином Е. Помогает защитить от сухости – для всех типов волос
OUR BEST COLOR – широчайшая палитра оттенков для цветных женщин.Разнообразная палитра, подходящая для любого тона кожи
НАШЕ ЛУЧШЕЕ ПРИМЕНЕНИЕ – формула No Drip Jelly Smooth Formula
НАШИ ЛУЧШИЕ РЕЗУЛЬТАТЫ – 100% закрашивание седины. Запирает бриллиантовый блеск, чтобы осветить цвет. Яркий, насыщенный кондиционер, цвет до 8 недель

Нанесение на всю голову, если:
Вы никогда не красили волосы или хотите изменить свой текущий цвет волос на более темный оттенок.
1. Подготовьте:
Наденьте перчатки.Открутите кончик колпачка-аппликатора Dark and Lovely Cream Developer. Снимите крышку с флакона-аппликатора. Вылейте все содержимое флакона с перманентной краской для волос Dark and Lovely во флакон с аппликатором Dark and Lovely Cream Developer. Плотно закройте крышку аппликатора. Поместите палец в перчатке на открытый наконечник. Направьте от лица и тщательно встряхните, пока цветовая смесь полностью не смешается. Никогда не оставляйте кончик флакона-аппликатора неоткрытым после смешивания. Контейнер может лопнуть. Для Light Golden Blonde и Luminous Blonde см. специальные инструкции внутри упаковки.
2. Нанесите:
Разделите сухие немытые волосы на 4 секции и закрепите их пластиковыми зажимами, если волосы длинные. Нанесите красящую смесь. Аккуратно сожмите флакон-аппликатор, чтобы нанести красящую смесь, начиная с линии роста волос на затылке; затем продолжайте движение вверх, пока корни волос и вся линия волос не будут полностью покрыты. Для волос со стойкой сединой сначала нанесите на седые участки. Руками в перчатках аккуратно разгладьте красящую смесь до кончиков для равномерного распределения, убедившись, что каждая прядь покрыта.Не втирайте в кожу головы. При попадании красящей смеси на кожу просто сотрите полотенцем. Не сохраняйте неиспользованную цветовую смесь. Контейнер может лопнуть.
3. Сроки:
После нанесения нанести на 20 минут на ослабленные волосы или 30 минут на натуральные волосы (волосы без предварительной химической обработки).
4. Промыть:
По истечении времени обработки добавьте немного теплой воды на волосы и вспеньте красящую смесь. Тщательно промойте, пока вода не станет прозрачной. Если красящая смесь попала в глаза, быстро промойте их водой.После полоскания вытереть полотенцем.
5. Состояние:
Нанесите достаточное количество кондиционера Dark and Lovely Nourishing Care, чтобы пропитать волосы. Массаж через волосы. Оставьте на волосах на 3 минуты. Смойте теплой водой. Сохраните остатки питательного кондиционера Dark and Lovely для нескольких применений.

Aqua / Water / EAU
CETARLIL СПИСОК
глицерин
Бенримоний Хлорид
Candelilla Cera / Candelilla Wax / Cire Re Candelilla
AmodimeThicone
CETYLILLA
Изопропиловый спирт
Parfum / Aragrance
феноксиэтанол
Trideceth-6
Linalool
Argania Spinosa ядра масло
глицин СОЕВОЕ МАСЛО / СОЕВОЕ МАСЛО
ТОКОФЕРОЛ
ХЛОРГЕКСИДИНА ДИГЛЮКОНАТ
ЦЕТРИМОНИУМ ХЛОРИД
НАТРИЯ ГИДРОКСИД

10 самых красивых оттенков для светлых волос на лето 2021

10 самых красивых оттенков для светлых волос на лето 2021

Светлые цвета волос : Мы все хотим выглядеть как можно лучше.Это правда. При изменении цвета наших волос обычно возникает много вопросов и ответов на них. Окрашивание волос мгновенно преображает любой образ. Стильные стрижки выглядят лучше, когда ваши волосы имеют яркий цвет. Вы хотите, чтобы все ваши волосы были окрашены в однотонный цвет или в несколько тонов?

Мелирование

— это способ сделать ваш основной цвет ярче. Их наносят в основном на макушку и вокруг лица, чтобы обрамить и сделать его ярче. Слабое освещение применяется в более темных оттенках, чем ваш основной цвет, добавляя глубину вашим волосам, делая их более объемными при нанесении на нижние слои волос.Преимущество бликов или слабого освещения заключается в том, что это выглядит более естественно, и у вас нет проблемы наростов там, где прорастает ваш старый цвет. Прокрутите вниз, чтобы увидеть 10 красивых идей для окрашивания светлых волос, выберите одну для себя и попробуйте ее этим летом.

1. Светлые волосы с яркими бликами

Если у вас светлые волосы, вы все равно можете оживить их. Если у вас более темные волосы, но вы хотите сделать их более светлыми, попробуйте мелирование в очень ярком блонде. Волосы от @nikkilee901

2.Нейтральный светлый цвет волос

Вкусная смесь теплых, нейтральных и холодных тонов. Волосы от @lisasatornhair

3. Медовый блонд

Если вы брюнетка, рассмотрите блондинку на медовой стороне, потому что это не потребует слишком много усилий. Волосы от @nikkilee901

4. Блондинка с множеством слоев

Многомерный золотистый блонд и множество слоев. Волосы от @lisasatornhair

5. Низкие эксплуатационные расходы и Whisper Waves

Низкие эксплуатационные расходы.Нам нравится этот образ, потому что вы получаете лучшее из обоих миров, яркого блонда и легкого роста. Волосы от @nikkilee901

6. Маслянистый блонд

Вам надоел блонд, но вы еще не готовы к полной платиновой блондинке? Маслянистый блонд находится прямо посередине и создает почти неземную сказочную атмосферу. Волосы от @nikkilee901

7. Тонкий, многомерный блонд

Не могу выбрать коричневый или блонд, поэтому беру между — бронза — всегда красива для любого тона кожи.Этот оттенок отлично подходит для тех брюнеток, которые хотят впервые попробовать блонд. Волосы от @lisasatornhair

8. Шелковистый гладкий блонд

Этот шелковистый и гладкий блонд придает молодой вид, а темные оттенки у корней придают ему более правдоподобный вид. Волосы от @nikkilee901

9. Золотой оттенок с теневыми корнями

Если вы не готовы к чему-то сложному в обслуживании. Более темный корень требует меньше ухода, но золотистый оттенок все равно дает приятную яркость.Волосы от @nikkilee901

10. Объемный блонд

Для многослойного блонда и насыщенного золотистого цвета пусть ваш стилист смешает холодные и теплые тона, такие как яркий блонд и мед. Волосы от @nikkilee901

Молекулярная основа классического светлого цвета волос у европейцев

Различия в цвете волос являются одним из наиболее очевидных примеров фенотипической изменчивости у людей. Хотя полногеномные ассоциативные исследования (GWAS) выявили несколько локусов в вариациях пигмента человека, причинные изменения пар оснований до сих пор в значительной степени неизвестны 1 .Здесь мы анализируем регуляторную область гена лиганда KIT ( KITLG ), который в значительной степени связан с обычным светлым цветом волос у северных европейцев 2 . Функциональные тесты показывают, что область содержит регуляторный энхансер, который управляет экспрессией в развивающихся волосяных фолликулах. Этот энхансер содержит обычный однонуклеотидный полиморфизм (SNP rs12821256), который изменяет сайт связывания транскрипционного фактора лимфоидного энхансера-связывающего фактора (LEF), снижая чувствительность LEF и активность энхансера в культивируемых кератиноцитах человека.Мыши, несущие предковые или производные варианты человеческого энхансера KITLG , демонстрируют значительные различия в пигментации волос, подтверждая, что измененная регуляция основного фактора роста способствует классическому фенотипу светлых волос, обнаруженному у северных европейцев.

Люди обнаруживают поразительные различия в пигментации волос внутри и между популяциями. В то время как темный цвет волос преобладает во многих африканских, азиатских и южноевропейских популяциях, более светлые волосы распространены в Северной Европе.Светлые волосы, которые естественным образом встречаются у небольшой части людей, в истории человечества имели заметный диапазон как положительных, так и отрицательных ассоциаций. В некоторых культурах светлая кожа и волосы заклеймлены как призрачная аномалия, признак распущенности или признак необычного происхождения 3,4 . Напротив, светлые волосы ассоциировались с молодостью и красотой в самых ранних письменных произведениях Древней Греции 5 , и их часто имитировали (или маскировали) с помощью отбеливателей, красок и париков как у древних, так и у современных народов 4 .Несмотря на тысячи лет интереса к вариациям цвета волос, молекулярная основа общих фенотипов цвета человеческих волос до сих пор не полностью изучена. Недавние полногеномные исследования показали, что генетические варианты, связанные с восемью генами, в значительной степени связаны со светлым цветом волос у европейцев 2,6–8 . Некоторые варианты, связанные со светлыми волосами человека, изменяют кодирующие области известных генов пигментации 1,9 . Тем не менее, многие сигналы GWAS для пигментации и других черт человека отображаются за пределами кодирующих белок областей генов 1,10 , обогащены вероятными регуляторными последовательностями 11 , и их трудно проследить до конкретных мутаций пар оснований ДНК 12 .Знание причинных нуклеотидов, лежащих в основе человеческих черт, может улучшить генетические предсказания по сравнению с обычными сцепленными маркерами 13 и облегчить сравнение признаков и мутаций как в прошлых, так и в нынешних популяциях 14 .

KITLG кодирует секретируемый лиганд для рецепторной тирозинкиназы, KIT, и играет важную роль в развитии, миграции и дифференцировке многих различных типов клеток в организме, включая меланоциты, клетки крови и зародышевые клетки 15 .Нулевые мутации, затрагивающие Kitlg или Kit , смертельны для мышей, а гипоморфные аллели вызывают седые волосы, дефекты тучных клеток, анемию и бесплодие 16–18 . Некодирующий SNP (rs12821256), расположенный в большой межгенной области на расстоянии более 350 т.п.н. выше сайта начала транскрипции KITLG , в значительной степени связан со светлым цветом волос в Исландии и Нидерландах 2 (). Этот SNP показывает относительно высокие отношения шансов 1,9–2,4 на аллель риска для светловолосых и светловолосых.каштановые волосы у северных европейцев (мультипликативная модель 2 ). Вместе с другими генами rs12821256 помогает объяснить от 3 до 6% дисперсии в категориальных показателях цвета волос 2 и в настоящее время является одним из нескольких маркеров, используемых для предиктивного тестирования цвета человеческих волос 19 . Связанная со светлыми волосами замена A на G в этом положении преобладает в популяциях Северной Европы, но практически отсутствует в Африке и Азии 2,20,21 (), что позволяет предположить, что регуляторные изменения, связанные с важным сигнальным геном, могут способствовать распространению светлого цвета волос у Европа.

Отдаленная регуляторная область выше гена KITLG контролирует пигментацию волос у людей и мышей. Пик ассоциации обнаружен на rs12821256 (красный), который находится на 355 т.п.о. выше сайта начала транскрипции KITLG . ( b ) Распределение частоты rs12821256 в разных популяциях. Аллель, связанный со светлыми волосами, G (желтый), наиболее распространен в Северной Европе.( c ) Аллель Sl pan в мышином локусе Kitlg состоит из хромосомной инверсии длиной 65,6 мегабаз (GRCm38/mm10 chr10, точки разрыва: 34,301 Мб — 99,916 Мб), которая смещает 5 ортологичных 2 треугольников 18 вверх ). Гетерозиготные ( Sl pan /+) и гомозиготные ( Sl pan / Sl pan ) мыши имеют более светлую шерсть, чем контрольные (+/+) животные, демонстрируя изменение даже одной копии область перед Kitlg может уменьшить пигментацию волос.

Регуляторные мутации у мышей подтверждают важность удаленных восходящих последовательностей в контроле цвета волос. Мутация Steel panda ( Sl pan ), жизнеспособный индуцированный рентгеновским излучением аллель, снижающий пигментацию как у гетерозигот, так и у гомозигот 22 , возникает в результате большой инверсии хромосом выше Kitlg

3 23 Мы впервые секвенировали точные молекулярные точки разрыва этой инверсии (Методы) и показали, что инверсия охватывает 65.6 мегабаз и подтвердили, что положение точек разрыва будет смещать мышиные последовательности, ортологичные пику GWAS, связанному со светлыми волосами. Мыши, гомозиготные по мутации, белые, а гетерозиготные животные, несущие только одну копию мутации Sl pan , значительно легче контрольных мышей (10). Количественные анализы RT-PCR показывают, что гетерозиготные животные экспрессируют 61 ± 9,1% уровней РНК Kitlg дикого типа в коже (среднее значение ± стандартная ошибка среднего, P = 0,0022), показывая, что смещение одной копии отдаленных вышестоящих регуляторных последовательностей Kitlg является достаточно, чтобы уменьшить выражение Kitlg и осветлить цвет волос.

Чтобы идентифицировать изменения пар оснований, ответственные за ассоциацию светлых волос у людей, мы использовали трансгенный подход для поиска функциональных энхансеров во всем интервале-кандидате GWAS, окружающем rs12821256 2 . Три сегмента ДНК человека, полностью охватывающие 17,1 т.п.н., ассоциированную с блондированием область (как определено ближайшими фланкирующими незначимыми маркерами в исследовании GWAS), были отдельно клонированы выше минимального промотора и репортерного гена lacZ ().Только область 6,7 т.п.н., h3, обеспечивала стабильную репортерную экспрессию в эмбрионах трансгенных мышей (и дополнительная рис. 1). экспрессия lacZ была видна в почках (N=14/15) и в развивающихся волосяных фолликулах (N=13/15). Впоследствии мы протестировали два меньших клона из области h3, каждый из которых перекрывал основные пики консервативности последовательности млекопитающих. Один из этих фрагментов, h3b, обеспечивал постоянную экспрессию в почках (и дополнительная рис. 2; N = 12/13), в то время как другой фрагмент, HFE (усилитель волосяных фолликулов), обеспечивал постоянную экспрессию в развивающихся волосяных фолликулах (и дополнительная рис.3; N=8/11). Гистологический анализ показал, что последняя экспрессия имела место в эпителиальных клетках развивающихся волос и кожи (), что соответствует известному участку эндогенной экспрессии Kitlg 24 , который играет важную роль в привлечении меланоцитов к развивающемуся эпидермису и волосяным фолликулам 25 .

Область, связанная со светлыми волосами человека, содержит функциональный энхансер волос

( a ) Область размером 17,1 т.п.н., ограниченная SNP rs444647 и rs661114, определяет интервал-кандидат для светловолосости 2 .В этой области большой блок консервативной последовательности млекопитающих перекрывает маркер пика rs12821256. Пять человеческих фрагментов клонировали выше репортерного гена lacZ и тестировали на энхансерную активность in vivo у трансгенных мышей. ( b – f ) Репрезентативные трансгенные эмбрионы, полученные путем пронуклеарной микроинъекции различных конструкций lacZ , обработанные на E16.5 для выявления активности гена lacZ (синее окрашивание). Масштабная линейка, 1 мм. ( б ) h2.( с ) h3. ( д ) h4. ( e ) HFE (для усилителя волосяных фолликулов). ( ф ) h3b. Из трех клонов, охватывающих весь интервал, только клон h3 длиной 6,7 т.п.н. продуцировал последовательную экспрессию lacZ в коже и почках (стрелка). Анализ двух субклонов из энхансеров HFE кожи h3 ( e ) и h3b почек ( f , стрелка). ( g,h ) Поперечные срезы толщиной 6 мкм через кожу спины E16.5 из ( g ) h3 и ( h ) трансгенных эмбрионов HFE, контрастно окрашенных ядерным быстрым красным.Сильная экспрессия lacZ видна в базальном эпителии и развивающихся волосяных фолликулах. Масштабная линейка, 30 мкм.

Расположение HFE перекрывает SNP rs12821256 (), который показывает самую сильную связь со светлым цветом волос 2 . Полные геномные последовательности 270 человек не выявили дополнительных связанных изменений последовательности в HFE, которые характерны для северных европейцев и отсутствуют у африканцев (методы). Чтобы проверить влияние полиморфизма rs12821256, мы сконструировали производные клона h3, содержащие предковый аллель (A, h3-ANC), аллель, ассоциированный с блондированием (G, h3-BLD), или делецию 11 п.н., перекрывающую SNP rs12821256. позиция (h3-DEL) ().Никаких очевидных качественных различий в паттернах экспрессии lacZ не было отмечено между трансгениками h3-ANC и h3-BLD (и дополнительные рисунки 1 и 4). Однако для конструкции h3-DEL относительно слабая экспрессия волос наблюдалась даже у трансгенных эмбрионов с сильной экспрессией в почках, как и ожидалось, если последовательности, окружающие rs12821256, модулируют экспрессию в волосах, но не в почках (и дополнительная рис. 5).

Варианты энхансеров волосяных фолликулов вызывают измененные уровни экспрессии генов

( a–c ) Представитель E16.5 трансгенных эмбрионов, полученных пронуклеарной инъекцией различных конструкций h3- lacZ размером 6,7 т.п.н. (показаны ниже), обработанных для определения активности гена lacZ (синий). Для этих экспериментов использовали полную область h3, поскольку экспрессия в почках обеспечивала контроль успешной интеграции и экспрессии конструкций, даже если экспрессия в волосах была нарушена. Были протестированы следующие клоны: ( a ) h3-ANC, «A» по адресу rs12821256, ( b ) h3-BLD, «G» по адресу rs12821256, или ( c ) h3-DEL, делеция 11 п.н. удаляет позицию rs12821256. Активность гена lacZ наблюдалась в развивающихся волосяных фолликулах и почках (стрелки) у всех трансгенных эмбрионов. Хотя между эмбрионами h3-ANC (N = 15) и h3-BLD (N = 9) не было отмечено никакой последовательной разницы, эмбрионы h3-DEL (N = 8) ( c ) показали пониженную активность в коже, но нормальную экспрессию в почках ( стрела). Масштабная линейка, 1 мм. ( d ) Анализ экспрессии различных репортеров люциферазы HFE- размером 1,9 т.п.н. в клеточной линии кератиноцитов человека HaCaT. Столбики представляют собой среднее увеличение активности гена люциферазы по сравнению с пустым контрольным вектором, измеренное через 48 часов после трансфекции в типичном эксперименте.Тестированные энхансеры отличались только следующим: HFEANC (A в rs12821256), HFE-BLD (G в rs12821256) и HFE-DEL (делеция 11 п.н., удаляющая rs12821256). И конструкции HFE-BLD, и HFE-DEL проявляли значительно сниженную активность в кератиноцитах HaCaT по сравнению с плазмидой HFE-ANC. Столбики погрешностей указывают на с.э.м. P-значения непарного t-теста; * P<0,05, *** P<5×10 -4 .

Хотя существенные различия в окрашивании lacZ легко наблюдать у трансгенных мышей, количественные изменения трудно подсчитать из-за случайных изменений числа копий и сайта интеграции от эмбриона к эмбриону.Поэтому мы клонировали предковую (HFE-ANC), ассоциированную со светлыми волосами (HFE-BLD) или версию с делецией 11 п.н. (HFE-DEL) энхансера волос выше репортерного гена люциферазы и исследовали количественные уровни экспрессии в линия клеток кератиноцитов человека, HaCaT 26 (). Конструкция HFE-ANC давала 17-кратное увеличение по сравнению с фоновой активностью, подтверждая, что HFE активен в кератиноцитах человека (Z-метод Стоуффера, P=1E-24, N=8). HFE-DEL показал заметное снижение активности люциферазы на 73% по сравнению с HFE-ANC (метод Стоуффера Z, P = 8E-16, N = 5).Конструкция HFE-BLD с заменой пары оснований rs12821256 также продемонстрировала небольшое, но постоянное снижение активности, на 22% меньше, чем HFE-ANC (метод Z Стоуффера, P = 1E-8, N = 8).

Исследование регуляторных дорожек ENCODE человека 11 выявило устойчивый сигнал TCF/LEF, который перекрывает положение rs12821256 в экспериментах ChIP-seq с TCF7L2 в эпителиальных клетках колоректальной карциномы HCT116 (). LEF1 является основным активируемым WNT транскрипционным фактором, который связывается с ДНК посредством домена группы высокой подвижности (HMG) 27–29 .Известно, что LEF1 экспрессируется во время развития и регенерации волосяных фолликулов 30,31 , а мыши с нокаутом Lef1 имеют дефекты в формировании волос и усов 32 . Интересно, что мыши с нокаутом Lef1 имеют светлую окраску из-за локальной недостаточности меланогенеза в мутантных волосяных фолликулах 32 . Наоборот, гиперактивация передачи сигнала WNT в эпителиальных клетках приводит к увеличению экспрессии Kitlg и гиперпигментации in vivo 33 .Наконец, известно, что LEF1 индуцирует резкие изгибы ДНК 27,34 и стимулирует взаимодействие петель ДНК 35,36 . Т.о., LEF1 является превосходным кандидатом на роль восходящего фактора, который может действовать на отдаленные регуляторные энхансеры KITLG и др. меланогенных генов 37 . SNP rs12821256 изменяет хорошо консервативное основание в последовательности, которая напоминает консенсусный мотив связывания LEF (10). Изучение коллекции UniPROBE данных микрочипов по связыванию белков подтверждает, что олигонуклеотиды, соответствующие мотиву HFE ChIP-seq, связываются непосредственно с TCF/LEF in vitro 38,39 (дополнительная таблица 1).Олигонуклеотиды, содержащие замену rs12821256 A на G, демонстрируют значительно меньшее экспериментальное связывание, что согласуется с наблюдаемыми различиями в активности двух HFE в наших анализах. Для дальнейшей количественной оценки чувствительности последовательностей HFE KITLG к LEF мы совместно трансфицировали различные конструкции минипромоторов, содержащие мотивы связывания канонических, человеческих предков или человеческих белокурых волос, вместе с экспрессионной плазмидой LEF-1 в кератиноцитах HaCaT (). Как и ожидалось, каноническая последовательность ответа LEF1 показала самый высокий уровень активации.Точно так же наследственный мотив связывания, обнаруженный в энхансере KITLG человека, также опосредовал сильную чувствительность к LEF1. Напротив, белокурый мотив с заменой пары оснований rs12821256 снижал, но не устранял чувствительность к LEF1 in vitro ().

Аллель blond в rs12821256 изменяет сайт связывания TCF/LEF и снижает чувствительность LEF в кератиноцитах накопить более 12821256 рупий в 1.9 kb HFE (NCBI36/hg18 chr12:87,852,100-87,853,992; клетки HCT116, набор данных TCF7L2 Sg). ( b ) Последовательность , окружающая rs12821256 , напоминает консенсусный мотив связывания LEF 39 . Ассоциированный со светлыми волосами аллель у людей заменяет высококонсервативный, совпадающий с консенсусом нуклеотид A на неконсенсусный G в пределах предсказанного мотива связывания LEF. ( c ) Ответ мини-промоторов на повышение уровня белка LEF через 48 часов после совместной трансфекции в кератиноциты HaCaT. Три протестированные репортерные конструкции люциферазы содержали 7 тандемных копий искусственного консенсусного сайта связывания LEF (7X LEF) (SuperTOPFlash 43 ), семь копий сайта связывания предков человека (7X ANC) или семь копий белок- связанный вариант последовательности (7X BLD).Все три мини-промотора продемонстрировали повышенную активность в ответ на увеличение количества белка LEF. Величина ответа на умеренные уровни LEF соответствует предсказанным возможностям связывания вариантных сайтов LEF, с 7X LEF >> 7X ANC >> 7X BLD. Обратите внимание, что человеческий вариант 7X BLD демонстрирует значительно более низкую активацию, чем человеческая последовательность 7X ANC, при каждом испытанном уровне LEF1 (5 нг, P<0,0001; 10 нг, P<0,0001; 28 нг, P<0,0001; 50 нг, P<0,001; критерий Манна-Уитни). Показан репрезентативный эксперимент с N=2 повторениями.Столбики погрешностей указывают на с.э.м.

Чтобы определить, достаточны ли небольшие количественные изменения активности энхансера для изменения цвета волос in vivo , мы создали соответствующие линии трансгенных мышей, которые экспрессируют кДНК Kitlg под контролем энхансера волос ANC или BLD (). Чтобы устранить возможные различия из-за количества копий трансгена, ориентации или места интеграции, мы использовали систему интегразы ϕC31 для получения однокопийных интегрантов в локусе h21P3 на мышиной хромосоме 11 40 .Мы подтвердили, что интеграция произошла в одном и том же положении в обеих трансгенных линиях. Следовательно, любые фенотипические различия можно отнести к статусу одной пары оснований, присутствующей в энхансере волос, присутствию A ( ANC-Kitlg ) или G ( BLD-Kitlg ), соответствующих rs12821256.

Линии мышей, отличающиеся положением одной пары оснований в энхансере волосяных фолликулов KITLG , демонстрируют явные различия в цвете волос
и вставки ANC-Kitlg у мышей.Светлые или наследственные энхансеры волос (HE) клонировали перед трансгеном минимального промотора Hsp68- KitIg (методы). Синие стрелки обозначают фланкирующие сайты attB, которые рекомбинируют с тандемными сайтами attP (черные стрелки) в локусе мышиной хромосомы 11 h21P3 при пронуклеарной инъекции смеси, содержащей каждую плазмиду SSI с мРНК ϕC31. ( b ) Диаграммы, представляющие количественный анализ RT-PCR экспрессии РНК Kitlg в коже спины P8. Как BLD-Kitlg/+ , так и ANC-Kitlg/+ гетерозиготы демонстрируют значительно повышенные уровни эпидермального Kitlg по сравнению с контрольными животными.Однако мыши, несущие трансген светловолосого варианта, продуцируют на 21% меньше KitIg , чем соответствующие предковые трансгены. P-значения Манна-Уитни: BLD vs. +/+ = 5e-9; ANC против +/+ = 7e-10; BLD против ANC = 0,03146. ( c ) Репрезентативные 2-месячные мыши, демонстрирующие фенотипы цвета волос, связанные с одной копией каждого трансгена SSI. Мыши, изображенные слева направо, представляют собой мыши дикого типа (гибрид FVB/C57Bl/6J F1), гетерозиготы BLD-Kitlg/+, и ANC-Kitlg/+ .Мыши, несущие аллель, связанный со светлыми волосами, в rs12821256, заметно светлее, чем мыши, несущие предковый аллель в энхансере волосяных фолликулов KITLG (см. также дополнительную рис. 7).

Количественный анализ RT-PCR экспрессии мРНК Kitlg в образцах кожи спины на 8-й день после рождения подтвердил повышенную экспрессию мРНК Kitlg в обоих сайт-специфических интегрантах по сравнению с контролями (). Вставка BLD-Kitlg увеличивала экспрессию Kitlg только на 79% по сравнению с вставкой ANC-Kitlg (4), что согласуется с количественными различиями, также наблюдаемыми между двумя энхансерами в клеточной культуре.Важно отметить, что этой количественной разницы было достаточно, чтобы получить очевидные визуальные различия в цвете волос. Как ANC-Kitlg , так и трансген BLD-Kitlg изменили пигментацию волос по сравнению с контрольными животными (дополнительная рис. 6). Однако шерсть мышей BLD-Kitlg/+ оказалась значительно светлее, чем шерсть мышей ANC-Kitlg/+ , и показала более низкую плотность пигментации в волосяных стержнях (P <0,028, дополнительная рис. 7). В совокупности эти данные демонстрируют, что однократного изменения основания в регуляторной последовательности KITLG достаточно, чтобы значительно изменить активность функционального энхансера волосяного фолликула.Модулированная экспрессия KITLG вызывает различную пигментацию волос in vivo и обеспечивает молекулярную связь между регуляторным изменением в важном сигнальном гене развития и классическим морфологическим фенотипом у людей. Потребуются дополнительные исследования, чтобы определить, изменяет ли полиморфизм rs12821256 число, размер, дендритность или дифференцировку и синтез пигмента KIT-рецептор-позитивных меланоцитов, все признаки, которые, как известно, реагируют на различные уровни передачи сигналов KITLG в кожных трансплантатах человека 41 .Однако наши результаты с полиморфизмом rs12821256 уже иллюстрируют, как изменения в тканеспецифических энхансерах могут локализовать фенотипы в определенных областях тела. Некоторые варианты пигментации человека изменяют общие аспекты биосинтеза пигмента, вызывая изменения во всех меланоцитах и, следовательно, оказывая плейотропное воздействие на цвет волос, кожи и глаз. Однако хорошо известно, что цвет волос и глаз также может различаться независимо друг от друга, создавая общие человеческие фенотипы, такие как светловолосые люди с карими глазами или каштановые люди с голубыми глазами.Вариант rs12821256 изменяет энхансер, который активен специфически в окружении волосяных фолликулов, предоставляя простое генетическое объяснение предыдущим наблюдениям, что этот SNP связан с изменениями пигментации волос, но не пигментации глаз у северных европейцев 2 .

Текущие данные показывают, почему до сих пор так сложно определить причинно-следственную основу ассоциаций человеческих черт. SNP rs12821256 картирует более 350 т.п.н. из KITLG , действует на специфический анатомический участок, активные энхансеры которого еще не были охарактеризованы в широкомасштабных исследованиях хроматиновых меток человека 11 , изменяет последовательность, которая не полностью соответствует Консенсусный сайт связывания LEF1 и вызывает только примерно 20% снижение активности ранее неизвестного энхансера волосяного фолликула.Однако наши результаты также показывают, как эти трудности теперь можно преодолеть, используя информацию из опросов населения, крупномасштабных проектов аннотации генома и баз данных взаимодействия факторов транскрипции; в сочетании с подробными функциональными тестами энхансерной активности в клеточных линиях и на мышах. Хорошо подобранные животные модели могут в конечном итоге оказаться необходимыми для подтверждения специфических нуклеотидов, лежащих в основе многих других ассоциаций человеческих признаков 42 , что позволит связать фенотипическую изменчивость с конкретными изменениями пар оснований либо в кодировании белка, либо в сложных регуляторных последовательностях, которые окружают многие гены млекопитающих.

Методы

Праймеры

Все праймеры, использованные при разработке конструкции, генотипировании и ОТ-КПЦР, перечислены в дополнительной таблице 2. 23 . Дополнительные щенки C3H на P7 были получены от Jackson Laboratories (Бар-Харбор, Мэн). репортерных ДНК lacZ готовили для микроинъекций, как описано 44 . Пронуклеарная микроинъекция, забор Е16.5 эмбрионов и фиксацию в холодном 4% параформальдегиде в 1x PBS в течение 1 часа проводили в Taconic Inc (США) или Cyagen Biosciences (Китай). Фиксированные эмбрионы были отправлены в Стэнфорд, где их вырезали пополам, фиксировали еще на 30 минут и обрабатывали на активность lacZ , как описано 45 . Образцы кожи обезвоживали, заливали в парафин, делали срезы, депарафинизировали и окрашивали ядерным стойким красным (Vector Labs).

Плазмиды для сайт-специфической вставки HE- Kitlg по отдельности смешивали с РНК ϕC31 и вводили в пронуклеусы эмбрионов h21P3 FVB с помощью Stanford Transgenic, как описано 40 .Геномную ДНК предполагаемых животных-основателей и потомков анализировали с помощью пары праймеров PR387/PR425 40 , а также пары праймеров PR522 40 /Kg1576 и Kitlg праймеров Kg1580/Kg1581 для скрининга сайт-специфических и случайных интеграций. мышей HEKitlg/+ с идентичными сайтами вставок на фоне FVB скрещивали с мышами C57BL/6J для изучения экспрессии генов и фенотипов пигментации. Образцы кожи двухмесячных гибридов FVB/C57BL6/J F1 фиксировали 4% параформальдегидом в 1x PBS при 4 градусах в течение 48 часов, промывали, обезвоживали и заливали в парафин.Срезы толщиной 6 мкм собирали и обрабатывали, как указано выше. Независимая пара линий мышей HE-Kitlg/+ , в которые также были вставлены отдельные копии трансгенов ANC- Kitlg или BLD- Kitlg с использованием различных комбинаций сайтов attP в локусе h21P3 , была создана для подтвердить фенотипы волос, экспрессию РНК Kitlg и количественно оценить плотность пигментации в волосяных стержнях. Все процедуры проводились в соответствии с протоколами, одобренными Комитетом по институциональному уходу и использованию животных Стэнфордского университета.

Характеристика точки разрыва

Sl pan

Клонирование геномного фрагмента, содержащего точку разрыва Sl pan , было описано ранее 23 . Часть этого фрагмента, которая содержит дистальную точку разрыва инверсии, секвенировали с использованием обычных методов и выравнивали с геномом мыши (сборка от декабря 2011 г., GRCm38/mm10). Точки разрыва инверсии произошли между нуклеотидами 99 915 895 и 99 915 897 (примерно в 100 т.п.н. выше сайта начала транскрипции Kitlg в 100 015 824) и между нуклеотидами 34 300 646 и 34 300 649 (согласуется с предыдущими генетическими и цитологическими данными, отображающими инверсию в отдаленном месте хромосомы). 10 23 ).

Плазмиды

Плазмида 7X LEF (SuperTOPFlash, первоначально опубликованная как M50 Super 8x TOPFlash 43 ) была подарена Nusse Lab. Экспрессионная плазмида LEF-1 XE237 Human LEF-1 pCS2+ была приобретена у Addgene (плазмида Addgene 16709). Расщепление XE237 с помощью EcoRI и XbaI, затупление концов с помощью Кленова и повторное лигирование дали контрольный вектор экспрессии pCS2+.

Геномные фрагменты в h3, h3b, h4, HFE и HFE-ANC амплифицировали из геномной ДНК человека (Clontech #636401) и клонировали в сайт NotI вектора Not5’Hsp68 lacZ 44 или сайт XhoI репортерной плазмиды pTA luc люциферазы светлячка (Clontech).

Для создания клона h2 4,7 т.п.о. геномного фрагмента размером 7,4 т.п.н. амплифицировали из геномной ДНК человека (Clontech) и клонировали в вектор PCR BLUNT II TOPO (Invitrogen). Дополнительные 2,7 т.п.н., соответствующие NCBI36/hg18 chr12:87,854,729-87,857,439, были синтезированы с помощью GenScript и клонированы в вектор PUC19. Клон GenScript расщепляли с помощью EcoRI и вставляли фрагмент EcoRI размером 4,7 т.п.н. из клона TOPO. Полученную вставку h2 размером 7,4 т.п.н. высвобождали расщеплением NotI и клонировали в вектор Not5’hsp68 lacZ .

Геномные фрагменты в h3-BLD и HFE-BLD амплифицировали из исландской ДНК человека (Coriell #GM15755) и клонировали в векторы Not5’hsp68 lacZ или pTA- luc соответственно.

Вставка h3-DEL была получена путем амплификации двух продуктов ПЦР, h3del1 и h3del2, из геномной ДНК человека (Clontech). Эти промежуточные продукты ПЦР объединяли вместе в третьем цикле ПЦР для получения делеции 11 п.н. в более крупном клоне размером 6,7 т.п.н. Точно так же делеция 11 п.н. в 1.Вставка HFE-DEL размером 9 т.п.н. была образована путем ПЦР-соединения двух промежуточных продуктов ПЦР, HFEdel1 и HFEdel2.

Вставки 7X ANC и 7X BLD были созданы путем отжига перекрывающихся олигонуклеотидов, заполнения концов Кленова и клонирования полученных продуктов TOPO. Клоны секвенировали для идентификации вставок 7X, которые высвобождались расщеплением XhoI и клонировали в pTA- luc .

Для создания плазмид HE- Kitlg сайт attB амплифицировали из pBT316 40 и клонировали в сайт SacI pBSKS+, чтобы получить 5’attBpBS.Промотор Hsp68 и фрагменты полиаденилирования SV40 с концами, перекрывающими кДНК Kitlg , амплифицировали из Not5’Hsp68 lacZ . кДНК Kitlg с концами, перекрывающими промотор Hsp68 и фрагменты SV40pA, амплифицировали из клона Thermo Scientific MMM1013_65096. Затем промежуточные продукты ПЦР Kitlg и SV40pA объединяли во втором цикле ПЦР. Наконец, промотор Hsp68 и промежуточные соединения Kitlg SV40pA объединяли в третьем цикле ПЦР.Фрагмент размером 2,2 т.п.н. очищали на геле и клонировали ТОРО. Плазмиду Hsp68KitlgSV40pA TOPO расщепляли NotI и SalI, и вставку клонировали в 5’attBpBS с получением attB Kitlg . Второй сайт attB добавляли путем расщепления attB Kitlg с помощью SalI и лигирования сайта attB, высвобожденного из миникольцевого вектора pBT346 40 с помощью расщепления SalI, с получением attB Kitlg attB. Минимальные энхансеры волос ANC и BLD размером 864 п.н. были амплифицированы из Clontech или исландской ДНК человека.Продукты ПЦР расщепляли NotI и клонировали в 5′-сайт NotI в attB KitIg attB, чтобы получить конечные конструкции ANC- Kitlg и BLD- Kitlg .

Секвенирование по Сэнгеру подтвердило достоверность последовательности всех конструкций ДНК. . Поэтапные последовательности от 93 финнов, 89 британцев и 88 африканцев (нигерийские йорубаны) не показали дополнительных изменений общих пар оснований в области HFE, которые были связаны с rs12821256.

Репортерные анализы люциферазы

Линию клеток кератиноцитов человека HaCaT (CLS, Германия) культивировали в среде DMEM с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки, 2 мМ L-глутамина и 1% пенициллин-стрептомицина. Клетки высевали в 24-луночные планшеты с плотностью 1×10 5 клеток/лунку. 370 нг pTA- luc или энхансерных клонов HFE-ANC, HFE-BLD или HFE-DEL трансфицировали с использованием Lipofectamine 2000 (Invitrogen) с 30 нг pRL- tk (Promega). Для получения кривых отклика LEF 0 (220) нг, 5 (215) нг, 10 (210) нг, 28 (192) нг или 30 (190) нг плазмид XE237 (pCS2+) котрансфицировали с использованием Lipofectamine 2000 с 150 нг конструкций pTA- luc , 7X LEF, 7X ANC или 7X BLD и 30 нг pRL- tk .Через 5 часов после трансфекции среду для культивирования клеток заменяли стандартной средой с добавлением 2,8 мМ хлорида кальция (Sigma). Лизаты клеток собирали через 48 часов и анализировали в системе Glo/Max Multi+ Detection (Promega) с использованием репортерной системы анализа с двумя люциферазами (Promega) в соответствии с инструкциями производителя.

Количественный анализ ОТ-ПЦР

Образцы кожи спины гибридов P8 или P21 FVB/C57Bl/6J F1 с генотипами +/+ ​​ , BLD-Kitlg/+ или ANC-Kitlg/+ и P8 дикого типа (C3H), генотипы Sl pan /+ или Sl pan /Sl pan помещали во флаконы FastPrep Lysing Matrix A (MP Biomedicals) с 1 мл TriReagent (Ambion).Ткани гомогенизировали с использованием MP FastPrep-24 с 4 импульсами по 30 с при скорости 6,0 М/с с 2-минутной инкубацией на льду после каждого 30-секундного импульса. После разрушения ткани готовили тотальную РНК в соответствии с инструкциями производителя. Загрязняющую геномную ДНК удаляли из образцов РНК перед синтезом кДНК с использованием ДНКазы I (Invitrogen). кДНК транскрибировали с 500 нг тотальной РНК, используя супермикс для синтеза первой нити Superscript III (Invitrogen). Количественную ОТ-ПЦР проводили с использованием праймеров Kitlg (Kg1580/Kg1581) и праймеров Actb (Kg1588/Kg1589).Все реакции проводили в трех повторах с использованием Brilliant Green Low Rox Master mix (Agilent) по двухэтапному протоколу (40 циклов 95°C 15 с, 60°C 1 мин) на системе ПЦР Mx3005P (Stratagene).

Количественное определение уровней пигментации в сайт-специфических трансгенных линиях

Образцы дорсальных волос были собраны у гибридов FVB/C57Bl/6J F1, BLD-Kitlg/+ (линия 2) и ANCKitlg/+ (линия 2) гетерозиготы по Р21. Множественные зигзагообразные волосы были разделены, прикреплены к куску ленты и прикреплены к предметному стеклу.Наносили покровное стекло с помощью Aquamount и фотографировали среднюю часть волос между самыми дистальными изгибами 15 волосков на животное с помощью аксиофота Zeiss (объектив 32X, лампа 3200K) со временем экспозиции 16 мс. Изображения были импортированы в Adobe Photoshop и измерены для определения средней плотности пигмента на волос (определяемой как общее количество пикселей, соответствующих пигментированным областям, деленное на общее количество пикселей, составляющих стержень волоса).

Статистический анализ

Для экспериментов с клеточными культурами среднюю активность конструкции в данном эксперименте рассчитывали с использованием 6–8 индивидуально трансфицированных лунок.Значения исходной люциферазы светлячка нормализовали до значений люциферазы Renilla для контроля изменения эффективности трансфекции. Повышенная экспрессия HFE или мини-промотора представляет собой активность выше базового уровня экспрессии pTA- luc . Все эксперименты были повторены (энхансеры HFE N=5–8; мини-промоторы 7X N=2). Программное обеспечение InStat использовалось для определения статистической значимости экспрессии энхансера HFE в непарных односторонних t-тестах после проверки нормальности. MetaP 46 использовали для объединения значений P из повторных экспериментов с энхансером HFE.Сообщалось о комбинированном P-значении Stouffer Z, которое корректировало размер выборки. Критерий Манна-Уитни, который не делает предположений относительно распределения данных, использовали для определения значимости в экспериментах с мини-промоторами. На всех графиках и графиках показано среднее значение ± стандартная ошибка среднего.

Для количественных экспериментов RT-PCR экспрессия Kitlg у животных из 3 пометов для каждого трансгена была проанализирована, чтобы получить в общей сложности 22 дикого типа, 11 BLD-Kitlg/+, и 13 ANC-Kitlg/+ образцы.Чтобы контролировать изменчивость в экспериментах, проводимых в разные дни, экспрессию генов во всех трех генотипических классах нормализовали до экспрессии в одном 2-месячном образце спинной кожи дикого типа. Относительную экспрессию Kitlg в каждом образце кожи затем нормализовали до Actb с использованием метода PFAFFL 47 . Уровни экспрессии Kitlg в двух наборах однопометников дикого типа существенно не отличались друг от друга (двусторонний непарный t-критерий InStat P=0.1666 г.). Повышение экспрессии Kitlg у животных BLDKitlg/+ и ANC-Kitlg/+ рассчитывали относительно экспрессии у их однопометников дикого типа. Построение графика и статистический анализ проводили с использованием критерия суммы рангов Р. Манна-Уитни для определения значимости.

Количественные эксперименты RT-PCR на образцах кожи спины, взятых на P21 из второй пары сайт-специфических линий, проводили на животных из 2 пометов, всего 4 диких типа, 3 BLD-Kitlg/+, и 3 ANC-Kitlg/+ образцов.Образцы обрабатывали, как указано выше, и определяли статистическую значимость с использованием программного обеспечения InStat для выполнения непарных односторонних t-тестов.

Для количественных экспериментов ОТ-ПЦР на Sl pan животных экспрессия Kitlg в 3 пометах (2 Sl pan пометов и 1 помет C3H) была проанализирована, чтобы получить в общей сложности 5 Sl 3 /Sl pan гомозигот, 5 Sl pan /+ гетерозигот и 6 животных C3H дикого типа.Экспрессия генов всех образцов была нормализована к экспрессии в одном 2-месячном образце спинной кожи дикого типа. Относительную экспрессию Kitlg в каждом образце кожи затем нормализовали до Actb с использованием метода PFAFFL 47 . Тесты Манна-Уитни были выполнены с использованием программного обеспечения InStat для определения статистической значимости.

Для анализа плотности пигмента было измерено 15 отдельных зигзагообразных волосков у каждого из 4 животных дикого типа, 3 BLD-Kitlg/+, и 3 ANC-Kitlg/+ животных.Сообщаемые уровни пигментации для генотипических классов дикого типа, BLD и ANC представляют собой средние значения пигментации для каждого животного этого генотипа. Программное обеспечение InStat использовалось для определения статистической значимости с использованием непарных односторонних t-тестов.

Поколение Z объявляет светлые волосы немодными, делая выбор в пользу темных волос

Джентльмены могут предпочесть блондинок, но не представителей поколения Z.

От осуждения пробора на бок и джинсов скинни до отказа от двухпартийной политической системы и, совсем недавно, от AirPods, поколение Z снова нанесло удар, заявив, что светлые волосы устарели, а более темные оттенки в моде.

TikTokers вышли на платформу, чтобы объявить, что яркий оттенок — это «дурь», и что теперь единственный выход — быть «дорогой брюнеткой». Термин «cheugy», в основном используемый молодым поколением, описывается как что-то немодное или не стильное.

Модель

Алисса Лоррейн поделилась видео, на котором ее светлые локоны заплетены в мягкие косы, и объяснила, что покрасила волосы в их первоначальный цвет. Однако сейчас ее настоящий медовый оттенок не в моде.

«Вернулась к блондинке после того, как скрывала свой натуральный цвет [и] красила его в сумасшедшие цвета в течение 17 лет.Блондинка теперь крутая», — написала она в своем клипе.

Пользователь под ником The Digital Fairy спросила своих зрителей в видео: «Блондинка — это модно?», отметив, что знаменитости, такие как Джиджи Хадид, Флоренс Пью и Хейли Бибер, отказались от своих соломенных платьев и перешли в брюнетки. последние недели.

Пользователи TikTok обратились к платформе социальных сетей, чтобы заявить, что быть блондином — это немодно, и что быть брюнеткой — теперь единственный выход. 2008 года», — добавила она, сославшись на дополнительные доказательства в статье журнала iD о увлечении стилем «корнями рецессии».Это увлечение началось, когда у женщин в то время заканчивались деньги, и они не могли ходить в салон каждую неделю для подкрашивания корней, объяснила она, поэтому они начали отращивать свои натуральные волосы, смешанные со светлыми прядями.

Она также отметила, что статья i-D предполагает, что разнообразие и инклюзивность могут сыграть свою роль, задаваясь вопросом, может ли «тенденция отказа от блондинки также быть тенденцией к более разнообразным идеалам красоты».

Цифровая фея также говорила о термине «дорогая брюнетка», тенденции, отдающей предпочтение темным локонам, или, как выразился знаменитый парикмахер Лайам Карран, «все о роскошном ощущении волос, уделяя особое внимание размеру, блеску и здоровью волос.

«Техники окрашивания волос изменились в последние годы с появлением балаяжа, и клиенты, которые теперь как никогда нуждаются в прическе, не требующей особого ухода и создающей ощущение дороговизны», — объяснил Карран Stylist UK ранее в этом месяце.

Более темные волосы могут быть частью тенденции принятия более разнообразных стандартов красоты в ближайшем будущем. Getty Images

«В течение многих лет блондинки наслаждались красивыми сочетаниями светлых тонов, и теперь брюнетки хотят того же. Смешивание множества различных оттенков и завершающая обработка роскошными тонирующими средствами не только придает красивый цвет, но и придает красивый блеск», — добавил Карран.

В отдельном вирусном TikTok пользователь @GirlBossTown также задался золотым вопросом: «БЫТЬ БЛОНДИНКОМ [CHEUGY]???» Она отметила, что такие модели, как 26-летняя Хадид и 24-летний Бибер, а также «каждая знаменитость, крутая девушка [и] модель темнеют со своими волосами».

Тем не менее, она планирует перекрасить волосы в платиновый блонд, «как я делаю каждый раз», когда посещает парикмахерскую, и беспокоится, что ее прическа будет выглядеть устаревшей.

«Мне дурно из-за того, что я блондинка?» — серьезно спрашивает она.»Дайте мне знать.»

лучших оттенков светлых красок для волос 2016

Быть красивой блондинкой — отличная идея для вас, чтобы быть удивительным и получать удивительные места. В этом году светло-золотистые волосы — лучший образец для всех женщин. Светло-русый оттенок делает женщин такими крутыми и модными. Независимо от того, короткие у вас волосы или длинные, они всегда будут нести вам много объявлений, когда вы делаете из них различные прически.

Лучшие оттенки светлых красок для волос 2014
Если у вас уже есть светлые волосы или вы планируете их получить, мы хотели бы предложить вам эти оттенки светлых волос, чтобы мотивировать вас.В этой публикации вы увидите 9 лучших концепций оттенков для светлых волос. Изучите их и воссоздайте их в более причудливом виде.
Найти еще
5 самых горячих идей цвета светлых волос на лето Светло-пепельный блондин

Все больше и больше знаменитостей выбирают пепельно-русый оттенок для своих очаровательных локонов, таких как Бейонсе и Тейлор Свифт. Светло-пепельный златокудрый умеренный, но довольно фантастический. Независимо от того, имеете ли вы черный или нормальный оттенок кожи, копна пепельных златокудрых прядей сделает ваш эпидермис сияющим.Кроме того, пепельный златокудрый – это мягкий оттенок, который подходит практически для всех мероприятий и не выбивает вас из моды.

Самый бледный из блондинов, который имеет оттенки пепла или белый цвет с мягкими естественными и рыжими оттенками, и хорошо сочетается с женщинами со светлым цветом эпидермиса.

Пепельно-русый цвет волос для длинных волос Светло-русый:

Светло-русый, не слишком холодный, не слишком теплый, красивый тон. Настоящие мягкие золотистые локоны — это златовласые волосы многих девушек в молодости, до того, как их пряди станут черными.Находясь прямо между пепельным и фантастическим блондом, мягкий золотисто-русый оттенок работает с нежной кожей и легким оттенком глаз, например, коричневым или светящимся синим.

Светло-золотистый блонд:

Билайн Мед:

Самый горячий из блондинов, Beeline Sweetie Locks — это богатый общий тон, который отлично подходит для теплого оттенка кожи. Beeline Honey, по своим характеристикам, оттенок Sweetie Locks имеет тенденцию быть более блестящим из-за его перспективного оттенка.

Среднее шампанское:

Кожа с розовым или розовым оттенком хорошо сочетается с бежевыми тонами волос цвета шампанского средней длины.Зеленые и синие оттенки цвета игристого вина будут иметь дело со светло-красными оттенками вашего слоя эпидермиса.

Ириска:

Светло-коричневый с золотистыми волосами, цвет волос цвета ириски подходит для метода, теплый оттенок кожи.

Подсолнечный блонд:

The Wet hair Look в оттенке подсолнухового блонда выглядит очень круто.

Чистый алмаз:

Низкий и свободный хвост в чистом ромбе выглядит очень круто. Ключ к стилю — обернуть конский хвост толстым куском кожи.


Карамельный блонд:

Карамельный блонд — это красивый цвет, который находится между бежевым блондом и золотисто-коричневым оттенком. Это наименование отражает как нечто богатое ароматом и богатое очарованием. Цвет карамельный блонд – самый подходящий оттенок золотоволосым наряду со всеми типами кожи. Это также создает впечатление природы, а также популярных цветов.

Если вы хотите золотистый оттенок локонов, не слишком откровенный и не требующий сильного отбеливания, карамельный оттенок — идеальный выбор для вас.Карамельный оттенок златокудрых прядей подчеркнет оттенок сладости и наряду с любимым напитком большинства людей. Этот оттенок локонов — прекрасный знак карамели.
Найти еще
Темные волосы со светлыми и карамельными бликами

Лучший выбор:


Красивый цвет волос «солнечный поцелуй» с горячим кофе цвета шампанского и чистыми бриллиантовыми оттенками.
.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.