Экранирование эстель инструкция: Инструкция для процедуры экранирования волос Estel Q3 Oil Rich

Содержание

отзывы, инструкция, как часто можно делать?

Экранирование волос Эстель — это совершенно новый способ обработки, при котором локоны становятся невероятно гладкими и блестящими.

Столь внушительный эффект создается за счет насыщения волосяного покрова специальным витаминно-питательным комплексом, который глубоко проникает в структуру каждого волоса.

Компания Estel включила в свой набор для экранирования волос все необходимые компоненты, что позволяет выполнить данную обработку локонов даже в домашних условиях.

Стоит отметить, что для достижения желаемого результата понадобиться всего лишь одна процедура.

Компания Estel уже давно является одним из лидеров по производству профессиональной косметики по уходу за волосами.

Ее продукция создается на основе натуральных природных компонентов, которые помогают волосам приобретать по-настоящему потрясающий вид.

Набор для экранирования от Эстель полностью готов к применению и содержит все необходимые для проведения экранирования средства.

Также к нему прилагается инструкция, в которой подробно расписывается порядок действия.

При соблюдении всех рекомендаций производителя по экранированию волос набором Estel, результат превзойдет все ожидания, и в этом можно убедиться, если взглянуть на фото, размещенное ниже.

Принципы экранирования

Такая косметическая процедура, как экранирование, появилась относительно недавно, однако уже успела стать популярной у представительниц прекрасной половины человечества.

Экранирование позволяет делать волосы на голове невероятно гладкими и блестящими, кроме этого, внутренняя структура локонов укрепляется.

Суть данного метода заключается в нанесении на волосы специального состава. Данное средство покрывает каждый волосяной стержень специальной защитной витаминной пленкой.

Такое покрытие не дает возможности кислороду проникать в структуру локонов, в свою очередь, витаминные группы, из которых преимущественно состоит данное средство, остаются на внешней оболочке волосяного покрова.

При проведении экранирования данное средство равномерно распределяется по всей поверхности локонов, в результате чего пряди становятся не только крепкими, но и объемными.

Процедура позволяет максимально насытить структуру волос полезными микроэлементами, что дает возможность волосам выглядеть невероятно привлекательно.

Данное средство состоит преимущественно из натуральных компонентов, которые активно воздействуют как на сам волосяной покров, так и на его корни.

До недавнего времени выполнить экранирование можно было только в косметических салонах, однако набор Эстель позволяет делать данную процедуру и в домашних условиях.

Данный метод обработки волос имеет свои плюсы и минусы. К достоинствам экранирования можно отнести то, что после выполнения процедуры волосы на голове значительно увеличиваются в своем объеме.

Также данная процедура позволяет насытить волосы здоровой энергией и придать им блестящий и красивый вид.

Средство содержит в своем составе некоторые природные белковые соединения, которые насыщают волосяной стержень аминокислотами изнутри.

Кроме этого, экранирование позволяет образовать на волосяном покрове незаметную защитную пленку, которая эффективно оградит кудри от негативного внешнего воздействия атмосферы.

Данное средство также помогает окрашенным локонам более долго сохранять свой насыщенный цвет.

При регулярном выполнении экранирования волосы на голове становятся гладкими, невероятно легкими и максимально послушными, и в этом можно убедиться, если посмотреть на фото ниже.

К недостаткам данного метода можно отнести его недолговечность. Кроме этого, после экранирования волосы на голове становятся более жесткими.

Для того чтобы выполнить экранирование самостоятельно в домашних условиях, необходимо только лишь приобрести специальный набор Estel и в точности выполнять все рекомендации производителя, которые указаны в прилагаемой инструкции.

Характерные особенности

Данная процедура является относительно новой, и даже несмотря на то, что ее делают не в каждом косметическом салоне, набор Эстель позволяет выполнить экранирование самостоятельно в домашних условиях.

Следует отметить и то, что стоимость экранирования достаточно высокая.

Связано это, главным образом, с дороговизной тех компонентов, которые используются во время проведения процедуры. Экранирование бывает цветным и полностью бесцветным.

В первом случае волосяной покров будет равномерно окрашен по всей своей площади, при этом структура волос никак не пострадает, так как средство в своем составе не содержит аммиак.

В свою очередь, бесцветное экранирование дает возможность подчеркнуть естественную красоту локонов.

Данный метод имеет накопительный характер, а значит, волосы приобретают желаемый блеск только после нескольких процедур, однако многочисленные отзывы свидетельствуют о том, что положительный результат заметен уже после первого раза.

Универсальный набор для экранирования от Эстель позволяет добиться желаемого эффекта уже после первого нанесения специального состава на волосы.

Многочисленные отзывы от реальных людей свидетельствуют о том, что после первой процедуры локоны наливаются невероятным объемом.

Такого эффекта удается достичь за счет образования на волосяном покрове специальной пленки. Кроме этого, практически сразу значительно усиливается блеск локонов.

Они наполняются природными оттенками и здоровой энергией.

После использования набора для экранирования Эстель, волосы становятся максимально послушными и легко укладываются практически в любую прическу.

Видео:

Следует отметить и то, что после проведения данной процедуры волосяной покров становится устойчив к самым разным негативным воздействиям со стороны.

Те компоненты, которые входят в набор от Эстель, в своем составе имеют только натуральные ингредиенты и максимально насыщенны самыми разными витаминными группами.

Технология выполнения экранирования относительно проста, однако имеет некоторые нюансы и тонкости, которые необходимо в обязательном порядке учитывать.

Технология выполнения

Несмотря на некоторые сложности данной процедуры, набор Эстель позволяет без проблем выполнить ее самостоятельно в домашних условиях.

В этом случае главное соблюдать рекомендованный порядок действий, который подробно расписан в инструкции к набору Эстель.

В первую очередь, следует тщательно промыть волосы, и для этого необходимо использовать специальный шампунь, который позволяет выполнить глубокую очистку волосяного покрова.

Это даст возможность избавить кудри от накопившейся в них грязи и пыли, тем самым позволит более глубоко проникать в структуру волос всем питательным компонентам.

Далее следует слегка промокнуть локоны на голове махровым полотенцем, при этом они должны остаться слегка влажными.

После этого на волосяной покров равномерно распределяется смесь из первого флакона, которая делает кудри мягкими и невероятно послушными. Состав должен хорошо впитаться в локоны.

Далее на волосы наносится масляный состав из второго флакона, при этом не следует его втирать в корни локонов, чтобы не было эффекта жирности.

После того как состав немного впитается, на волосяной покров наносится смесь из последнего флакона, которая и делает локоны на голове блестящими и сияющими.

При нанесении средств из набора Эстель следует внимательно контролировать, чтобы они равномерно покрыли всю поверхность волосяного покрова на голове.

После того как указанное в инструкции время воздействия состава на волосы истечет, голову необходимо тщательно промыть под сильным напором теплой воды.

Далее следует локоны тщательно просушить при помощи фена.

Если делать все действия в точном соответствии с рекомендациями производителя, то волосы приобретут по-настоящему живой оттенок, как на фото ниже.

Подробно о том, как самостоятельно сделать экранирование при помощи набора Эстель, рассказано на видео, которое размещено ниже.

Следует отметить, что косметический набор Эстель позволяет добиться потрясающего результата, который ни в чем не будет уступать салонной процедуре.

Это подтверждают и многочисленные отзывы тех женщин, которые на себе испытали эффективность набора Эстель.

Делать экранирование волос можно достаточно часто, так как, входящие в состав средства из набора Эстель, компоненты содержат преимущественно натуральные микроэлементы, которые максимально насыщают волосяной покров на голове самыми разными витаминными комплексами.

Главным преимуществом использования для экранирования волос набора Эстель является то, что в его состав входят все необходимые средства.

Данные средства насыщены природными белками, полезными кислотами, а также натуральными керамидами, что позволяет выполнять экранирование достаточно часто.

При использовании набора Эстель эффект наступает буквально после первой косметической процедуры.

Волосы насыщаются потрясающим блеском, а кроме этого, хорошо укрепляется их внутренняя структура.

Наборы Эстель для выполнения экранирования рекомендуют многие профессиональные косметологи.

Вы здесь:

8457 Опубликовано 13 ноября 2015

Наборы для экранирования волос Estel, цена, отзывы и инструкция

Что такое экранирование Эстель и его преимущества

На сегодняшний день экранирование эстель довольной новая салонная процедура и еще не все знают о ней. Ее очень часто ошибочно называют ламинированием, потому что эффект очень похож, и показания у них  одинаковые: пористые, тонкие, секущиеся, окрашенные. Отличие состоит в механизме действия активных элементов. При экранировании создается невидимая плена не только на поверхности волос, но она проникает в структуру и на молекулярном уровне реконструирует поврежденные участки.

В итоге вы получаете такие результаты:

1.    Невероятное сияние.
2.    Увеличение объема на 20- 30%.
3.    Кудри становятся очень послушными и шелковистыми.
4.    Облегчение укладки.
5.    Полное отсутствие повреждений (посеченные кончики, сухость и т.д.)

Как делать экранирование волос от Эстель: инструкция

1.    Вымойте голову качественным шампунем.
2.    После очистки пусть пряди подсохнут естественным образом (без фена).
3.    Наносится двухфазный кондиционер из набора экранирования эстель. Препарат распутывает, разглаживает кутикулу, нормализует кислотность и баланс влаги.
4.    Равномерно распределите масло для экранирования на 15-20 мин. в зависимости от типа и состояния шевелюры, если очень поврежденные, то время выдержки больше.
5.    Просушите и используйте масло-блеск Q3 LUXURY для закрепления от корней до самых кончиков, дайте время впитаться и снова сушите голову.
По окончании, можно сразу же приступать к укладке. Эффект будет держаться до 4 недель, после чего можно повторить.

Где купить экранирование эстель: цена и отзывы

В интернет-магазине “Профистайл вы можете купить набор для экранирования волос Эстель по самой выгодной цене в Украине. Мы осуществляем доставку за один день в Киев, Донецк, Харьков, Днепропетровск и Одессу. Всем покупателям предоставляется возможность получить консультацию технолога по использованию профессиональной косметики.

Набор Estel Q3 Therapy для процедуры экранирования поврежденных волос | Отзывы покупателей


Здравствуйте, девушки  
Многие из нас ежедневно используют помощников для укладки: фен, плойки и прочую необходимую, но сильно вредящую, технику для волос. Я не исключение. Но, как это у всех бывает, в один «прекрасный» момент мои волосы начали подавать сигналы бедствия и я решила действовать во имя спасения своей шевелюры. Начать решила со смены ухода и «несмывашек». Вы когда-нибудь слышали о процедуре «экранирование для волос«? Если заинтересовало — прошу под кат  

При покупке мы получаем картонный бокс, внутри которого находятся три продукта — 1. Двухфазный кондиционер для сильно поврежденных волос, 2. Масло для поврежденных волос, 3. Масло-блеск для всех типов волос. Каждый продукт отдельно упакован в картонную коробку. Имеется инструкция на разных языках.

Производитель утверждает, что действие процедуры

экранирования Q3 Therapy основано на уникальных свойствах арганового масла, а так же масел макадамии и виноградной косточки, обеспечивающих более глубокое питание, восстановление и защиту и наполнение их жизненной силой и энергией. Говоря простым языком, оживляет поврежденные волосы и превращает их из «мочалки» во вполне себе приличный вид. Так ли это? Начинаем разбираться  

Стоит отметить — процедура экранирования — это несмываемый уход для волос. Все средства нужно наносить на мокрые волосы после мытья головы.

1. Двухфазный кондиционер для сильно поврежденных волос
Этот продукт наносится на волосы первым. Нужно хорошо встряхнуть флакон, чтобы смешать две фазы кондиционера, затем распылить на всю длину волос ( на мои волосы чуть ниже плеч нужно 5-6 пшиков). Для чего он нужен? Для увлажнения волос, для выравнивания и для восстановления pH.

2. Масло для поврежденных волос
Вторым этапом в нанесении будет это масло. Нужно нанести небольшое количество (2-3 нажатия) на ладони и разогреть, затем равномерно распределить по всей длине. Нужно для уплотнения волос, усиления блеска и для укрепления структуры.

3. Масло-блеск для всех типов волос
Третьим и последним этапом служит это масло. Нужно распылить масло-блеск на волосы и распределить с помощью расчески. Масло обволакивает волос, защищает и увеличивает светоотражение.

После всего комплекса рекомендуется высушить волосы феном и нанести масло-блеск на уложенные волосы с помощью расчески.

Я делала эту процедуру один раз в неделю на протяжении 4-х месяцев с надеждой на то, что мои не столь «убитые» волосы он сможет привести в нормальный вид. Что я получила? Да ничего, при условии, что я не возлагала больших надежд, мне всего лишь был нужен визуальный эффект. Этого «визуального эффекта» мне не хватило, более того, на ощупь волосы были чересчур жирные, гладкие только благодаря утюжку, без его помощи этот набор вообще был бы бесполезен.

Единственное, что мне понравилось — это масло-блеск. Частенько использую его как самостоятельный продукт после укладки — волосы не жирнит и дает потрясающий блеск, которого, почему-то, не наблюдается после проведения процедуры с 3-мя продуктами

Цена:2500 руб
Срок тестирования (для ухода):4 месяца
Оценка:3

Спасибо за внимание!
Я — Соня  

Как сделать экранирование волос дома

Красивые, здоровые, сияющие волосы всегда считались наилучшим украшением женщины.

Но даже если такие волосы у вас от природы, это вовсе не значит, что вы не должны защищать их от солнца, ветра, мороза и др. агрессивных факторов окружающей среды. Вашим лучшим помощником в решении этого вопроса станет процедура экранирования волос. Не смотря на заумное название процедуры, экранирование волос можно без особых усилий сделать дома, она не требует специальных приспособлений и профессиональных навыков. Но, все же нужно учесть некоторые нюансы и изучить информацию, как правильно проводить экранирование волос в домашних условиях.

В состав средств экранирования входят природные компоненты, растительный белок, натуральные масла, вытяжка трав. Экранирование может быть цветным, а может быть бесцветным.

Многие, кто пробовал экранирование волос отмечают улучшение состояния волос, отзывы в основном положительные. Это все объясняется тем, что экранирование не только косметическая процедура, но и лечебная, она дает довольно ощутимый эффект улучшения структуры волос. Процедура оказывает восстанавливающее, питательное, увлажняющее и укрепляющее действие.

Если волосы здоровые, тяжелые, то результата от процедуры не будет заметно. А также эта процедура не подходит девушкам с слишком жирными волосами. Ну и эффект от процедуры сохраняется не больше месяца, хотя если делать экранирование регулярно, то оно имеет накопительный эффект.

Экранирование волос не следует делать при интенсивном выпадении волос!

Что потребуется для экранирования

Для экранирования волос нужно купить специальные средства, лучше всего покупать наборы в профессиональных магазинах или салонах красоты.

  1. Набор для экранирования. Обычно в набор входит несколько продуктов, например в  Estel это: специальный кондиционер, экранирующее масло и масло-закрепитель.
  2. Глубоко очищающий шампунь. Нужен для тщательного очищения волос и кожи головы от различных загрязнений (укладочные средства, силиконы, пыль, грязь и кожное сало). А также чтобы открыть чешуйки волос для дальнейшего процесса экранирования.
  3. Хороший фен, который должен иметь несколько скоростей и режимов и желательно чтобы он был с ионизацией, так пагубное воздействие на волосы будет минимальным.
  4. Расческа с густыми зубьями, нужна для равномерного распределения средства на волосы.

Виды средств для экранирования

Экранирование волос Q3 THERAPY от Estel (Россия) – инновационная процедура ухода за волосами, в результате которой на волосах формируется защитный экран, обеспечивающий увлажнение и укрепление поврежденной структуры волос изнутри, восстановление естественного уровня pН волос, блеск, защита от UV-лучей и термического воздействия.

Набор идет двух видов: для поврежденных волос и для блиндированных волос, в состав набора для экранирования волос входят:

  • двухфазный кондиционер 100 мл;
  • экранирующее масло 100 мл;
  • масло-блеск (закрепитель) 100 мл.

Estel Professional — самый популярный производитель средств для экранирования волос, это объясняется тем, что после процедуры действительно есть эффект и сравнительно небольшая цена набора.

Набор для экранирования Paul Mitchell (США) — более дорогой производитель наборов для ламинирования, но и результат более выраженный, по сравнению с другими марками для экранирования. Его уникальность заключается в том, что экранирование от Paul Mitchell может быть цветным, есть более 30 различных цветов, которые можно смешивать и создавать еще более насыщенные цвета. В состав входит: очищающий профессиональный шампунь, уходовая маска, экранирующее средство (цветное или бесцветное) и кондиционер.

Набор для экранирования от Kemon (Италия) — профессиональная марка по уходу за волосами, которая выпустила прекрасный набор для экранирования волос, но у нас он не имеет такой популярности, как например, Estel и Paul Mitchell, не многие салоны работают на этом бренде. В набор входит разглаживающий крем, нейтрализатор, восстанавливающий комплекс Кератин плюс, крем-кондиционер, закрепляющий все действие.

Как проводить процедуру экранирования дома с набором Estel?

Экранирование волос дома обойдется на много дешевле, чем в салоне, но если вы боитесь первый раз делать дома, можно один раз сделать в салоне, а потом уже делать дома или пригласить подругу и сделать экранирование друг другу.

Чем больше повреждены волосы, тем больше выраженный эффект вы заметите от процедуры.

Если сделать перед процедурой стрижку и убрать по максимуму посеченные волосы, то эффект будет лучше и волосы дольше останутся ухоженными и красивыми.

Перед началом процедуры обязательно изучите инструкцию, которая входит в набор!

1 этап. Подготовительный. Сначала нужно тщательно очистить кожу головы, для этого нужно использовать шампунь из набора для экранирования, а если его нет, то можно воспользоваться любым другим глубоко очищающем шампунем. Это нужно для того, чтобы смыть все загрязнения с волос, вымыть силиконы и открыть чешуйки волос для следующего этапа.

2 этап. Увлажнения и выравнивая структуры волос. Нужно дать волосам немного подсохнуть, для этого лучше использовать полотенце, а не фен. Волосы должны быть влажными, но с них не должна капать вода. И можно наносить специальный кондиционер, который входит в набор.

Для этого нужно разделить волосы на пряди, хорошо встряхнуть кондиционер, распылить на волосы и при помощи расчески с густыми зубьями нанести состав и тщательно его распределить. Не смывать.

3 этап. Восстановление и укрепление поврежденной структуры волос. Теперь самый важный этап — нанесение экранирующего масла. Масло тщательно распределяем по всех волосах, не затрагивая корни и уделяя особое внимание кончикам волос. Для лучшего распределения масла по волосам, можно использовать расческу. Не смывать.

4 этап. Защита внешнего слоя волос, придание блеска. Дальше очередь масла-блеска,  его также равномерно распределяем по волосам, уделяя внимание кончикам. И уже можно укладывать волосы как обычно, при помощи фена, можно воспользоваться утюжком для закрепления результата. В конце можно еще немного нанести масла-блеска на расческу и расчесать волосы для насыщенного блеска волос.

После экранирования, на поверхности каждого волоска образуется защитный экран, предотвращающий негативное воздействие агрессивных процедур и внешних факторов, как минимум на две недели.

Результат вы увидите сразу после сушки волос. Волосы немного прибавляться в объеме, будет ощущение, что волос стало больше, они станут более послушными (легко расчесываются, укладываются и не спутываются), волосы приобретают гладкость и блеск. Но, результат после первой процедуры будет не очень длительный, а после 3-4 процедур результат будет намного лучше, поскольку экранирование имеет накопительный эффект.

Чтобы усилить и продлить эффект после экранирования начните полноценно ухаживать за волосами, используйте средства для увлажнения, восстановления и питания волос, несмываемые средства и обязательно используйте защиту, если сушите волосы феном.

Как часто проводить экранирование волос

Частота проведения процедуры зависит от состояния волос, если они очень повреждены, то рекомендуется сделать вторую процедуру где-то через десять дней от проведения первой. С каждым разом проведение экранирования будет отодвигаться, за счет накопления эффекта на волосах. Специалисты рекомендуют сделать около 5 процедур с интервалом в 10-20 дней, а если волосы в хорошем состоянии, то раз в месяц. Потом нужно дать волосам время на отдых, около шести месяцев и можно снова повторить курс.

Если делать очень часто экранирование, то можно получить эффект грязных волос, повышение жирности и утяжеления волос, как и во всем остальном, в экранировании, нужно знать меру.

Видеоурок и результаты экранирования волос

Экранирование волос в домашних условиях: основные этапы

Сделать в домашних условиях экранирование — очень просто! Женские волосы постоянно испытывают стресс. Сушка феном, окрашивание и другие процедуры истончают структуру волос, делают их ломкими. Салоны красоты предлагают различные процедуры для восстановления структуры волос, одна из них называется экранирование. Данная услуга дорогостоящая, поэтому не каждая женщина может себе позволить воспользоваться ей, но возможно сделать экранирование волос в домашних условиях.

Экранирование – основные плюсы

Многие девушки, которые успели попробовать данную процедуру, отмечают положительные изменения своих волос, помимо косметического эффекта, она обладает весьма лечебными свойствами. В процессе экранирования происходит активное воздействие специальных веществ на саму структуру волос. После проведенной процедуры волосы хорошо переносят горячую укладку, солнечные лучи, а также сушку феном. Экранирование способствует образованию некой защитной пленки, наделяя волосы изумительным блеском, мягкостью и объёмом. Компоненты входящие в состав, полностью натуральные, которые помогут укрепить и улучшить структуру волос.

Для каких волос необходимо экранирование?

  • слабые, поврежденные, тонкие волосы
  • секущиеся кончики
  • структура волос полностью нарушена от укладок и окрашивания
  • при постоянном нахождении на солнце или морозе, волосы потеряли шелковистость и блеск

Что потребуется для проведения процедуры?

  1. Профессиональный набор средств для экранирования. Самые популярные, это известные марки как Estel Professional и Paul Mitchell, в их состав входят кондиционер, экранирующее масло и масло-закрепитель
  2. Вода. Во время процедуры необходимо несколько раз смывать состав с волос теплой водой.
  3. Сухие полотенца. Нужно подготовить несколько сухих полотенец, так как сушка волос будет проводиться много раз
  4. Фен. Лучше всего использовать профессиональный фен, с несколькими насадками и с выбором оптимальной температуры для более бережной сушки
  5. Расческа для равномерного распределения средства по всей длине волос

Какой марки лучше выбрать средство для экранирования?

Эстель

Существует 2 серии данных средств:

  1. Q3 BLOND для светлых волос
  2. Q3 THERAPY для всех типов волос

В каждым наборе есть двухфазный кондиционер, масло, масло — блеск. Его применение довольно несложное, поэтому каждый с легкостью сможет сделать экранирование дома. Сначала наносится кондиционер, потом масло и чтобы закрепить результаты наносится масло-блеск. Волосы полностью восстанавливаются, и приобретают здоровый блеск и мягкость.

Paul Mitchell

Стоимость его значительно дороже, но и результаты весьма впечатляют. В набор входит специальный профессиональный шампунь, маска по уходу за волосами, экранирующее средство и кондиционер. Шампунь очищает волосы от различных средств после укладок, маска полностью увлажняет структуру волос, а кондиционер распутывает волосы. Использование данного средства довольно простое, сначала наносится шампунь, а после кондиционер, по истечению некоторого времени полностью смывается теплой водой. Затем наносится экранирующее средство примерно на 20 мин, а последний этап это нанесение маски, для закрепления результата.

Кому противопоказана данная процедура?

Если вы переживаете подойдет ли вам данное средство, не будет ли различных нежелательных реакций, то рекомендуем нанести средство на запястье или локоть и посмотреть в течении суток за реакцией кожи.

Давайте рассмотрим несколько основных моментов, кому особенно противопоказана данная процедура:

  • Выпадение волос или частичное облысение. Экранирование заметно утяжеляет волосы, что может спровоцировать еще большее их выпадение
  • Длинные, густые, тяжелые волосы. Такая процедура придаст еще больший вес и принесет немалый дискомфорт, наилучшим решением использовать другую процедуру для восстановления волос
  • Жирные волосы и кожа головы. После экранирования возможно только усиление выделения сальных желез
  • Не рекомендуется проводить данную процедуру, при различных кожных заболеваний
  • Склонность к аллергии или непереносимость компонентов
  • Поврежденная кожа головы в виде травм и царапин

Для получения наилучшего эффекта, начните заблаговременно ухаживать за волосами. Поделайте различные маски, а также следует заранее отстричь секущиеся кончики.

Как проводить экранирование в домашних условиях?

  1. Внимательно ознакомьтесь с инструкцией и следуйте всем указаниям. Особое внимание необходимо обратить на последовательность средств и время их выдержки на волосах.
  2. Используйте профессиональный шампунь и тщательно вымойте волосы, если загрязнение сильное, повторите процедуру. Обмакните волосы полотенцем, чтобы они стали влажными, но не мокрыми.
  3. Распределите по всей длине кондиционер, для наилучшего результата используйте расческу. Лучше всего разделить волосы на пряди, и тщательно нанести средство от корней до самых кончиков. При необходимости смойте волосы теплой водой, если мытье не требуется обмакните пряди волос сухим полотенцем.
  4. Самый важный момент, это нанесение экранирующего средства. Соблюдайте все необходимые пропорции, чтобы получился необходимый эффект. Разделите волосы на пряди и нанесите равномерно средство, используя расческу.
  5. Высушите полностью волосы феном выбрав оптимальную температуру для волос, чтобы не навредить им.
  6. Завершающий этап — масло закрепитель. Нанесите его от корней до самых кончиков.
  7. Высушите волосы и можете приступать к привычной укладке.

Основные преимущества экранирования волос

  • в результате лечебного эффекта волосы становятся более прочными
  • после процедуры появляется необходимый объем
  • волосы получают максимальную защиту от солнечных лучей и холода
  • секущиеся кончики получают необходимое лечение
  • волосы становится блестящими и наполняются здоровым сиянием
  • цвет волос становится более насыщенным, если было недавно окрашивание, то еще более ярким будет цвет
  • можно делать экранирования волос дома, не прибегая к услугам салонов красоты, что делает данную процедуру более эргономичной.

Как правильно ухаживать за волосами после экранирования?

Необходимо обеспечить правильный уход волосам и при мытье использовать шампуни с наименьшим уровнем кислотности. Нельзя использовать средства для глубокой очистки и стоит немного ограничить использование утюжков, фена и плойки для волос. Если придерживаться этих простых правил, эффект сохранится на продолжительное время, и будет служить надежной защитой вашим волосам от различных внешних сред и воздействий.

Как делать экранирование волос в домашних условиях

Каждая женщина мечтает о красивых, сильных и здоровых волосах, но ухудшение экологической ситуации в мире, несбалансированное питание и бесконтрольное употребление средств для укладки, а также пользование электрическими приборами для сушки и других процедур, делают пряди безжизненными и ломкими. Справиться с многочисленными проблемами способна такая процедура, как экранирование.

Для чего нужно экранирование

Эту процедуру еще называют шайнинг, что с английского переводится как «сияние». В принципе, уже по самому названию становится ясно, что дает экранирование. Свойства природного полимера и масел, используемых при данном лечении волос таковы, что они укрепляют пряди изнутри, делают их более увлажненными, блестящими и эластичными.

Экранирование волос осуществляется средствами профессиональной косметики известных брендов в три этапа.

  1. Первая ступень состоит из кондиционирования, при котором корректируется уровень рН, приглаживается кутикула, улучшается внешний вид прядей, происходит полное увлажнение локонов.
  2. На втором этапе в качестве главного действующего компонента применяется живительное масло, которое заполняет пористую структуру волоса и надолго обеспечивает его необходимым питанием. На этом этапе локоны становятся более упругими и как принято говорить «стекловидными».
  3. Третий этап – закрепляющий, на котором придается форма и объем, увеличивается продолжительность эффекта экранирования, обеспечивается красивый блеск.

Процедура в домашних условиях

Сегодня в специализированных магазинах можно приобрести наборы для экранирования волос в привычных домашних условиях от самых разных производителей, например, «Эстель», «Kemon», «Paul Mitchell». В них, как правило, входит сам состав для шайнинга, бальзам или кондиционер, увлажняющие и закрепляющие компоненты, подробная инструкция и резиновые перчатки. При желании можно найти такой набор в цветном варианте и вместе с экранированием произвести окрашивание волос или слегка освежить их оттенок.

Как же выполняется процедура для волос «экранирование»? Рассмотрим действия пошагово.

  1. Тщательно вымыть голову шампунем, дождаться, когда уйдет лишняя вода и покрыть волосы бальзамом.
  2. Локоны должны быть влажными, но недопустимо, чтобы с них капала вода, поэтому их можно слегка промокнуть сухой тканью или полотенцем, но ни в коем случае не тереть.
  3. Теперь пришло время нанести сам лечебный состав для шайнинга. Здесь очень важно равномерно распределить его от корней до самых кончиков, не пропуская ни сантиметра прядей. Работать нужно только в перчатках и не допускать попадания средства в глаза, нос или рот.
  4. По происшествии времени, указанного в инструкции, состав обильно смыть проточной водой, высушить пряди полотенцем, а после феном.
  5. Покрыть локоны завершающим составом и снова высушить феном.

Что нельзя делать при процедуре

Интересуясь, как делать экранирование, стоит помнить, что по своему усмотрению изменять время воздействия каждого из средств строго запрещено, так как эффект может быть прямо противоположным. При наличии каких-либо порезов, ран и других повреждений на коже от шайнинга лучше на время отказаться. При сильном выпадении волос и индивидуальной непереносимости отдельных ингредиентов составов процедура экранирования также не рекомендована к выполнению.

Если менее 14 дней назад было проведено обесцвечивание или химическая завивка, то последствия шайнинга будет сложно предсказать, поэтому в этом случае с ним стоит повременить.

Вред экранирования

Рассматривая фото экранирования волос, сложно себе представить какой-либо вред от этой процедуры. Спутанные, неопрятные, тусклые и безжизненные до нее, после они полностью преображаются, рассыпаясь по плечам ровной гладью и производя невероятный блеск.Однако, многие женщины замечают, что жесткость прядей немного повышается, что обусловлено наличием защитной пленки. Кроме того, мечтая о блеске волос, каждая женщина представляет его себе по-своему и некоторые выглядят несколько разочарованными, так как полученный результат смахивает на блеск стекла.

Вреда экранирование волосам не приносит, но эффект, достигнутый такими трудами и материальными затратами, держится не очень долго – всего 2–4 недели, а значит по происшествии этого времени процедуру придется повторять. Кроме того, после мытья головы локоны могут проявлять излишнюю наэлектризованность, но эту проблему легко решить, если регулярно пользоваться бальзамом, либо кондиционером.

Собственно, других недостатков процедуры не отмечается, а достоинств не счесть, поэтому время от времени свои волосы можно баловать таким способом, благо теперь нет необходимости платить мастеру за эту работу – все можно сделать самостоятельно. Удачи!

Процедура экранирование волос, плюсы и минусы, обзор косметики: estel(эстель), paul mitchell

Что за процедура

Процедура не сложная. Делать ее довольно просто даже в домашних условиях.

Как делается и сколько держится

Выполняют экранирование в такой последовательности:

  1. Моют голову шампунем;
  2. На влажные волосы наносят маску, выдерживают ее не меньше 10 минут. Она позволяет прядям лучше впитывать в себя необходимые компоненты;
  3. Смыв маску, нанести средство для экранирования, распределив его по всей длине локонов. Голову накрыть полиэтиленовым кульком или шапочкой, укутать полотенцем. Не смывать 20 минут;
  4. Очищенные, промытые с бальзамом, подготовленные волосы просушить феном, уложить с помощью средства, придающего необходимый блеск.

Сохранить эффект удается не больше 14 дней. Иногда эта цифра уменьшается из-за структуры, типа локонов, степени их повреждения, пересушенности.

Чем чаще делать экранирование, тем дольше будет держатся эффект на голове, не смываясь. Достигается это за счет постепенного утолщения волосинок.

Весь курс лечения волос состоит из 5-10 повторений. Если по завершении результата вы не увидели, повторять экранирование можно будет только через 6 месяцев.

Внимание! Прежде чем проводить процедуру, не забудьте взвесить все плюсы и минусы. Изучите отзывы, посоветуйтесь с профессиональным парикмахером.

Плюсы

  • Обеспечивает защиту прядей от ультрафиолета, ветра, дождя, перепада температур;
  • Насыщает волосинки влагой;
  • Восстанавливает пересушенные локоны;
  • Не приводит к выпадению, поскольку не утяжеляет волосы;
  • Лишен какого-либо цвета, поэтому не способен изменять оттенок натуральных или окрашенных прядей;
  • Волосы приобретают сияющий эффект;
  • Идеально для тонких, слабых волосинок, потому что экранирование заметно утолщает их;
  • В своем составе не содержит вредных компонентов;
  • Помогает расчесывать запутанные пряди.

Справка! Существует также цветное экранирование, которое полностью заменяет традиционное окрашивание, но при этом не содержит аммиака и дополнительно укрепляет волосы.

Минусы

  • Недолгий эффект от процедуры;
  • За качественные препараты для экранирования придется заплатит немало денег;
  • Если делать экранирование на здоровых локонах, то результат заметен не всегда.

Противопоказания

  • Запрещена людям с проблемой выпадения волос;
  • Если есть непереносимость отдельных компонентов средства, аллергические реакции на них;
  • Когда на коже головы есть раны, царапины, повреждения;
  • При жирном типе волос.

Опрос: Вы делали процедуру экранирования волос?

Всего голосов: 26. Всего участников: 26.

Популярная косметика

Экранирование волос Estel Professional Q3 (Эстель)

Компания Эстель предлагает набор для экранирования, состоящий из трех флаконов:

  1. Кондиционера;
  2. Масла;
  3. Спрея для создания необходимого блеска.

Удобство и преимущество данного комплекса над конкурентами в том, что хватает его на несколько применений, а разный цвет бутылок со средствами облегчает эргономику и ускоряет нанесения средств. Состав препаратов полностью натуральный и безвредный для волос и кожи головы. Компания выпускает два вида наборов: для блондинок и девушек с темным цветом прядей.

Используя продукцию estel, блондинки могут не бояться за сохранность цвета, потому что средства не способны  изменить оттенок в желтый или тусклый.

Из недостатков высокая стоимость продукции Эстель, повышенная электризация, а также запрет применения на жирной коже головы.

Paul Mitchell Shines Clear

Состоит набор этого мирового бренда из четырех компонентов:

  1. Шампуня;
  2. Маски, обеспечивающей повышенное увлажнение;
  3. Препарата для проведения экранирования;
  4. Средства, препятствующего запутыванию, облегчающего расчесывание.

Средство от компании Paul Mitchell — это краска (главное отличие от конкурентов и фишка). Можно легко подобрать подходящий цвет (в наборе около 30 оттенков) и безвредно покрасить волосы, одновременно укрепив и восстановив их.

В состав средств входят только натуральные ингредиенты: олеиновые кислоты, протеины сои, пшеницы, лекарственные травы.

Из недостатков выделяют только слишком высокую цену на средства.

Что лучше: экранирование или ламинирование волос

Обе эти процедуры популярны в салонах красоты и парикмахерских, потому что улучшают общее состояние волос. Нередко они дополняют друг друга для достижения лучшего эффекта.

Разбираясь в том, чем отличается ламинирование от экранирования, можно с уверенностью сказать, что первое воздействует на поверхностною часть волоса, а второе – на внутреннюю.

Видео

Проведение процедуры в домашних условиях

Выполнить экранирование дома достаточно легко. Последовательность действий в домашних условиях ничем не отличается от тех, которые бы проводили в парикмахерской:

  1. Вымойте голову очищающим шампунем;
  2. Нанесите увлажняющую маску, следуя инструкции. Добросовестный производитель обязательно укажет, что для определенного типа волос нужно выдержать массу на голове определенный промежуток времени;
  3. Наденьте перчатки на руки, если вы будете использовать набор для цветного экранирования. Не забудьте также смазать область возле лица кремом. Так удастся избежать окрашивания рук и лица, от которого в дальнейшем будет сложно избавиться.

Чтобы лучше распределить средство для экранирования на пряди, используйте гребень или другую удобную расческу. Наносить вещество следует от корней, двигаясь к кончикам.

Завершающий этап — мытье головы теплой водой с применением бальзама для волос.

Результат

Избежать непредсказуемых результатов в домашних условиях удастся лишь в том случае, если покупать продукцию известных брендов. Не забывайте предварительно изучить рекомендации по использованию, не превышайте время проведения процедуры. Если вы собрались полностью перекрасить волосы, сделайте это до экранирования. Так вам удастся восстановить поврежденные краской локоны, придав им еще более неповторимый вид.

Результаты до и после

Olivia: 21 yearsСветлана: 34 годаОксана 28 лет

Фотографии: google, pexels

В ближайшее время добавим отзывы, раздел находится в разработке

Рейтинг: 5 / 5 (4)

Визуальная атака и защита систем НЛП

Ссылки

Мустафа Алзантот, Яш Шарма, Ахмед Эльгохари,

Бо-Джанг Хо, Мани Шривастава и Кай-Вей Чанг.

2018. Создание состязательных примеров на естественном языке

расширений. В материалах конференции 2018 г. по

эмпирическим методам обработки естественного языка,

страниц 2890–2896. Ассоциация вычислительной

Лингвистики.

Йонатан Белинков и Йонатан Биск.2018. Синтетический

и естественный шум нарушают трансляцию нейронной машины. В Международной конференции по обучению Rep-

презентаций.

Николас Карлини и Дэвид Вагнер. 2017. К

оценка устойчивости нейронных сетей. В

2017 IEEE Symposium on Security and Privacy,

pages 39–57.

Киприан Челба, Томас Миколов, Майк Шустер, Ци Ге,

Торстен Брантс, Филипп Коэн и Тони Робин —

сын.2013. Один миллиард слов для измерения прогресса в статистическом языковом моделировании. Технический отчет

, Google.

Hongge Chen, Huan Zhang, Pin-Yu Chen, Jinfeng Yi,

и Cho-Jui Hsieh. 2018. Атака визуального языка

, основание на состязательных примерах: тематическое исследование

о субтитрах нейронных изображений. In Proceedings of the

56th Annual Meeting of the Association for Compu-

tational Linguistics (Volume 1: Long Papers), vol-

ume 1, pages 2587–2597.

Сокол Дай и Чжэн Цай. 2017. Glyph-known em-

постельных принадлежностей китайских иероглифов. В Proceedings of

the First Workshop on Subword and Character Levels

Models in NLP, Копенгаген, Дания,

7 сентября 2017 г. , страницы 64–69.

Тимофей Дозат. 2016. Включение нестеров момен-

тум в адам. ICLR Workshop.

Джавид Эбрахими, Ани Рао, Даниэль Лоуд и Дэджинг

Доу. 2018. Hot ip: состязательный экзамен «белого ящика» —

теста для классификации текста.In Proceedings of the

56th Annual Meeting of the Association for Com-

putational Linguistics, ACL 2018, Melbourne, Aus-

tralia, 15-20 июля 2018 г., Том 2: Краткие статьи,

стр. 31–36 .

Штеффен Эгер, Йоханнес Даксенбергер, Кристиан Стаб,

и Ирина Гуревич. 2018a. Межъязыковая аргументация

майнинг: Машинный перевод (и небольшая проработка

) — это все, что вам нужно! В материалах 27-й Международной конференции по компьютерной лингвистике

tics (COLING 2018).

Штеффен Эгер, Пауль Юсеф и Ирина Гуревич. 2018b.

Пришло время взмахнуть рукой? Сравнение функций Deep Learning Ac-

tivation в задачах НЛП. In Proceed-

ings конференции 2018 г. по эмпирическим методам

в обработке естественного языка, страницы 4415–4424.

Ассоциация компьютерной лингвистики.

Ян Гудфеллоу, Джонатон Шленс и Кристиан

Сегеди. 2015. Объяснение и использование adversar-

примеров.В Международной конференции по обучению —

представительств.

Хая Хирунчароенвате, Чжиюань Линь и Эрик

Гилберт. 2015. Алгоритмический обход censor-

поставляет на sina weibo с недетерминированными телефонными заменами homo-

. В материалах девятой

Международной конференции по Интернету и социальным сетям,

ICWSM 2015, Оксфордский университет, Оксфорд, Великобритания,

, 26–29 мая 2015 г., страницы 150–158.

Хоссейн Хоссейни, Шрирам Каннан, Баосен Чжан,

и Радха Пувендран.2017. Обман API перспективы Google

, созданный для обнаружения токсичных комментариев.

препринт arXiv arXiv: 1702.08138.

Мохит Айер, Джон Уайтинг, Кевин Гимпел и Люк

Зеттлемойер. 2018. Состязательный пример поколения

с синтаксически управляемыми сетями перефразирования.

В материалах конференции Севера 2018 г.

Американское отделение Ассоциации вычислительной техники

Национальная лингвистика: технологии человеческого языка,

Том 1 (Длинные статьи), страницы 1875–1885.Ассоциация компьютерной лингвистики

.

Робин Цзя и Перси Лян. 2017. Состязательный пример —

достаточных для оценки систем понимания прочитанного —

тем. В материалах конференции 2017 г., посвященной

эмпирическим методам обработки естественного языка,

EMNLP 2017, Копенгаген, Дания, 9-

11 сентября 2017 г., страницы 2021–2031.

Александрос Комнинос и Суреш Манандхар. 2016.

Вложения на основе зависимостей для задач классификации предложений.

.В материалах конференции 2016 года

Североамериканского отделения ассоциации компьютерной лингвистики

: человеческий язык,

Технологии, страницы 1490–1500.

Фредерик Лю, Хан Лу, Чие Ло и Грэм Ной —

большой. 2017. Изучение композиции на уровне персонажа —

с визуальными особенностями. In Proceedings of the

55th Annual Meeting of the Association for Compu-

tational Linguistics, ACL 2017, Ванкувер, Канада,

30 июля — 4 августа, Том 1: Длинные документы, страницы

2059–2068.

Сюэчжэ Ма и Эдуард Хови. 2016. Сквозная маркировка se-

quence через двунаправленную lstm-cnns-crf. В материалах

Труды 54-го ежегодного собрания ассоциации компьютерной лингвистики AS-

(Том 1:

Длинные документы), страницы 1064–1074. Ассоциация

Компьютерная лингвистика.

Кристофер Д. Мэннинг, Михай Сурдеану, Джон Бауэр,

Дженни Финкель, Стивен Дж. Бетард и Дэвид Мак-

Клоски. 2014 г.Набор инструментов для обработки изображений Stanford CoreNLP natural language

. В Ассоциации компьютерных демонстраций

системной лингвистики (ACL),

страниц 55–60.

Райан Т. Макдональд, Слав Петров и Кейт Б. Холл.

2011. Передача из нескольких источников делексикализованных анализаторов зависимостей de-

. In Proceedings of the 2011

аминокислотная замена N136Y в стерол-14альфа-деметилазе Candida albicans участвует в устойчивости к флуконазолу | Медицинская микология

Аннотация

Устойчивость к противогрибковому препарату флуконазол является постоянным препятствием на пути к успешному лечению инфекций, вызванных Candida albicans .Одним из наиболее распространенных механизмов, приводящих к устойчивости к азолам, являются генетические изменения 14α-деметилазы, мишени азольных противогрибковых средств, посредством точечных мутаций. Сайт-направленный мутагенез и молекулярное моделирование 14α-деметилазы рационализируют биологические данные о роли белковых замен в неэффективности лечения азолом. В этой работе мы исследовали роль замены N136Y посредством сайт-направленного мутагенеза в Pichia pastoris , руководствуясь структурным анализом. Единичные аминокислотные замены были созданы путем сайт-направленного мутагенеза в P.pastoris с геном C. albicans ERG11 в качестве матрицы. Чувствительность in vitro трансформантов P. pastoris , экспрессирующих азольные соединения дикого типа и мутантов, определяли с помощью методов CLSI M27-A2 и точечного агара. Влияние флуконазола на биосинтез эргостерина анализировали методом газовой хроматографии-масс-спектрометрии. Путем микроразведения и точечных тестов трансформанты N136Y показали пониженную чувствительность in vitro и к флуконазолу по сравнению с контролями дикого типа.Как и ожидалось, отношения эргостерин / ланостерин были выше у трансформантов N136Y по сравнению с контрольными животными дикого типа после обработки флуконазолом. Молекулярное моделирование предполагает, что остаток Asn136, расположенный в горячей точке первой мутации, может играть роль во время связывания гема и азола. Эти результаты позволяют по-новому взглянуть на структурную основу взаимодействия 14α-деметилаза-азол и могут помочь при разработке новых азольных противогрибковых средств.

Введение

Заболеваемость Candida spp.инфекций заметно увеличилось за последнее десятилетие из-за увеличения числа пациентов с ослабленным иммунитетом, перенесших трансплантацию солидных органов или гемопоэтических стволовых клеток, лечение рака или больных СПИДом. 1,2 Среди трех классов противогрибковых средств, доступных для лечения слизистых оболочек и инвазивных грибковых инфекций, 3,4 азольные противогрибковые препараты, включая флуконазол (FLC), проявляют высокую активность in vitro и in vivo против Candida albicans. 5–7 Благодаря своей безопасности и отличной переносимости, FLC по-прежнему играет важную роль как в профилактике, так и в лечении кандидоза. Однако длительное воздействие этого фунгистатического противогрибкового азола может привести к появлению приобретенных устойчивых изолятов и неудачам лечения. 8–14 Среди механизмов, приводящих к устойчивости к азолам, генетические изменения в гене ERG11 , кодирующем ланостерин 14α-деметилазу (CaErg11p, CaCYP51), первичную мишень азолов, продолжают оставаться одними из наиболее распространенных. 15–17 CaErg11p участвует в пути биосинтеза эргостерола. Этот главный стерол клеточной мембраны грибов необходим для жизнеспособности дрожжей, текучести и проницаемости мембран. 18 Среди различных аминокислотных замен ERG11 , идентифицированных из клинических изолятов C. albicans , только часть придает азол-резистентный фенотип. 19 Высокий полиморфизм CaErg11p затрудняет анализ каждой мутации устойчивости к азолам.Мутации часто присутствуют в определенных областях белковой последовательности. Таким образом, были идентифицированы три «горячие точки», расположенные внутри аминокислотных остатков 105–165, 266–287 и 405–488. 11 Вклад каждой замены в устойчивость к азолам может быть постулирован относительно их встречаемости в клинических изолятах. Действительно, о K143R, S405F, G464S, R467K и I471T сообщается только от устойчивых изолятов, в то время как E266D и V488I описаны как для чувствительных к азолам, так и для устойчивых к азолам изолятов. 35–38,40,41,43,44

Генетический и функциональный анализ мутировавшего гена ERG11 в организме-хозяине обычно используется в качестве биологического доказательства для подтверждения роли точечных мутаций в устойчивости к азолам. В этой стратегии использовался сайт-направленный мутагенез и экспрессия в Escherichia coli, Saccharomyces cerevisiae или Pichia pastoris . Изолированные мембранные фракции и очищенные ферменты используются в биохимических и функциональных анализах. Насколько нам известно, среди всех описанных замен только двенадцать были подтверждены сайт-направленным мутагенезом (Таблица 1).По мере того как все больше замен аминокислот CaErg11p решается, структурное моделирование in silico будет постоянно улучшать методологии прогнозирования неэффективности обработки азолом. 20,21

Таблица 1. Обзор

аминокислотных замен CaErg11, влияющих на устойчивость к FLC, проанализированных с помощью сайт-направленного мутагенеза в организме-хозяине.

S. ND I473 902 ND
Аминокислотное замещение . Горячие точки . Система выражений . Кратное увеличение МПК СЛК . Список литературы .
A61V I E. coli 4-кратный 13
Y132H I

0 E. coli 902 , 20, 35–37
K143R I E. coli 64-кратный 12, 13, 23
F145L I E.coli 5-кратный 36, 38
S279F II E.coli ND 39
T315311 2 cerevisia
T315A II 40, 41
S405F III S. cerevisiae 4-кратный 10, 13, 15, 35
Y447H IIIpastoris 8-кратный 31
V456I III P. pastoris 8-кратный 31
42
G464S III S. cerevisiae 64-кратный 9, 13, 43, 44
R467K IIIcerevisiae 4-кратное 10, 21, 23, 45
III III P. pastoris R4 cerevisiae
Аминокислотное замещение . Горячие точки . Система выражений . Кратное увеличение МПК СЛК . Список литературы .
A61V I E. coli 4-кратный 13
Y132H I E.coli 4-кратный 10, 11, 20, 35–37
K143R I E. coli 64-кратный 12, 13, 23
I E. coli 5-кратный 36, 38
S279F II E.coli ND С.cerevisiae ND 40, 41
S405F III S. cerevisiae 4-кратный 10, 13, 15, 35
8-кратный 31
V456I III P. pastoris 8-кратный 31
E.coli ND 42
G464S III S. cerevisiae 64-кратный 9, 13, 43, 44
4-кратный 10, 21, 23, 45
Таблица 1.

Обзор аминокислотных замен CaErg11, влияющих на устойчивость к FLC, проанализированных с помощью сайт-направленного мутагенеза в организмах-хозяевах.

III S.cerevisiae cerevis III S. складка
Аминокислотное замещение . Горячие точки . Система выражений . Кратное увеличение МПК СЛК . Список литературы .
A61V I E. coli 4-кратный 13
Y132H I

0 E. coli 902 , 20, 35–37
K143R I E.coli 64-кратный 12, 13, 23
F145L I E. coli 5-кратный 36, 38
S279 E. coli ND 39
T315A II S. cerevisiae ND 40, 41
9022 S40311cerevisiae 4-кратный 10, 13, 15, 35
Y447H III P. pastoris 8-кратный 312 31
P. pastoris 8-кратный 31
I471T III E. coli ND 42
G36411 64-кратный 9, 13, 43, 44
R467K III S. cerevisiae 4-кратный 10, 21, 23, 4512
Аминокислотное замещение . Горячие точки . Система выражений . Кратное увеличение МПК СЛК . Список литературы .
A61V I E. coli 4-кратный 13
Y132H I

0 E. coli 902 , 20, 35–37
K143R I E. coli 64-кратный 12, 13, 23
F145L I

30 E. coli

30 5-кратный
36, 38
S279F II E.coli ND 39
T315A II S. cerevisiae ND 40, 41
10, 13, 15, 35
Y447H III P. pastoris 8-кратная 31
V456I IIIpastoris 8-кратный 31
I471T III E. coli ND 42
G4643 III складка 9, 13, 43, 44
R467K III S. cerevisiae 4-кратная 10, 21, 23, 45

Azy N6136Y Замена была впервые описана нашей командой у FLC-устойчивого C.albicans (CAAL70). 17 Остаток 136 аспарагина расположен в первой горячей точке, между остатками 105-165, но биологические доказательства его участия в устойчивости к азолам все еще отсутствуют.

В настоящем исследовании мутация A406T была введена в ген ERG11 посредством сайт-направленного мутагенеза. Ген ERG11 дикого типа и мутант клонировали в P. pastoris для изучения вклада точечной мутации A406T в устойчивость in vitro к FLC .Также исследовали влияние соответствующей замены N136Y на биосинтез эргостерина. Основываясь на молекулярном моделировании CaCYP51 с использованием недавно полученной рентгеновской структуры высокого разрешения полноразмерного S. cerevisiae CYP51, мы предложили механизм, с помощью которого N136Y снижает сродство флуконазола к CaErg11p.

Материалы и методы

Реагенты

рестрикционных ферментов BamHI, NotI, SacI и маркеров молекулярной массы ДНК были приобретены в New England Biolabs Inc.Высококачественная ДНК-полимераза и буферы Phusion были получены от Finnzymes, Финляндия. ДНК-полимераза GoTaq Flexi была произведена компанией Promega. Агароза была приобретена у Invitrogen. Поликлональный анти- Candida Erg11p был любезно предоставлен доктором Дайан Келли (Институт наук о жизни, Школа медицины, Университет Суонси, Суонси, Великобритания). Конъюгат против кроличьей HRP был получен от Cell Signaling Technology Inc. Раствор субстрата Super signal West Pico был приобретен у Thermo Scientific. FLC и итраконазол (ITR) были получены от Sigma, а вориконазол (VRC) от Pfizer, Великобритания.

Получение

трансформантов Pichia pastoris

Ген ERG11 дикого типа амплифицировали с помощью ПЦР с высокоточной полимеразой с использованием праймеров ORFBamHI и ORFNotI. Затем кодирующая последовательность была вставлена ​​в pBlueScript (SK-). Ожидаемые фрагменты ДНК длиной 1740 п.н. амплифицировали с помощью ПЦР с праймерами N136Yfor и N136Yrev для введения точечной мутации A406T с использованием набора для мутагенеза QuikChange (Agilent Technologies, США).Праймеры K143Rfor и K143Rrev использовали для вставки точечной мутации A428G (таблица 2). Замена K143R была выбрана в качестве контроля с положительной резистентностью согласно исследованиям сайт-направленного мутагенеза, опубликованным Chau AS et al. 13 Замена K143R индуцировала 64-кратное увеличение минимальных ингибирующих концентраций (МИК) FLC. Полученные векторы мутагенеза были линеаризованы и трансформированы в компетентные клетки E. coli TOP10F ’. Кодирующие области дикого типа и мутировавшие ERG11 секвенировали с использованием внутренних праймеров. 22,23,24 продуктов ПЦР субклонировали в векторе экспрессии pPIC3.5K, названном pPIC3.5K- ERG11 , в соответствии с инструкциями производителя (Invitrogen, Life technologies). Рекомбинантные плазмиды были линеаризованы с помощью SacI и использованы для трансформации путем электропорации компетентного штамма P. pastoris KM71. Ген ERG11 был интегрирован позади промотора AOX1 штамма KM71 ( aox1 :: ARG4 , Mut s , His ).Mut, обозначенный как фенотип 〈〈 метанол утилизации медленный 〉〉, был обусловлен потерей гена AOX1 . После трансформации клонов P. pastoris KM71 выливали на верх чашек RDB (1 М сорбит, 2% декстроза, 1,34% YNB, 4 × 10 -5 % биотина, 0,005% аминокислот и 2% агар). и инкубировали при 30 ° C до появления колоний. Клоны, продуцирующие гистидин, проверяли на их способность расти на чашках YPD-генетицина (1% дрожжевой экстракт, 2% пептон, 2% декстроза, 2% агар и различные количества генетицина).Выход плазмидной трансформации составил около 3000 колоний на трансформацию. Колонии, собранные из планшетов с YPD-генетицином 0,5 и 0,75 мг / мл, подвергали ПЦР с праймерами 5’ORFBamHI и 3’ORFNotI для анализа интеграции однокопийного гена ERG11 . Другие анализы ПЦР выполняли с 5′-праймерами AOX1 и 3′-AOX, а также с 5’AOX1 и внутренним праймером R2 ERG11 . Продукт ПЦР рекомбинантных клонов с 5’AOX1 и внутренними праймерами R2 ERG11 обнаруживает полосу в 714 п.н., соответствующую участку промотора AOX1 (50 п.н.) и 664 п.н. на 5′-конце ERG11 , подтверждая интеграция гена ERG11 .

Таблица 2.

олигонуклеотидных праймеров, использованных в этом исследовании. Сайты ограничения подчеркнуты.

K143Rrev
Грунтовка . последовательность ДНК . +
ORFBamHI 5′-GCGGATCCACATATGGCTATTGTTGAAACTG-3 ‘
ORFNotI 5′-TAGCGGCCGCTTAAAACATACAAGTTTCTCTTTT-3′
K143Rfor 5′-GGAACAAAGAAAGTTTGCTAAATTTGC-3 ‘
5′-GCAAATTTAGCAAACTTTCATTGTTCC-3 ‘
N136Yfor 5′-GTTATTTATGATTGTCCATATTCCAGATTAATG-3′
N136Yrev 5′-CATTAATCTGGAATATGGACAATCATAAATAAC-3 ‘
CaCYP51R2 5′-AATATAGTTGAGCAAATGAACG-3′
5’AOX1 5′-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3 ‘
3’AOX1 5′-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3′
. K143Rrev
последовательность ДНК .
ORFBamHI 5′-GCGGATCCACATATGGCTATTGTTGAAACTG-3 ‘
ORFNotI 5′-TAGCGGCCGCTTAAAACATACAAGTTTCTCTTTT-3′
K143Rfor 5′-GGAACAAAGAAAGTTTGCTAAATTTGC-3 ‘
5′-GCAAATTTAGCAAACTTTCATTGTTCC-3 ‘
N136Yfor 5′-GTTATTTATGATTGTCCATATTCCAGATTAATG-3′
N136Yrev 5′-CATTAATCTGGAATATGGACAATCATAAATAAC-3 ‘
CaCYP51R2 5′-AATATAGTTGAGCAAATGAACG-3′
5’AOX1 5′-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3 ‘
3’AOX1 5′-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3′
.

Олигонуклеотидные праймеры, использованные в этом исследовании. Сайты ограничения подчеркнуты.

K143Rrev
Грунтовка . последовательность ДНК . +
ORFBamHI 5′-GCGGATCCACATATGGCTATTGTTGAAACTG-3 ‘
ORFNotI 5′-TAGCGGCCGCTTAAAACATACAAGTTTCTCTTTT-3′
K143Rfor 5′-GGAACAAAGAAAGTTTGCTAAATTTGC-3 ‘
5′-GCAAATTTAGCAAACTTTCATTGTTCC-3 ‘
N136Yfor 5′-GTTATTTATGATTGTCCATATTCCAGATTAATG-3′
N136Yrev 5′-CATTAATCTGGAATATGGACAATCATAAATAAC-3 ‘
CaCYP51R2 5′-AATATAGTTGAGCAAATGAACG-3′
5’AOX1 5′-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3 ‘
3’AOX1 5′-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3′
. K143Rrev анализ последовательности

Рекомбинантные плазмиды и геномная ДНК из P.pastoris анализировали путем секвенирования ДНК с использованием внутренних праймеров и секвенатора Applied Biosystems 3730. 23 Нуклеотидные последовательности были собраны с использованием программного обеспечения Seqscape (Applied Biosystems). Ранее описанную последовательность ERG11 (номер доступа X13296) использовали для сравнения всей открытой рамки считывания ERG11 . Последовательность ERG11 штамма, демонстрирующего новую аминокислотную замену, была отправлена ​​в базу данных GenBank (номер доступа EU885938).

Внутриклеточная экспрессия белков CaER11p

Гранулы P. pastoris ресуспендировали в 100 мл ледяного буфера для лизиса (50 мМ фосфат натрия, pH 7,4, 1 мМ PMSF, 1 мМ EDTA, 5% глицерин) и растирали со 100 мл стеклянных шариков (0,2 мм). выполнив несколько 30-секундных вихревых аппликаций. Суспензию с размолотыми клетками центрифугировали при 800 g в течение 5 минут при 4 ° C. Растворимые цитозольные белки в собранных супернатантах центрифугировали при 13000 g в течение 10 минут при 4 ° C.Содержание белка в прозрачном супернатанте измеряли методом BCA. По 40 мкг белка на лунку загружали в гели 10% SDS-PAGE. После электрофореза гели окрашивали кумасси бриллиантовым синим R-250. Вестерн-блоттинг выполняли на мембранах из PVDF с разведением 1: 100 кроличьих поликлональных антител против Candida Erg11p в течение ночи при 4 ° C и разведением 1: 2000 козьих антител против кроликов, связанных с HRP, в течение 1 часа при комнатной температуре. Сигналы визуализировали с использованием реагента для обнаружения субстрата super signal west pico.

Тесты на чувствительность к азолам для

трансформантов P. pastoris

Чувствительность к азолам in vitro трансформантов P. pastoris анализировали эталонным методом микроразведения в бульоне (Институт клинических и лабораторных стандартов, CLSI, документ M27-A2) с некоторыми модификациями. 26 Вкратце, среду RPMI1640 заменили жидкой средой BMMY (1% дрожжевой экстракт, 2% пептон, 100 мМ фосфат калия, pH 6,0, 1,34% YNB, 0.5% метанол). Трансформанты P. pastoris предварительно индуцировали при 30 ° C в течение 72 часов в жидкой среде BMMY. 0,5% метанола добавляли к среде каждые 24 часа, чтобы гарантировать индукцию рекомбинантного белка перед тестами на микроразбавление. Клоны помещали в 96-луночные планшеты, содержащие разведения флуконазола в среде BMMY. В этих экспериментальных условиях эндогенные белки P450 экспрессируются в низких количествах в трансформантах P. pastoris . 25 MIC 50 был рассчитан как наименьшая концентрация, дающая 50% снижение оптической плотности при 450 нм по сравнению с OD соответствующей инкубационной среды, не содержащей лекарственного средства.Был проведен качественный тест путем внесения серийных разведений дрожжевых культур в чашки с агаром BMMY, содержащие серийные концентрации азольных соединений. Трансформанты P. pastoris были предварительно индуцированы при 30 ° C в течение 72 часов в 0,5% метанольной жидкой среде BMMY. Пять микролитров суспензии клеток 2 × 10 7 и 10-кратных серийных разведений каждой дрожжевой культуры наносили на чашки с 0,5% метанольным агаром BMMY. Планшеты инкубировали 72 и 96 ч при 30 ° C.

Влияние FLC на биосинтез эргостерина

Уровни стерола в обработанной и контрольной группе P.pastoris определяли в соответствии с ранее описанным протоколом. 20 После индукции продукции CaErg11p в течение 72 часов при 30 ° C в среде BMMY дрожжи обрабатывали различными концентрациями FLC в той же среде в течение 24 часов при 30 ° C. В сумме к осадку клеток добавляли 3 мл 60% (мас. / Об.) КОН и перемешивали в течение 2 мин. Суспензии клеток омыляли нагреванием при 80 ° C в течение 2 часов. После инкубации лункам давали остыть до комнатной температуры, неомыляемые стерины дважды экстрагировали 2 мкл н-гексана и сушили в атмосфере азота.Стерины суспендировали в 100 мкл бис (триметилсилил) трифторида в течение 30 мин для силилирования. Силилированные стерины анализировали методом газовой хроматографии-масс-спектрометрии (Agilent Technologies). Эксперименты проводились в трех повторностях из трех независимых экспериментов. Значение p менее 0,05 считалось значимым.

Гомологическое моделирование CaErg11p

Исследования молекулярного моделирования были выполнены с использованием программного обеспечения SYBYL-X версии 1.3 (SYBYL-X 1.3, Tripos Associates, Inc. 1699 South Hanley Road, St. Louis, MO 63144, US) на рабочей станции DELL PRECISION T3400. В качестве матрицы использовали кристаллическую структуру полноразмерного Saccharomyces cerevisiae CYP51 в комплексе с итраконазолом с разрешением 2,19 Å (код PDB, 4K0F). 27 Аминокислотная последовательность CaErg11p из C. albicans (CaCYP51) была получена из ресурса Protein Information Resource (http://pir.georgetown.edu, PIR-код: P10613) и выровнена с последовательностью ScCYP51 с использованием попарного алгоритм выравнивания.Затем 3D-модель CaCYP51 была построена программой Nest из пакета моделирования структуры белка JACKAL. 28 Полученная модель была подвергнута минимизации энергии с использованием метода Пауэлла, доступного в процедуре Maximin2 с силовым полем Tripos и диэлектрической проницаемостью 4,0, пока значение градиента не достигло 0,1 ккал / моль.Å. Минимизация энергии была начата с боковых цепей ядра, затем с основных цепей ядра. Во время процедуры оптимизации структура периодически проверялась графиками Verify-3D и Рамачандрана.Если они присутствовали, неправильная геометрия была исправлена ​​вручную, а структура снова минимизирована с помощью описанной выше процедуры. Гем, экстрагированный из структуры CYP51 человека, был наконец добавлен к модели CaCYP51, и остатки соседнего гема были минимизированы, чтобы избежать стерических конфликтов.

Док-станция

Трехмерная структура FLC была построена из стандартной библиотеки фрагментов, а ее геометрия была впоследствии оптимизирована с использованием силового поля Tripos, включая электростатический член, рассчитанный по атомным зарядам Гастайгера и Хюккеля.Метод Пауэлла, доступный в процедуре Maximin2, использовался для минимизации энергии до тех пор, пока значение градиента не стало меньше 0,001 ккал / моль Å. Гибкое закрепление этого соединения в активном центре фермента было выполнено с помощью программного обеспечения GOLD. 29 В качестве ограничения было установлено расстояние 2–2,5 Å от N-4 триазольного кольца до гемового железа. Самая стабильная модель стыковки была выбрана в соответствии с наилучшей оценкой конформации, предсказанной функцией оценки GoldScore. Энергия комплекса была минимизирована с использованием метода Пауэлла, доступного в процедуре Maximin2 с силовым полем Tripos и диэлектрической проницаемостью 4.0, пока значение градиента не достигнет 0,1 ккал / моль Å.

Статистический анализ

Статистический анализ выполняли с использованием программного обеспечения Prism (GraphPad Prism Software). Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка. Различия между необработанными и обработанными группами в опытах in vitro были проанализированы с помощью теста Стьюдента t со значимостью при p <0,05.

Результаты

Аминокислотные замены Erg11 и определение чувствительности к азолам

Предыдущий скрининг аминокислотных замен CaErg11p в 73 C.albicans позволили идентифицировать изолят, устойчивый к азолам, CAAL70, с новой заменой N136Y. 17 Замена N136Y произошла в обоих аллелях ERG11 . Изолят CAAL70 также экспрессировал замену Y132H, которая ранее была связана с устойчивостью к азолам. Выравнивание восьми различных аминокислотных последовательностей Erg11p из разных грибов показало, что Asn136 является высококонсервативным остатком у грибов (рис. 1). Значения MIC 50 для FLC, VRC и ITC составляли 16, 2 и 0.5 мг / л соответственно. Согласно контрольным точкам CLSI, этот клинический изолят, по-видимому, связан со сниженной чувствительностью in vitro к FLC и VRC, но не к ITC.

Рисунок 1.

Выравнивание восьми последовательностей CaErg11p, окружающих аминокислотный остаток N136, у различных грибов. Выравнивание производилось с помощью программы ClustalW. Аминокислотная нумерация взята из последовательности гена C. albicans . Аминокислоты, консервативные у грибов, выделены серым цветом.Использованы следующие инвентарные номера: C. albicans , ADI76632.1; C. tropicalis , AY942645.1; C. glabrata , S75389; Кр. neoformans , AF225914.1; S. cerevisiae , AAFW02000082.1; A. fumigatus , AF338659; U. maydis , Z48164; P. digitatum , AJ439081.1.

Рисунок 1.

Выравнивание восьми последовательностей CaErg11p, окружающих аминокислотный остаток N136, у различных грибов. Выравнивание производилось с помощью программы ClustalW.Аминокислотная нумерация взята из последовательности гена C. albicans . Аминокислоты, консервативные у грибов, выделены серым цветом. Использованы следующие инвентарные номера: C. albicans , ADI76632.1; C. tropicalis , AY942645.1; C. glabrata , S75389; Кр. neoformans , AF225914.1; S. cerevisiae , AAFW02000082.1; A. fumigatus , AF338659; U. maydis , Z48164; P. digitatum , AJ439081.1.

Гетерологичная экспрессия CaErg11p в

P. pastoris

Чтобы определить, может ли замена N136Y участвовать в устойчивости in vitro к FLC , остаток Asn136 был заменен остатком тирозина посредством сайт-направленного мутагенеза. Ген ERG11 дикого типа из C. albicans подвергали мутагенезу ПЦР с праймерами N136Yfor и N136Yrev, чтобы ввести точечную мутацию A406T . Замена K143R представляет собой контрольную индуцирующую замену, устойчивую к азолам, после исследований сайт-направленного мутагенеза. 13 ПЦР-фрагментов были субклонированы в плазмиду pPIC3.5K (фиг. 2A) и индивидуально трансформированы электропорацией в штамм P. pastoris KM71. ПЦР-амплификация с праймерами 5’ORFBamHI и 3’ORFNotI показала полосу из 1740 п.о., соответствующую ERG11 (рис. 2В). Продукт ПЦР рекомбинантных клонов с 5’AOX1 и внутренними праймерами R2 ERG11 представлял собой полосу в 714 п.н., соответствующую участку промотора AOX1 50 п.н., и 664 п.н., соответствующие 5′-концу ERG11 (рис. ).

Рисунок 2.

Конструирование рекомбинантных трансформантов Pichia pastoris . A : Интеграция ERG11 в мутагенез pPIC3.5 K. B : Геномную ДНК репрезентативных трансформантов P. pastoris очищали. ПЦР-амплификация ERG11 с праймерами 5 ‘AOX1 и 3’ AOX1. ПЦР-амплификация ERG11 с 5′-AOX1 и внутренним праймером R2 CaErg11p. C : Экспрессия рекомбинантного P.pastoris трансформанты. P. pastoris Трансформанты CaErg11p индуцировали экспрессию белка на среде BMMY в течение 72 часов, как описано в материалах и методах. Вестерн-блоттинг контрольных и мутантных белков CaErg11p, продуцируемых в P. pastoris , проводили в присутствии поликлонального кроличьего анти дрожжевого Erg11p и второго козьего антитела против кроличьей HRP. Сигналы визуализировали с использованием реагента для обнаружения суперсигнала вест-пикосубстрата.

Рисунок 2.

Конструирование рекомбинантных трансформантов Pichia pastoris . A : Интеграция ERG11 в мутагенез pPIC3.5 K. B : Геномную ДНК репрезентативных трансформантов P. pastoris очищали. ПЦР-амплификация ERG11 с праймерами 5 ‘AOX1 и 3’ AOX1. ПЦР-амплификация ERG11 с 5′-AOX1 и внутренним праймером R2 CaErg11p. C : Экспрессия рекомбинантных трансформантов P. pastoris . P. pastoris Трансформанты CaErg11p индуцировали экспрессию белка на среде BMMY в течение 72 часов, как описано в материалах и методах. Вестерн-блоттинг контрольных и мутантных белков CaErg11p, продуцируемых в P. pastoris , проводили в присутствии поликлонального кроличьего анти дрожжевого Erg11p и второго козьего антитела против кроличьей HRP. Сигналы визуализировали с использованием реагента для обнаружения суперсигнала вест-пикосубстрата.

Затем экспрессию CaErg11p подтверждали вестерн-блоттингом.Для исследований экспрессии использовали одну колонию каждого мутантов P. pastoris , дикого типа и имитацию контроля. Как мутанты N136Y, K143R, так и мутанты дикого типа функционально экспрессировались в P. pastoris. Уровни специфического внутриклеточного CaErg11p были релевантными после иммуноблот-анализа с поликлональным кроличьим анти- Candida Erg11p антителом по сравнению с ложным контролем (фигура 2C). Кажущаяся молекулярная масса CaErg11p составляла около 56 кДа. Этот белок отсутствовал во внутриклеточном экстракте клеток, трансформированных родительской плазмидой pPIC3.5 К (фиктивное управление).

Чувствительность к флуконазолу

трансформантов P. pastoris CaErg11p

Затем мы проверили, влияет ли замена остатка аспарагина на тирозин в положении 136 трансформантов CaErg11p P. pastoris на их чувствительность к FLC. Для этого мы использовали модифицированный метод CLSI, точечный тест и анализ эргостерола / ланостерина с помощью газовой хроматографии-масс-спектрометрии. Трансформанты Pichia pastoris с точечными мутациями показали сходные значения MIC с FLC после роста на неиндуцирующей среде BMGY (данные не показаны).Затем экспрессию CaErg11p индуцировали в присутствии 0,5% метанольной среды (BMMY) в течение 72 часов, и чувствительность к FLC трансформантов P. pastoris , экспрессирующих белки CaErg11p дикого типа и мутантные, тестировали в соответствии с эталонным методом микроразведения CLSI. Значения MIC для FLC трансформантов P. pastoris с заменами N136Y или K143R составляли 2 мг / л и 8 мг / л соответственно (фиг. 3A). Эти значения соответствовали 4-кратному увеличению для N136Y и 16-кратному увеличению устойчивости к FLC для K143R по сравнению с трансформантами плазмиды дикого типа и исходной плазмиды.

Рисунок 3.

A : Противогрибковая активность FLC in vitro против P. pastoris , трансформированных K143R (открытый треугольник), N136Y (закрашенный квадрат) или WT (белый кружок), протестированных в соответствии с методом CLSI. (ранее NCCLS) с некоторыми модификациями. Значения MIC 50 определяли как самую низкую концентрацию противогрибкового средства, дающую 50% или менее снижение оптической плотности при 450 нм по сравнению с OD соответствующей инкубационной среды, не содержащей лекарственного средства.Данные представлены в виде среднего значения ± стандартное отклонение для трех независимых экспериментов, каждый из которых был проведен в трех повторностях. B : Восприимчивость трансформантов CaErg11p P. pastoris к FLC с использованием точечного теста. Серийные разведения каждого контрольного и мутантного клонов наносили на чашки с агаром BMMY, содержащие 0, 2 и 8 мг / л флуконазола, и инкубировали в течение 72 часов при 30 ° C. C : Активность CaErg11p трансформантов P. pastoris . Клоны обрабатывали FLC в среде BMMY в течение 24 ч при 30 ° C и экстрагировали неомыляемые липиды (стерины), как описано в разделе «Материалы и методы».Идентификацию стеролов проводили на основании ранее сообщенных относительных времен удерживания и масс-спектров. 26 Результаты активности выражали как отношение биосинтеза эргостерола к накоплению ланостерола (E / L). Необработанные клоны P. pastoris (черные полосы) и 8 мг / л FLC (белые полосы). Данные представлены в виде среднего значения ± стандартное отклонение для трех независимых экспериментов, каждый из которых был проведен в трех повторностях. Этот рисунок воспроизводится в цвете в онлайн-версии Medical Mycology .

Рисунок 3.

A : Противогрибковая активность FLC in vitro против P. pastoris , трансформированных K143R (открытый треугольник), N136Y (закрашенный квадрат) или WT (незаполненный кружок), протестированных в соответствии с CLSI. метод (ранее NCCLS) с некоторыми модификациями. Значения MIC 50 определяли как самую низкую концентрацию противогрибкового средства, дающую 50% или менее снижение оптической плотности при 450 нм по сравнению с OD соответствующей инкубационной среды, не содержащей лекарственного средства.Данные представлены в виде среднего значения ± стандартное отклонение для трех независимых экспериментов, каждый из которых был проведен в трех повторностях. B : Восприимчивость трансформантов CaErg11p P. pastoris к FLC с использованием точечного теста. Серийные разведения каждого контрольного и мутантного клонов наносили на чашки с агаром BMMY, содержащие 0, 2 и 8 мг / л флуконазола, и инкубировали в течение 72 часов при 30 ° C. C : Активность CaErg11p трансформантов P. pastoris . Клоны обрабатывали FLC в среде BMMY в течение 24 ч при 30 ° C и экстрагировали неомыляемые липиды (стерины), как описано в разделе «Материалы и методы».Идентификацию стеролов проводили на основании ранее сообщенных относительных времен удерживания и масс-спектров. 26 Результаты активности выражали как отношение биосинтеза эргостерола к накоплению ланостерола (E / L). Необработанные клоны P. pastoris (черные полосы) и 8 мг / л FLC (белые полосы). Данные представлены в виде среднего значения ± стандартное отклонение для трех независимых экспериментов, каждый из которых был проведен в трех повторностях. Этот рисунок воспроизводится в цвете в онлайн-версии Medical Mycology .

Чувствительность к FLC трансформантов CaErg11p P. pastoris N136Y также качественно оценивали с помощью точечного теста на пластинах BMMY с 0,5% метанолом, содержащих различные концентрации FLC. На рис. 3В показана восприимчивость четырех репрезентативных трансформантов N136Y P. pastoris к разведениям FLC. Трансформанты P. pastoris дикого типа и имитация были гиперчувствительны к FLC при концентрации 2 мг / л, тогда как рост мутанта N136Y P. pastoris оставался неизменным.Через 72 часа мутанты P. pastoris показали лучший рост при высоком разведении дрожжей, чем контроли, когда их обрабатывали 8 мг / л FLC. Наблюдались различия в росте между трансформантами N136Y при высоких концентрациях FLC. Взятые вместе, эти находки подтверждают вклад этой аминокислотной замены в CaErg11p в снижение чувствительности к FLC.

Ингибирование биосинтеза эргостерина с помощью FLC у

трансформантов P. pastoris

Затем мы исследовали активность CaErg11p, содержащего единичные замены, путем измерения стеринового состава P.pastoris до и после обработки FLC. Мутанты P. pastoris и контроли индуцировали в течение 72 часов при 30 ° C в среде BMMY. Дрожжи обрабатывали FLC в среде BMMY в течение 24 ч при 30 ° C. Необработанные дрожжи использовали в качестве контроля. Активность выражали как отношение биосинтеза эргостерина к накоплению ланостерола (E / L). В отсутствие FLC (фиг. 3C) доминирующим стеролом ложных трансформантов P. pastoris был эргостерин (среднее соотношение E / L равнялось 76 для каждого контроля).Для мутантов K143R и N136Y P. pastoris (среднее отношение E / L 92 и 117 соответственно) не наблюдалось значительных различий, что свидетельствует о том, что обе замены не изменяют каталитическую активность фермента. Однако в необработанных условиях соотношение E / L было значительно выше у мутантов N136Y по сравнению с контролем дикого типа и ложным контролем ( p = 0,04). Трансформанты P. pastoris mock и также показали низкие уровни промежуточных производных пути биосинтеза эргостерола, таких как зимостерин, фекостерин и эпистерол.

Трансформанты P. pastoris mock и CaErg11p затем обрабатывали 8 мг / л FLC. Трансформанты Mock P. pastoris показали заметное снижение активности стерол-14альфа-деметилазы после обработки FLC (соотношение E / L = 1), что согласуется с их чувствительностью к FLC. Напротив, контрольный мутант K143R сохранял значительную ферментативную активность, несмотря на обработку FLC 8 мг / л (среднее соотношение E / L 45; p = 0,03). Интересно, что активность деметилирования мутантов N136Y была значительно выше, чем у контроля дикого типа после обработки 8 мг / л FLC, что отражено в соотношении E / L, равном 51 ( p =.04).

Гомологическое моделирование

Поскольку кристаллическая структура CaErg11 (CaCYP51) из грибкового патогена Candida albicans еще не доступна, мы создали гомологическую модель CaCYP51 из недавней рентгеновской структуры высокого разрешения полноразмерного Saccharomyces cerevisiae CYP51 в комплексе с итраконазол (дополнительный рисунок 1, код PDB ScCYP51: 4K0F). 27 Оба фермента имеют 65% идентичности (рис. 4), что позволяет нам проиллюстрировать влияние мутаций N136Y и Y132H CaCYP51 на связывание специфических азольных соединений.Согласно нашей модели, Tyr132 расположен на гибкой петле BC фермента и создает взаимодействие H-связи с боковой цепью гем-пропионата, в то время как Asn136 расположен в начале спирали C и удален от боковых цепей гем-пропионата для прямого H -связь (d> 6 Å) (рис. 5А). Однако обе мутации Y132H и N136Y могут нарушать окружение гема и снижать восприимчивость к компактным азолам FLC и VRC. Отсутствие гем-связывающей водородной связи в мутации Y132H уже предполагалось Monk et al., 27 , в то время как мутация N136Y может привести к стерическому конфликту с His468 и / или Lys143, которые задействованы либо за счет Н-связи, либо за счет взаимодействия солевого мостика с боковой цепью гем-пропионат (Фиг.5А, В).

Рисунок 4.

Выравнивание последовательностей ScCYP51 с CaErg11 (CaCYP51). Элементы вторичной структуры присваиваются согласно ScCYP51 27 . Tyr132 и Asn136 в CaErg11 выделены красным. Этот рисунок воспроизводится в цвете в онлайн-версии Medical Mycology .

Рисунок 4.

Выравнивание последовательностей ScCYP51 с CaErg11 (CaCYP51). Элементы вторичной структуры присваиваются согласно ScCYP51 27 . Tyr132 и Asn136 в CaErg11 выделены красным. Этот рисунок воспроизводится в цвете в онлайн-версии Medical Mycology .

Рисунок 5.

A : Локализация остатков Tyr132, Asn136 и His468 вокруг активного сайта CaErg11. Основная цепь и остатки Asn136 / Tyr132 изображены в виде ленты или заполненного пространства, соответственно.Гем и флуконазол выделены фиолетовым цветом. Типичные водородные связи обозначены желтыми пунктирными линиями (программное обеспечение SYBYL-X, версия 1.3, Tripos Associates Inc., Сент-Луис, Миссури, США). B: Картирование замен N136Y, Y132H и остатка His468 в CaErg11.

Рисунок 5.

A : Локализация остатков Tyr132, Asn136 и His468 вокруг активного сайта CaErg11. Основная цепь и остатки Asn136 / Tyr132 изображены в виде ленты или заполненного пространства, соответственно.Гем и флуконазол выделены фиолетовым цветом. Типичные водородные связи обозначены желтыми пунктирными линиями (программное обеспечение SYBYL-X, версия 1.3, Tripos Associates Inc., Сент-Луис, Миссури, США). B: Картирование замен N136Y, Y132H и остатка His468 в CaErg11.

Обсуждение

Снижение аффинности азола к CaErg11p, вызванное аминокислотными заменами, является одним из наиболее важных механизмов, участвующих в устойчивости C. albicans . 45 Скрининг аминокислотных замен Erg11 в большой коллекции из клинических изолятов C. albicans , демонстрирующих различные уровни чувствительности к азолам, выявил новую замену N136Y, присутствующую в обоих аллелях ERG11 клинического изолята с уменьшенным in vitro восприимчивость к FLC и VRC. 17 Замена Y132H, происходящая одновременно с N136Y, ранее была связана с устойчивостью к азолам. 30 В нашем исследовании выравнивание восьми аминокислотных последовательностей Erg11p из различных грибов показало, что Asn136 является высококонсервативным остатком у грибов, что позволяет предположить, что он может играть важную роль в пространственной конформации белка.Одна из гипотез заключалась в том, что замены N136Y и Y132H могут проявлять дополнительный или синергетический эффект.

Мы ответили на эти вопросы, используя сайт-направленный мутагенез и экспрессию гетерологичного белка в P. pastoris , чтобы выразить точечную замену N136Y в белке CaErg11p дикого типа. Эта модель экспрессии имеет важные преимущества с точки зрения экспрессии низких уровней продукции нативных белков при интеграции эндогенных рекомбинантных генов. Трансформанты P. pastoris являются генетически стабильными после интеграции генов, и эти эукариотические клетки способны вносить посттрансляционные модификации, такие как гликозилирование. 31–33 Кажущаяся молекулярная масса экспрессированного CaErg11p соответствовала таковой у S. cerevisiae. 10 В наших условиях эндогенные белки P450 экспрессируются в низких количествах в трансформантах P. pastoris . 25 Однако мы наблюдали две полосы с более высокой молекулярной массой, приблизительно 75 и 110 кДа, экспрессируемые в трансформантах дикого типа и мутантах.Эти полосы с более высокой молекулярной массой могут быть связаны с CaErg11p. Принимая во внимание трудности с экспрессией эукариотического CYP51 и низкие выходы очистки, 10,11,23 оптимальный протокол экспрессии был получен после индукции рекомбинантных трансформантов в течение 72 часов в присутствии 0,5% метанольной среды. В этих условиях поликлональные антитела могут связываться с мультимерами белка, которые постепенно образуются в течение длительного периода инкубации и плохо денатурируются в условиях нашего SDS-PAGE.

Замена N136Y была ответственна за 4-кратное увеличение MIC FLC, определенное модифицированным методом CLSI. Этот уровень устойчивости был значительно выше по сравнению с трансформантами плазмид дикого типа и родительской плазмиды, но ниже по сравнению с заменой положительного контроля K143R. Точечный анализ подтвердил способность трансформантов N136Y к росту в присутствии высоких концентраций FLC. Различия в росте между трансформантами N136Y при высокой концентрации FLC могут быть связаны с вариациями в количестве копий гена после электропорации P.pastoris штамм.

Затем мы исследовали активность CaErg11p, содержащего единичные замены, путем измерения стеринового состава трансформантов P. pastoris до и после обработки FLC. Наши результаты показали, что соотношение эргостерол / ланостерол было значительно выше у мутантов N136Y по сравнению с контролем дикого типа и ложным контролем в необработанных условиях. Это наблюдение предполагает, что точечная мутация, возможно, улучшает выработку эргостерола. Интересно, что аналогичные работы также показали, что мутанты CaErg11p могут иметь более высокое очевидное сродство к ланостерину по сравнению с ферментами дикого типа.Повышение каталитической эффективности — возможный путь для этих мутаций снизить чувствительность к азолам. 39,42 Интересно, что более высокая активность деметилирования мутантов N136Y в присутствии FLC предполагает, что эта точечная мутация потенциально представляет преимущество устойчивости CaErg11p в отношении способности продуцировать эргостерин даже в присутствии FLC.

Первой доступной кристаллической структурой гриба CYP51A является полноразмерный S. cerevisiae CYP51 в комплексе с итраконазолом. 27 Мы создали модель гомологии CaCYP51 на основе этой рентгеновской структуры с высоким разрешением, показав, что замена N136Y может привести к стерическому конфликту с His468 и / или Lys143, которые участвуют в взаимодействиях либо водородной связи, либо солевого мостика. с боковой цепью гем-пропионат. Интересно, что N136Y произошел одновременно с заменой Y132H в нашем клиническом изоляте, устойчивом к флуконазолу. Противоположная чувствительность клинического изолята к ITR по сравнению с FLC и VRC может быть объяснена дополнительными взаимодействиями, обеспечиваемыми длинной боковой цепью ITR, которые приводят к более тесному сродству связывания и / или компенсаторным корректировкам в активном сайте, что соответствует предыдущая гипотеза, предложенная Xiao L et al. 34

В заключение, комбинация системы гетерологической экспрессии мутантов CaErg11p, стериновых анализов с помощью газовой хроматографии-масс-спектрометрии и молекулярного моделирования подчеркивает потенциальную роль клинически значимой аминокислотной замены N136Y в устойчивости к азолам. Расположение этой замены в гене ERG11 усиливает роль Hotspot I в специфическом взаимодействии азолов в активном кармане CaCYP51. Среди множества точечных мутаций, описанных на сегодняшний день, около двенадцати были подтверждены как участвующие в устойчивости к азолам после гетерологичной экспрессии и биохимического анализа.Кроме того, сравнивая их уровни устойчивости, остаток N136 также может играть роль в деметилировании ланостерина.

Мы благодарим доктора Дайан Келли из Института наук о жизни, Школа медицины, Университет Суонси, Суонси, Великобритания, за любезно предоставленный поликлональный анти- Candida Erg11p.

Декларация интересов

Авторы не сообщают о конфликте интересов. Только авторы несут ответственность за содержание и написание статьи.

Список литературы

1.

Инвазивные грибковые инфекции: обзор эпидемиологии и вариантов лечения

J Med Microbiol

2006

55

809

818

2.

и другие.

Инвазивные Candida инфекции у хирургических пациентов в отделениях интенсивной терапии: проспективное многоцентровое исследование, инициированное Европейской конфедерацией медицинской микологии (ECMM) (2006–2008)

Clin Microbiol Инфекция

2015

21

87 e1–87 e10

3.

и другие.

Раннее лечение кандидемии у взрослых: обзор

Med Mycol

2011

49

113

120

4.

Использование противогрибковой комбинированной терапии: агенты, порядок и время

Репутация по грибковым инфекциям Curr

2010

4

87

95

5.

и другие.

Факторы риска госпитальной смертности, связанные с лечением Candida Инфекции кровотока

Crit Care Med

2008

36

2967

2972 ​​

6.

и другие.

Клинические рекомендации по лечению кандидоза: обновление 2009 г., подготовленное Американским обществом инфекционистов

Clin Infect Dis

2009

48

503

535

7.

и другие.

Адекватность эмпирической противогрибковой терапии и ее влияние на исход у пациентов с инвазивной инфекцией Candida видов инфекций

J Антимикробный препарат Chemother

2007

60

613

618

8.

и другие.

Вариабельность штаммов и чувствительность к противогрибковым препаратам среди изолятов кровотока видов Candida из 21 медицинского учреждения

Clin Infect Dis

1995

21

1507

1509

9.

и другие.

Множественные молекулярные механизмы способствуют постепенному развитию устойчивости к флуконазолу у клинических Candida albicans штаммов

Противомикробные агенты Chemother

1998

42

3065

3072

10.

и другие.

Аминокислотные замены в цитохроме P -450 ланостерин 14альфа-деметилаза (CYP51A1) из азолустойчивых Candida albicans клинических изолятов способствуют устойчивости к азольным противогрибковым средствам

Противомикробные агенты Chemother

1998

42

241

253

11.

и другие.

Вклад мутаций 14альфа-деметилазы цитохрома P450 (Erg11p, Cyp51p) в устойчивость к азолам у Candida albicans

Микробиология

1999

145

2701

2713

12.

и другие.

Оценка механизмов устойчивости к флуконазолу у Candida albicans клинических изолятов от ВИЧ-инфицированных пациентов в Бразилии

Диагностика микробиологических инфекций

2004

50

25

32

13.

и другие.

Применение количественной ПЦР в реальном времени для молекулярного анализа штаммов Candida albicans , проявляющих пониженную чувствительность к азолам

Противомикробные агенты Chemother

2004

48

2124

2131

14.

и другие.

Генотипическая эволюция механизмов устойчивости к азолам у последовательных изолятов Candida albicans

Эукариотическая клетка

2007

6

1889

1904

15.

и другие.

Распространенность молекулярных механизмов устойчивости к азольным противогрибковым средствам у Candida albicans штаммов с высокой устойчивостью к флуконазолу, выделенных от пациентов, инфицированных вирусом иммунодефицита человека

Противомикробные агенты Chemother

2001

45

2676

2684

16.

Устойчивость грибковых возбудителей человека к противогрибковым препаратам

Curr Opin Microbiol

2002

5

379

385

17.

и другие.

Скрининг аминокислотных замен в белке Candida albicans Erg11 азол-чувствительных и азолустойчивых клинических изолятов: новые замены и обзор литературы

Диагностика микробиологических инфекций

2010

66

373

384

18.

и другие.

Первичная структура гена ланостериндеметилазы P450 из Saccharomyces cerevisiae

ДНК

1987

6

529

537

19.

и другие.

Устойчивость к противогрибковым средствам, нацеленным на CYP51

J Chem Biol

2014

7

143

161

20.

и другие.

Аминокислотные замены в основной петле вставки Candida albicans стерол-14альфа-деметилаза участвуют в устойчивости к флуконазолу

Plos One

2011

6

e21239

21.

и другие.

Гены лекарственной устойчивости и замедленный рост у изолятов Candida albicans

Противомикробные агенты Chemother

2004

53

217

224

22

и другие.

Генетический анализ устойчивости к азолам штамма Дарлингтона Candida albicans

Противомикробные агенты Chemother

2000

44

2985

2590

23.

и другие.

Дифференциальное ингибирование CYP3A4 человека и Candida albicans CYP51 азольными противогрибковыми агентами

Chem Biol Взаимодействие

2000

125

165

175

24.

Нуклеотидная последовательность цитохрома P450 L1A1 (ланостерин 14 альфа-деметилаза) из Candida albicans

Nucleic Acids Res

1989

17

804

25.

Использование метилотропных дрожжей Pichia pastoris для экспрессии цитохромов P450

Методы Enzymol

2002

357

333

342

26.

Национальный комитет клинической лаборатории и стандартов

Эталонный метод определения противогрибковой чувствительности дрожжей в разведении бульона — второе издание: утвержденный стандарт M27-A2

2002

Уэйн, Пенсильвания, США

NCCLS

27.

и другие.

Пониженное накопление препарата в Candida krusei составляет устойчивость к итраконазолу

Противомикробные агенты Chemother

1996

40

2443

2446

28.

и другие.

Архитектура одиночной мембраны, охватывающей цитохром P450, предполагает ограничения, которые ориентируют каталитический домен относительно бислоя

Proc Natl Acad Sci U S A

2014

111

3865

3870

29.

Расширение пределов точности предсказания конформаций боковой цепи

Дж Мол Биол

2001

311

421

430

30.

и другие.

Разработка и проверка генетического алгоритма гибкой стыковки

Дж Мол Биол

1997

267

727

748

31.

и другие.

Гетерологическая экспрессия и характеристика стерол-14альфа-деметилазы CYP51F1 из Candida albicans

Arch Biochem Biophys

2011

509

9

15

32.

и другие.

Производство гетерологичного белка с использованием экспрессионной системы Pichia pastoris

Дрожжи

2005

22

249

270

33.

Экспрессия гетерологичных белков в Pichia pastoris : полезный экспериментальный инструмент в разработке и производстве белков

J Mol Recognit

2005

18

119

138

34.

и другие.

Трехмерные модели дикого типа и мутировавших форм 14альфа-стеролдеметилаз цитохрома P450 из Aspergillus fumigatus и

Candida albicans

дает представление о связывании позаконазола

Противомикробные агенты Chemother

2004

48

568

574

35.

Множественные замены аминокислот в ланостерин-14альфа-деметилазе способствуют устойчивости к азолам у Candida albicans

Микробиология

1999

145

2715

2725

36.

и другие.

Влияние замен Y132H и F145L на активность, устойчивость к азолам и спектральные свойства Candida albicans стерол-14-деметилаза P450 (CYP51): живой пример, демонстрирующий выделение измененного P450 посредством взаимодействия с соединениями окружающей среды

J Biochem

2005

137

625

632

37.

Чувствительность клинических изолятов видов Candida к флуконазолу и обнаружение

Candida albicans

Мутации ERG11

J Антимикробный препарат Chemother

2008

61

798

804

38.

Связывание флуконазола и деметилирование стерола в трех изоформах CYP51 указывают на различия в топологии активного сайта

J Lipid Res

2004

45

2000

2007

39.

и другие.

Точечные мутации S279 в Candida albicans Стерол-14-альфа-деметилаза (CYP51) снижает ингибирование флуконазолом in vitro

Противомикробные агенты Chemother

2012

56

2099

2107

40.

и другие.

Клонирование Candida albicans генов, обеспечивающих устойчивость к азольным противогрибковым агентам: характеристика CDR2, нового гена-переносчика ABC с множеством лекарственных препаратов

Микробиология

1997

143

405

416

41.

и другие.

Мутация T315A в Candida albicans стерол-14альфа-деметилаза вызывает снижение активности фермента и устойчивости к флуконазолу за счет снижения сродства

J Biol Chem

1997

272

5682

5688

42.

и другие.

Азол-связывающие свойства Candida albicans стерол-14-альфа-деметилаза (CaCYP51)

Противомикробные агенты Chemother

2010

54

4235

4245

43.

и другие.

Молекулярный анализ cyp51 из флуконазолустойчивых штаммов Candida albicans

FEMS Microbiol Lett

1997

151

263

268

44. Замена

Y132H в Candida albicans стерол-14альфа-деметилаза придает устойчивость к флуконазолу, предотвращая связывание с гемом

FEMS Microbiol Lett

1999

180

171

175

45.

Наличие аминокислотной замены R467K и потеря аллельной изменчивости коррелируют с азол-устойчивой ланостерол-14альфа-деметилазой в Candida albicans

Противомикробные агенты Chemother

1997

41

1488

1494

© Автор, 2016. Опубликовано Oxford University Press от имени Международного общества микологии человека и животных.Все права защищены. Для получения разрешений обращайтесь по электронной почте: [email protected]

Процедура Эстель Термокератин — что это? «Эстель термокератин»: отзывы парикмахеров и клиентов

.

Наши волосы так же сильно подвержены негативным факторам, как и кожа. Они чувствуют последствия всех наших экспериментов. В результате волосы становятся ломкими, теряют блеск и выглядят как сухая соломка. В этой ситуации кажется, что уже ничего не поделаешь, а былый блеск и красоту вернуть уже нельзя.Но отрастить шевелюру, мечтая о ухоженных прядях, — не единственный выход. На помощь отчаянным красавицам приходит кератин. Отзывы о нем хорошие, и это способствует тому, что дамы решаются на кератинизацию. Но что это? Какая процедура? Отзывы о термокератине разные.

Правильно ли идти на процедуру, основываясь только на обратной связи, и не представляя, что это за вещество — кератин? Постараемся ответить на этот вопрос. Термокератин — что это? Решение всех проблем или временная мера?

общая информация

Кератин — естественный компонент волос.В результате воздействия «химии», горячего воздуха при сушке и других факторов естественный кератин разрушается. Волосы становятся безжизненными и ломкими, теряют привлекательный вид и приятный блеск. Заполните этот дефект термокератином. Отзывы парикмахеров сводятся к тому, что у абсолютного большинства девушек после процедуры волосы выглядят намного лучше. Это естественно, так как кератин, входящий в состав комплекса для процедуры, проникает в структуру волос, разглаживает чешуйки и обволакивает стержень волоса защитным слоем.Это предотвращает дальнейшее разрушение кератина. Благодаря этому волосы снова начинают сиять и выглядят здоровыми и красивыми. Название «термокератин» происходит от механизма процедуры, которая проводится при повышенной температуре рабочего материала.

Кому это действительно нужно?

Отзывы девушек, опробовавших процедуру, могут стать поводом для похода в салон. Однако будет полезно заранее узнать, кому нужна эта процедура. Так, кератинизация возвращает здоровый и ухоженный вид волосам, пострадавшим в результате химической завивки, окрашивания аммиачными красками, а также локонам, потерявшим былый блеск из-за частой укладки.После процедуры волосы, насыщенные кератином и аминокислотами, становятся живыми, мягкими и послушными. Для сохранения достигнутого результата рекомендуется использовать набор серии «Термокератин» Эстель.

Так что эффект продлится максимально долго.

Состав набора

Набор разработан с учетом всех особенностей прически. Трехэтапный уход обеспечивает длительное сохранение эффекта от процедуры.

Маска «Эстель термокератин», отзывы о которой практически все положительные, способствует восстановлению структуры волос изнутри за счет того, что кератин в ее составе быстрее и лучше проникает в глубокие слои стержня волоса.

Термоактиватор, запускающий процедуру, является вторым компонентом набора. Благодаря воздействию температуры кератин намного быстрее проникает в волосы, разглаживает их изнутри и снаружи, «склеивая» чешуйки. Восстанавливается приток волос, чешуйки гладкие, концы соединены назад. Именно благодаря этому достигается естественный блеск и шелковистость локонов.

Завершающим этапом процедуры является нанесение кератиновой воды. Увлажняет волосы, фиксирует эффект от процедуры, дополнительно уплотняет кончики и придает волосам эластичность.

Если окрашивание проводилось параллельно с процедурой, кератиновая вода способствует долговременному сохранению цвета.

Результат процедуры

Необходимость трехфазного ухода основана на свойстве кератина накапливаться в волосах, оптимально встраиваясь в них. Использование всех трех компонентов набора гарантирует ваши волосы:

  • фиксация цвета;
  • увлажняющий;
  • повышение эластичности;
  • УФ-защита;
  • высокотемпературная защита;
  • разглаживание непослушных локонов;
  • антистатический эффект;
  • «оклейка» секущихся концов.

Это еще не все, что делает комплект Estel. Также обеспечивает защиту термокератин. В частности, благодаря защитному слою на поверхности волос он становится менее восприимчивым к агрессивным факторам окружающей среды. Девушки наперебой хвалят полученный эффект.

Когда можно проводить процедуру?

Благодаря уникальной формуле и инновационному механизму действия кератинизация может осуществляться в самые разные сроки, например, непосредственно после окрашивания волос для закрепления цвета.Также предотвращает увядание, последующую деформацию и разрушение волос. Выполнение процедуры в интервалах после окрашивания предотвратит повреждение стержня волоса во время нанесения и воздействия красителей и пигментов красителя. Неокрашенные волосы также можно ороговеть для придания естественного блеска, мягкости и эластичности. После проведения салонной процедуры для закрепления эффекта и продления действия кератина рекомендуется все делать в домашних условиях.

Благодаря тому, что в волосах накапливается кератин, это значительно продлит эффект.

Экранирование как способ защиты волос

Скрининг — относительно новая услуга, предлагаемая в выставочных залах. Продукция для этого выпускает отечественный производитель Estel.

Экранирование (термокератин) действует не только на внешнюю часть волос, как, например, ламинирование. Главное отличие в том, что при экранировании волосы защищены изнутри, получая дополнительные питательные вещества. Благодаря высокой активности компонентов, входящих в состав защитного покрытия, они проникают в самую сердцевину стержня.Некоторые парикмахеры говорят, что максимального результата можно добиться при одновременном скрининге и ламинировании.

Продолжительность действия

Продолжительность действия защитного покрытия может колебаться от недели до месяца. Все зависит от того, насколько повреждены волосы, и от частоты мытья головы. С каждым разом защитная пленка истончается, поэтому эффект будет продолжаться дольше, если вы продолжите ухаживать за волосами в домашних условиях после посещения салона. Поврежденные, слабые и тусклые локоны очень быстро впитывают вещества, входящие в состав экранирования, в частности, если был использован термокератин.То есть, чем хуже состояние волос, тем быстрее исчезнет эффект. Термокератин для волос, отзывы о котором свидетельствуют об отсутствии риска для здоровья, верны. Процедура нетравматична, поэтому вы можете повторять ее сколько угодно раз.

Пока эффект сохраняется на волосах, цвет после окрашивания не тускнеет.

Состав серии

Многие активные натуральные ингредиенты, входящие в состав средств по уходу за волосами, обеспечивают длительный эффект и уход. Например, соевый белок восстанавливает волосы изнутри, а аминокислоты повышают устойчивость к факторам окружающей среды.Компоненты растительного происхождения — дополнительный источник энергии, помогающий восстановить обменные процессы. Если они не будут течь должным образом, волосы станут тусклыми и выпадут. Проникновение веществ в волосы происходит за счет керамидов, ускоряя трансплантацию активных компонентов в структуру волос. Процедуру можно проводить не только в салоне, но и в домашних условиях. Ниже мы рассмотрим механизм его реализации.

Шаг 1: Препарат

Термокератин, отзывы о котором могут сформировать мнение о процедуре, как панацея, является скорее профилактическим средством, нежели лекарством от всех проблем.Если волосы выпадают и преодолевают перхоть, то сначала необходимо вылечить основную проблему. Кератинизация и защита только сохраняют волосы в хорошем состоянии и не устраняют всех проблем. Несмотря на то, что процедура может помочь «склеить» секущиеся концы, их все же лучше обрезать.

Защитная пленка рано или поздно исчезнет, ​​а разделенные концы вернутся в исходное состояние. Перед процедурой вымойте волосы. Идеальный вариант — шампунь, который идет в комплекте. Далее используем бальзам для глубокого питания, а после наносим маску и держим на волосах около 10 минут для достижения наилучшего эффекта.Можно ли обойтись без этого этапа? Можно, но обеспечивает более длительную процедуру.

Этап 2: нанесение термокератина и активатора

Волосы слегка подсушивают, а затем на них наносят средство для процедуры. Он может быть как цветным, так и бесцветным. В первом случае подумайте, как не допустить окрашивания кожи. Решение проблемы — жирный крем, который наносится по линии роста волос. Помните, что средство ни в коем случае нельзя наносить на корни.Поэтому и в салоне, и дома отступление делается на сантиметр.

После нанесения кератина используется термоактиватор.

Этап 3: смыв

Средство «Эстель Термокератин», отзывы о котором указывают продолжительность процедуры, после нанесения некоторое время держится на волосах, а затем смывается. Лучше всего использовать проточную воду комфортной температуры. Он не должен быть слишком холодным или горячим. Состав лучше смыть несколько раз. В результате на волосах останется легкая невесомая пленка, а средство полностью смывается.

Этап 4: Консолидация

Последний этап — фиксирующий. Вымытые волосы сушат горячим феном, затем на них наносится средство для закрепления эффекта от процедуры и горячая сушка повторяется.

На этом процедура завершена.

Минусы

«Эстель Термокератин» (отзывы и эффекты от Рассмотренного выше приложения имеет ряд недостатков. Мнения девушек, попробовавших салонную процедуру или проводивших ее дома, содержат информацию о том, что дела обстоят не так хорошо, как может показаться.Например, нужно чаще мыть голову. Причина в том, что кератиновая защитная пленка собирает пыль, а кожный жир на ней гораздо заметнее. В результате волосы быстро начинают казаться грязными и растрепанными. Регулярная стирка решает эту проблему.

Поскольку кератин утяжеляет волосы, нагрузка на луковицу увеличивается, что может спровоцировать усиление их выпадения. Не все вещества, входящие в состав продукта, являются натуральными. Поэтому перед процедурой нужно проверить, не вызывает ли какой-либо из компонентов аллергию.Тщательная проверка состава и предварительная проба помогут избежать этой проблемы. Кератин — это натуральное вещество, но оно быстро разрушается под действием воды. Поэтому зима и осень с повышенной влажностью для процедуры не подходят, ведь эффект быстро исчезнет, ​​и салон придется снова посещать.

Обращение к специалистам

Поскольку термокератинизация — процедура сложная, многие предпочитают проводить ее в салоне, а не дома.Это оправдано, так как мастер может сделать это на высшем уровне. На все придется потратить два часа и заплатить от двух тысяч рублей.

Парикмахер сначала вымоет вам волосы, даже если голова чистая. Профессиональные шампуни не только полностью удаляют кожный жир и остатки средств для укладки, но и питают волосы от корней до кончиков. Далее наносятся кератиновый состав и термоактиватор. Благодаря этому кератин глубже проникает в волосы, восстанавливая их изнутри. Состав наносится по всей длине, необходимо отступить от кожи на 10-15 мм.

В конце, после смывания состава, парикмахер проводит глажку каждой прядки. Это делается не только для выпрямления, но и для того, чтобы кератин лучше связался с волосами и разгладил чешуйки на поверхности. Процедура Estel Thermokeratin, отзывы о которой в основном восторженные, более эффективна при воздействии высоких температур.

После того, как мастер закончит работу, в первые три дня мыть волосы категорически запрещено. Для сохранения формы прически рекомендуется избегать изменений пробора до тех пор, пока на волосах остается кератиновая пленка.Рекомендуется использовать шампуни и бальзамы специальной серии. При соблюдении этих условий эффект от процедуры «термокератин Эстель» (отзывы, цена — все это обсуждается выше) продлится довольно долго.

p >>

Эти две женщины олицетворяют мир устойчивого производства головных уборов

В «Cheers», американском ситкоме 80-х о том бостонском баре, где все знают ваше имя, во время музыкальной темы разворачивается интересная история шляп.

Пока имена Теда Дэнсона и остальных актеров танцуют на экране, дружелюбных мужчин и женщин, чокающихся бокалами, можно определить по их эпохам в зависимости от типа головных уборов, которые они носят — от цилиндров и элегантных шляп с перьями в викторианском стиле до лодочников. от шляпок до дерби и кепок для скрипачей.

Ранние виды транспорта, такие как верховая езда и многочисленные конные экипажи, позволявшие расширяться, дали начало шляпе. Этот практичный аксессуар, появившийся еще до солнцезащитного крема, может затенять и защищать лицо от солнца и дождя. Считается, что древние греки были первыми, кто носил петасо или шляпы с полями, которые защищали их кожу от сильного средиземноморского солнца.

Оби Кауфман, автор «Атласа полей Калифорнии» и «Состояние воды», сказал: «Правильная шляпа для ребенка Запада — это психический фильтр, который делает все климатические среды одинаковыми и дает надлежащую лицензию на передвигаться везде и везде, когда их зовут.”

Но как только Model T, первый доступный автомобиль Ford Motor Company, появилась на тротуарах в 1908 году, популярность шляп дематериализовалась. Низкие крыши оставляли мало места человеку, чтобы сидеть прямо в шляпе. Попав в машину, людям уже не нужны были шляпы для защиты.

Однако за последние четыре-пять лет шляпы снова вошли в моду. Дана Эстель из BKMC, аббревиатуры Brooklyn Millinery Company, утверждает, что люди становятся немного смелее и смелее в своем выборе моды.

Согласно Statista, онлайн-порталу, который предоставляет статистические и количественные данные по 425 экономическим подразделениям в разных странах, выручка в сегменте головных уборов неуклонно росла за последнее десятилетие. Ожидается, что в 2023 году среднегодовой темп роста в этом сегменте составит 6%. Гистограмма показывает, что в 2019 году на головные уборы было потрачено примерно 7 295 миллионов долларов США, а в следующем десятилетии планируется потратить более девяти миллионов долларов.

В студии d’emploi, креативном пространстве, которое Эстель делит с двумя другими художниками в Гринпойнте, Бруклин, она создает уникальные головные уборы на заказ как для мужчин, так и для женщин.Среди ее клиентов — как национальные, так и международные любительницы шляп, а совсем недавно — певица и автор песен Нэшвилла, номинированная на премию Грэмми в номинации «Лучший новый исполнитель», Марго Прайс, которая прошлой зимой надела индивидуальный костюм BKMC во время выступления «Good Morning America». Прайс также носила шляпу BKMC в апреле, когда она получила почетное звание иконы стиля на Неделе моды в Нэшвилле.

Эстель не всегда знала, что собирается стать шляпником, хотя ее творческие способности были врожденными. Ее мать научила ее шить в юном возрасте, а в подростковом возрасте Эстель ходила по магазинам в Армии спасения, покупая подержанную одежду, у которой она отрезала рукава и образцы ткани, чтобы пришивать свои собственные творения.

В школе она чувствовала себя ограниченной. Если не считать единственного подразделения Home Economics по изготовлению подушек, творческих возможностей в области текстиля и дизайна было мало.

После школы она получила степень бакалавра в области одежды и текстиля в университете SUNY Oneonta. Затем, желая получить степень в чем-то более художественном, она поступила в школу дизайна Парсонса на Манхэттене. Там она погрузилась в моду, но вскоре поняла, что это не тот путь, которого она ожидала. Возможно, это прозрение было объяснено количеством ее сверстников, которые не знали, как шить.

«Мое время в Парсонсе было не лучшим, — признала она.

Она чувствовала себя непоколебимой, но этот опыт помог ей осознать свое истинное призвание.

В кампусе она подружилась с людьми, одетыми в драг. Она часто делала им головные уборы для фотосессий.

«Просто щелкнуло», — вспоминала она. «Я больше занимаюсь производством, и это то, что действительно привело меня сюда, в отличие от того, чтобы быть дизайнером или рисовальщиком».

После этого прозрения Эстель получила степень по изготовлению шляп в Технологическом институте моды [FIT], опыт, который она приписывает своему нынешнему успеху в качестве производителя шляп.По ее словам, обучение под руководством учителей, имеющих опыт работы в этой профессии, невозможно изучить на YouTube. Овладение ремеслом или навыком требует постоянства и упорства; именно через повторение цементируется фундамент. И с этим фундаментом Эстель может справиться с любыми испытаниями и невзгодами, которые могут возникнуть.

«Мне очень нравится делать все, что я продаю».

«Мне очень нравится делать все, что я продаю.Так что мне очень повезло, что я нашла ремесло, которое подходит для этого царства », — сказала она.

Находясь в FIT, Эстель вспомнила, что «шляпы на самом деле не являются чем-то особенным». Однако за последние четыре года индустрия вернулась из того, что она называет «этой призрачной индустрией». Сегодня она рада, что у нее есть современный рынок для людей, которым нужны шляпы на заказ.

Еще одна причина, по которой она думает, что люди снова тянутся к шляпам, заключается в том, что люди больше любят хорошо сделанные товары.

Чтобы узнать, какие факторы влияют на отношение потребителей к брендам и что влияет на их покупательские привычки, британская информационная компания Nielsen опросила 30 000 потребителей из 60 стран.Его результаты показали, что «66% потребителей во всем мире готовы платить больше за экологически чистые товары», в то время как 73% миллениалов готовы сделать это.

«Что меня действительно раздражает, — сказала она мне недавним солнечным днем ​​в своей студии, — так это весь этот фаст-фэшн, способ изготовления нашей одежды, то, как мы обращаемся с людьми, которые ее шьют, и как мы можем просто игнорировать это, чтобы выглядеть мило ».

Для сохранения устойчивости она использует материалы высочайшего качества.Таким образом, человеку в жизни понадобится меньше шляп, потому что одной шляпы хватит на всю жизнь.

«Для меня очень важно, чтобы эти шляпы передавались из поколения в поколение», — сказала она.

Она также не принимает возмещения, потому что не хочет, чтобы дорогие материалы пропали даром. Ей кажется смешным тратить жизнь бобра на кого-то, кто не совсем понимает, чего он хочет. К счастью, она ни разу даже близко не подошла к клиенту, который был недоволен ее политикой возмещения.

Хотя жизнь бобра не поддерживается процессом изготовления шляп, Эстель поддерживает уровень устойчивости с точки зрения сокращения трудозатрат и отходов.

Для изготовления шляп она использует 100-кратный бобровый войлок, природный водоотталкивающий агент. (Система X может вызывать недоумение: у некоторых производителей шляпы разные шкалы, но обычно 100X и 10X означают 100% бобровый войлок). Бобровый фетр изготавливается так же, как и бумага — путем прессования, матирования и уплотнения натурального бобрового меха или волокон (а не кожи, что является распространенным заблуждением).

Эту уникальную конструкцию из материала, напоминающего память, можно многократно формовать и изменять форму. Если, например, шляпа раздавится в багажном отсеке самолета, ее можно существенно изменить, что избавит от необходимости тратить деньги на новую шляпу. В своей студии Эстель бесплатно изменяет форму или гладит шляпу человека, потому что, по ее словам, «хорошо сшитую одежду, хорошо сшитую обувь и хорошо сшитые шляпы можно починить, и их можно носить так долго. Нам просто нужно выйти из этого одноразового цикла, в котором мы находимся.”

Бобру не спасти жизнь, если с него снять шкуру. В конце концов, по ее словам, бобр — это грызун, и в некоторых регионах Северной Америки он наносит ущерб окружающей среде.

«Это то, с чем я борюсь», — сказала она о жизни бобра.

Некоторые производители головных уборов будут использовать шерстяной войлок в качестве альтернативы, но он не обладает такой же структурой, как бобровый войлок, поэтому необходимо добавить элементы жесткости. Также шерсть не является водостойкой.Эта альтернатива, по словам Эстель, «не прослужит так долго, поэтому вам придется покупать больше головных уборов».

Мех животных, как указано в статье «От войлока до шкуры: изготовление бобрового цилиндра», имеет «микроскопические« зубы », которые скрепляются друг с другом с помощью тепла и влаги. На протяжении веков мех бобра считался «лучшим» для изготовления головных уборов, потому что эти «зубы» выступают на внутренней шерсти шкуры животных.

Она оправдывает использование бобрового войлока тем, что напоминает себе, что шьет шляпы самого высокого качества.

«Я трачу много времени на их изготовление, поэтому я знаю, что они останутся в прошлом, и это самое главное для меня», — сказала она.

В заболоченных болотах побережья Мексиканского залива Луизианы инвазивные нутрии, вид полуводных грызунов, представляют опасность. С 1930-х годов, когда грызун был завезен в Америку из Южной Америки, чтобы восстановить сокращение ондатры, популяция нутрии увеличилась. Обладая длинными зубами и массой тела 14 фунтов, он ответственен за деградацию прибрежных районов площадью около 1900 квадратных миль.

Хотя системы дамб вдоль реки Миссисипи и дноуглубительные каналы, построенные нефтегазовыми компаниями, безусловно, способствуют потере водно-болотных угодий, этот гигантский грызун тоже. Документальный фильм «Грызуны необычного размера» информирует аудиторию о последствиях «отречения правительства и отсутствия предвидения от одного гигантского грызуна».

Поскольку их мех похож на мех бобра, некоторые производители шляп начали использовать войлок из меха нутрии в 100 раз, что непреднамеренно способствовало восстановлению заболоченных земель Луизианы.Эстель планирует получить образец войлока из меха нутрии и испытать его.

Она использует природные украшения, которые она находит во время походов по Кэтскиллам, например, перья, а также сушеные цветы, которые она спасает от событий в городе, прежде чем они попадут в мусорное ведро. Если клиент ищет конкретное перо, скажем, павлинье перо, и хочет, чтобы это перо было окрашено в сиреневый цвет, он свяжется со своим перьевым парнем из района одежды Нью-Йорка, хотя она предпочитает добывать их в дикой природе. Она считает, что «Перья должны иметь определенную жизнь.”

Она носит шляпы каждый божий день, ее часто останавливают и хвалят прохожие в вагонах метро по всему городу. Когда люди спрашивают, где она взяла шляпу, а затем она протягивает им свою визитку, они недоумевают: «Ух ты, я никогда раньше не встречал шляпников».

Один из самых впечатляющих ее дизайнов — новая шляпа-гриб, работа любви, в которой новаторски используется лазерный резак. Сначала она обрисовала поля шляпы на кальке, нарисовала вручную различные грибы и грибки по кругу, чтобы они совпадали с полями, а затем отсканировала их.После того, как изображение было отсканировано в компьютер, оно подключалось к лазерной резке. Затем она поместила шляпу в машину, которая использует отсканированное изображение для определения края фактических полей шляпы перед нанесением рисунка на шляпу. Наконец, используя лазерный резак, она навсегда нанесла рисунок на поля, как татуировку на коже.

Некоторые производители шляп для достижения этого эффекта используют токарный нож, но, поскольку рисунки Эстель были настолько тонкими и детализированными, требовалась точность лазерного резака.Она также указала, как Photoshop — если она хорошо разбирается в нем — может ускорить этот трудоемкий процесс. Однако она предпочитает не торопиться, отслеживая каждый гриб вручную.

«Мне нравится весь медленный процесс», — сказала она.

Эстель, которая всегда любила есть грибы, чувствует себя неразрывно связанной с ними. Выросшая в Гудзонской долине в Кэтскиллс, она вспоминает, как в детстве искала грибы вместе со своими братьями и сестрами.

Недавно, когда она собирала пищу, ей пришло в голову интересное осознание: все грибы носят шляпы.

«Почему я так люблю грибы? Может, грибное путешествие принесло мне и мне эти шляпы », — сказала она со смехом. С тех пор, как она осознала это, она работает над «минималистской психоделической коллекцией природных вибраций».

Еще одна великолепная шляпа, представленная в ее студии, вручную окрашена в индиго, темно-синий оттенок, который будет дополнять любую джинсовую куртку. Хотя она в основном берет у поставщика, который занимается ручным умиранием, она сама углубилась в это, что является подтверждением ее желания стать мастером в изготовлении шляп.Она даже проводит мероприятия по окрашиванию в d’emploi, демонстрируя свое желание объединить сообщество с помощью художественных усилий.

На соседней полке стоит панамская соломенная шляпа ручной работы с причудливой психоделической вышивкой в ​​виде грибов. Каждый стежок — напоминание о страсти и преданности делу, которыми обладает каждая шляпа BKMC. Часы кропотливого ухода и деталей делают шляпу долговечной.

Часы кропотливой работы также заслуживают справедливой компенсации.

«Я думаю, что в ремесле важно поддерживать такую ​​цену, которая отдавала бы должное вашему ремеслу и другим людям в вашем ремесле, которые тоже этим занимаются — изготовление шляп, безусловно, относится к этой сфере», — сказала Эстель.

Шляпа BKMC стоит от 450 долларов. Панамские соломенные шляпы и береты стоят дешевле, но делает их не так часто.

«Я знал, сколько люди берут за головные уборы, но знал, что, возможно, моего умения здесь не было; Я только начала », — сказала она, вспоминая два года затворничества, когда она шила шляпы в своей квартире, но не показывала ни души.

«Я был так застенчив; Я не думал, что они идеальны, я знал, что это не так ».

После того, как ее навыки и уверенность выросли, она почувствовала себя комфортно, делясь шляпами с друзьями и семьей.Вскоре ее друзья стали просить головные уборы, и тогда она решила создать сайт.

Как и большинство креативщиков, Эстель обладает пытливым умом и постоянно стремится оттачивать свои навыки в надежде стать мастером шляпного дела. Создавая и раздвигая границы, она сказала: «Вы понимаете, насколько вы способны на это, и я думаю, что многие люди не думают, что они способны на это».

На сегодняшний день Эстель сшила более 150 головных уборов. Эти шляпы имеют характер, рассказывают историю и служат на всю жизнь.Взаимоотношения, которые она установила со своими клиентами, свидетельствует о ее артистизме.

Загляните в ее студию в Гринпойнте, где она измерит вашу голову и создаст шляпу, которую вы всегда знали, что хотите, никогда не знали, что хотите, или всегда хотели, но никогда не думали, что у вас получится. Я попадаю во все три категории.

По всему континенту, в высокогорном пустынном районе Мадраса, штат Орегон, Кейт Хавстад из Havstad Hat Company создает уникальные шляпы из 32-футового передвижного дома Airline Streamer, расположенного на биодинамической ферме.Используя натуральные красители, которые она добывает в дикой местности, что на ее заднем дворе, она объединяет природу и текстиль так, что само по себе искусство.

Покинув свой дом на северном побережье Калифорнии в 2014 году, Хавстад быстро очаровалась стойкостью и природной красотой Орегонских бесплодных земель. Его суровые погодные условия — раскаленное лето, засуха и суровая, покрытая белым одеялом зима — характерные для этого уголка страны, не подходят для вьющихся растений дока, шалфея, можжевельника и кустарника.Эта растительность не только цветет, но и вдохновила Хавстад на создание «Оттенков высокой пустыни» — коллекции шляп, сделанных из красок, созданных дикими методами, которые олицетворяют ее «стремление к устойчивости и более тесной связи с землей».

В конечном итоге она надеется, что, как только люди начнут гармонично сочетаться со своим окружением, они не могут не почувствовать желание защитить их. Это идеи, которым мы должны подражать.

С различными дикорастущими растениями, Havstad купает 100X премиальных меховых войлоков бобра, полученных из США.С., в натуральных, искусственно созданных ботанических красителях, которые она придумывает самостоятельно. Она аккредитовала травника и иглотерапевта Джули Моултон из Woven Acupuncture, чтобы познакомить ее с этой практикой.

Moulton, по ее словам, не только научил ее видеть потенциал использования растений для создания оттенков, рассказывающих историю земли, на которой мы живем, но также вдохновил ее «увидеть, как начать разговор о цвете шляпы. Достигнутое за счет использования растений могло бы перейти в более широкий разговор о том, что еще эти растения дают нам.”

Наблюдать за тем, как Хавстад строит шляпы, похоже на наблюдение за тем, как Боб Росс рисует фрески: оба обладают способностью брать чистый холст и — соответствующими гениальными штрихами — вытягивать золото из соломы. Ее процесс, в равной степени завораживающий и внушающий трепет, часто отображается в ее аккаунте в Instagram (@HavstadHatCo).

Создание шляпы Havstad начинается и заканчивается устойчивостью. Сначала она позволяет меховым войлокам впитаться в ванне с натуральными красителями от одного до трех дней, а затем оставляет их сохнуть.Ванна с краской на основе полыни, которая дает красивый оливково-зеленый оттенок, позже расширяет свою красоту с помощью обонятельных органов чувств. Когда она распаривает шляпы, сделанные из этой красильной ванны, она поделилась в Instagram, аромат пахнет теплыми летними днями сразу после того, как проносится эфемерный шторм в Высокой пустыне.

После того, как они высохли на воздухе, она переносит войлоки на соседнюю стримерную авиалинию, которую она превратила в свою мастерскую, где они блокируются вручную. Этот процесс берет некогда хрупкий фетр и придает шляпе форму.Используя оборудование, появившееся на рубеже 20-го века, Havstad сохраняет высокое мастерство и пользуется большим успехом.

Отправляйтесь в Нэшвилл, штат Теннесси, к пряжке библейского пояса, где голубая шляпа Havstad демонстрируется на новой выставке в Зале славы и музее музыки кантри под названием «Все цвета», посвященной Кейси Масгрейвс. Певица и автор песен из Техаса, которая в этом году выиграла Грэмми за лучший альбом, была приглашена куратором выставки, полной детских безделушек, фотографий, костюмов и рукописных текстов с 1998 года по настоящее время, чтобы отпраздновать ее стремительный рост карьеры.

Хавстад был выставлен на продажу.

«Я всего лишь одна женщина, занимающаяся изготовлением головных уборов на заказ в центре сельскохозяйственного Орегона, и то, что моя работа находится рядом с такими гигантами, как Стелла Маккартни [и] обнаженные… вызывает у меня мурашки по коже», — написала она в своем Instagram ниже. фото экспоната.

Никки Лейн, кантри-певица и автор песен, которая уехала из Нэшвилла в Остин, также с гордостью носит шляпы Havstad на сцене, как и канадский певец и автор песен Колтер Уолл и Уилли Уотсон, актер и один из основателей Old Crow Medicine Show.

Хотя ее шляпы украшали различные концерты и красные ковры, которые носили как кинозвезды, так и музыканты, она не заботится ни о славе, ни о всеобщем внимании.

«Это люди, которые заботятся о мастерстве и качестве, уникальном дизайне, который говорит с чувством места и рассказывает историю»

«Больше всего для нее важны люди, которые заботятся о мастерстве и качестве, уникальном дизайне, который выражает чувство места и рассказывает историю».

В 2017 году Хавстад начала проводить семинары по изготовлению шляп для 10 человек в уютной обстановке своего мобильного дома.В этом году она не решила, хочет ли она провести семинар осенью 2019 года, но трогательное письмо от женщины, которая посетила предыдущий семинар в Хавстаде, изменило ее мнение. Поблагодарив Хавстада за прекрасный опыт работы в мастерской, женщина признала, что драйв и вдохновение, которые Хавстад извлек из нее, перешли в ее личную жизнь.

«Эта работа не была бы успешной, если бы я был просто производственным строительным головным убором; все дело в людях, историях, связях », — написал Хавстад в другом откровенном посте.

С момента основания в 2014 году ее бизнес стал настолько требовательным, что в этом году она наняла помощника по коммуникациям; она также приняла новую систему политики заказов, чтобы «замедлить приток заказов», — поделилась она в социальных сетях. В период с октября по апрель 2019-2020 гг. Она будет принимать только 75 индивидуальных заказов, обработанных в течение четырех периодов приема заказов; в период с мая по октябрь она будет работать на семейной ферме Casad со своим женихом.

По ее словам, она надеется, что эти новые правила «обеспечат отличное обслуживание клиентов и продолжат создавать уникальные головные уборы вручную, с сердцем, как я делаю вот уже шесть лет.”

Подобно Эстель, Хавстад украшает свои шляпы уникальными сокровищами: перьями, бирюзовыми бусами, кожаными шнурами и вышитыми ткацким станком лентами для шляп «Roadside Remedies». Она также выложила каждую шляпу красивым ярким шелком и вдохновляющими тиснеными цитатами на кожаной повязке из овчины. «Я никогда не видел, чтобы дикая вещь жалела себя», «Не теряй головы» и «В конце концов, все сливается в одно, и река течет по нему», передают чувство вдохновения и нежности.

Хавстад практикует то, что проповедует.Она возвращает к жизни шляпы, в том числе свои собственные, избавляя от необходимости тратить материалы впустую. На ее странице в Instagram потрепанная, испачканная и деформированная шляпа сопровождает пост, в котором говорится: «Я позволила этому войлоку подпрыгивать вокруг, от жизни на столбе забора до погребенного в снегу на улице более четырех лет. Он видел всю зиму, весну, лето и осень, много птичьего дерьма, много тварей, собирающихся повеселиться и восстановить его на этой неделе ». В другом посте, порвав пару рабочих штанов, она попросила 31 000 подписчиков дать предложения по функциональной женской одежде.

Прямо или косвенно она учит важности качественных товаров. В то время как модные кампании по всему миру — в Нью-Йорке, Милане, Париже и Токио — генерируют новые образы с каждым изменением сезона, которые неэффективно становятся немодными в следующем, изменения необходимы. Общество должно тяготеть к экологически чистым продуктам, и шляпы не исключение.

Когда она не занимается изготовлением шляп, она вместе со своим женихом Крисом Касадом посвящает время биодинамической ферме Casad Family Farms.Благодаря этой работе пара попала на обложку журнала Bend, посвященного образу жизни в Центральном Орегоне.

Недавно она выступила с речью о сохранении и образовании общественных земель Америки на мероприятии, организованном Oregon Backcountry Hunters & Anglers [BHA] и Filson, признав, что этот опыт помог ей преодолеть страх публичных выступлений.

Сказать, что Кейт Хавстад неразрывно связана с природой, — ничего не сказать. Благодаря своей работе она открывает свое окно на запад, приглашая нас на свой задний двор, на землю, которую она ценит.Ее связь с природой — не только дань уважения Мьюиру и Эмерсону, но и освежающее напоминание о стремлении человечества к устойчивому развитию.

Строим стену по кирпичику: опыт одного потенциального учителя с тревогой по математике

Изучение математики в начальной школе

Эстель начала свой путь по математике, будучи маленьким ребенком, чувствуя себя математически уверенным и компетентным. По словам Эстель, в первые годы ее обучения в начальной школе учителя возлагали на нее большие надежды на успехи в математике, и она была очень рада.Более того, Эстель считала, что они могут обучать ее таким образом, чтобы дополнять ее визуальный стиль обучения. Эстель считала себя человеком, преуспевающим в математике, но признавала, что ей приходилось много работать не только для получения хороших оценок, но и для понимания математического содержания, которого от нее ожидали.

Хотел бы я быть одним из «умников»

По мере того, как Эстель прогрессировала в начальных годах обучения, ее трудолюбивая натура не принесла ей места в высших классах математики.Эстель начала чувствовать себя разделенной или отделенной от «умных учеников», приравнивая свой статус «обычной» ученицы к тому, что ее меньше ценили, чем ее сверстники из математической группы более высокого уровня. Это публичное сравнение, в котором она не могла скрыть или скрыть свой статус классифицированной как «обычная ученица», заставило Эстель поверить в то, что она плохо разбиралась в математике. Она заметила, что ее учителя меньше интересовались ее математическим мышлением и менее внимательны к ее математическим вопросам и проблемам.Уверенность Эстель пошла на убыль, оставив после себя след математического беспокойства, на который ей нужно было обратить внимание. Она вспомнила такую ​​историю:

Математика в четвертом классе — это когда в самом начале года мы все сдавали тест по математике. Не помню, было ли это просто умножение или что-то в этом роде. Люди, которые сдали тест по математике на сто процентов, были в продвинутой группе. Каждый день мы видели, как они покидали класс и уходили в другой класс. Я просто всегда помню это, думая: «Почему я не могу быть в этой группе?» Или «Это потому, что я не сдал тест за определенное время?»

Эстель добавила:

Я действительно чувствую, что одноклассники могут сильно повлиять на ваше восприятие математики, и я действительно думаю, что опыт, вы знаете, из моего личного опыта, разлучения в молодом возрасте, даже в четвертом классе, вы знаете, что вы продвинулись в математике но я застрял в обычном классе.Это всегда заставляло меня чувствовать, что я просто обычный человек, но вы, ребята, классные, потому что можете пойти в другой класс. Чувак, я действительно хотел быть там! О, математика, ты мне не нравишься, потому что я не умею.

В двух рассказах Эстель говорилось о чувстве поражения, которое она чувствовала в математике, а также о том, что ее отделили от учеников, которые считались компетентными и умными детьми. Другими словами, она считала, что ее окружают стеной в «обычном классе».Это разделение или разделение, казалось, подчеркивало уверенность Эстель в том, что она хуже в математике и, возможно, не может добиться таких же успехов, как «умные дети» в математике. Более того, будучи частью «обычного класса», Эстель не могла скрыть того факта, что ее не считали одной из умных детей.

Когда Эстель оглянулась на этот опыт, она представила, какое волнение, должно быть, испытали ее одноклассники, когда их выбрали в группы продвинутой математики. Она снова обратилась к стигме, которую она испытывала из-за того, что ее не выбрали, и заявила: «Я не знаю, у меня всегда в голове застряла мысль, что они действительно хороши в математике.Я не должен быть настолько хорош, если я просто нахожусь в обычном классе со всеми ». Эстель, казалось, думала, что ее загнали за стену, в которой стояли менее образованные студенты-математики в классе. Таким образом, опыт группирования способностей, с которым столкнулась Эстель, побудил ее разработать стратегию выживания, которая привела к созданию воображаемой защитной стены.

Изучение математики в средней школе

По кирпичику я построил «математическую стену»

К тому времени, когда Эстель перешла в среднюю и среднюю школу, ее математические опыты были полны беспокойства.Она стала еще более твердо верить, что не только плохо разбирается в математике, но и не понимает этой области содержания. Именно в этот момент она открыто и ясно говорила о «стене», которую она построила, чтобы защитить себя от стыда и унижений, с которыми она столкнулась во время изучения математики.

Когда Эстель пошла в среднюю и среднюю школу, результаты ее тестов по математике подтвердили ей, что у нее низкие математические способности. Она поделилась следующим воспоминанием:

В средней и старшей школе я знаю, что на мое отношение к математике на 100% повлияли мои низкие результаты тестов.Я начал возводить стену в сторону математики, и это было так, и мне до сих пор иногда трудно открыться и впитать информацию. Иногда учителя хотели поговорить со мной наедине о моих успехах по математике, и это обычно не было позитивным разговором. Я начал смущаться и стал перебирать даже самые простые математические уравнения.

Эстель рассказала, что возвела психологическую «стену», чтобы защитить себя от негативных оценок ее успеваемости по математике в школе.Первоначально «низкие результаты тестов» представляли собой отрицательную обратную связь. Затем «не позитивные разговоры» с учителями математики о ее работе стали опытом, которого следует избегать. По мере накопления отрицательной обратной связи Эстель укрепляла свою стену, что все больше мешало ее способности «открывать и впитывать информацию» и продумывать «простейшие математические уравнения». Другими словами, возник отрицательный цикл, в котором психологическая стена, призванная оградить Эстель от критики других ее математических достижений, блокировала ее изучение математики.К сожалению, хотя учителя математики Эстель, встречаясь с ней наедине, чтобы обсудить ее работу, возможно, пытались смягчить «смущение» Эстель, само уединение этих разговоров могло укрепить уверенность Эстель в том, что она заслуживает того, чтобы ее изолировали от более успешных студентов-математиков. ее классы, и что ей нужно скрыть то, что она не знала о содержании математики от других. По сути, предпочитаемая Эстель стратегия отделения себя от математики в качестве средства справиться со своим беспокойством, похоже, сделала изучение математики еще более трудным.

Эстель вспоминала, что к тому времени, когда она перешла в среднюю школу, она серьезно сомневалась в способности изучать математику. Пытаясь справиться с тревогой, связанной с ее непониманием математики, она сказала следующее:

Математика повсюду, и кажется, что от нее невозможно оторваться. … Важным фактором этого, возможно, является проблема уверенности. Может быть, из прошлого опыта. … Иногда я думаю, что, может быть, дети могут поставить стену против математики, я не знаю, это то, что я делал в старшей школе, когда учитель начинал говорить о математике, и я такой: я смотрю на доску, но я ничего не принимаю.

Рассказы Эстель предполагают, что она, возможно, заручилась стеной, чтобы отогнать беспокойство, которое она испытывала в моменты, когда преподавали уроки математики. По ее собственным словам, стена на мгновение заблокировала ее от беспокойства, связанного с непониманием содержания, но стена также, казалось, еще больше отдаляла ее от изучения содержания. Более того, стена помогла ей скрыть тот факт, что она ничего не «понимала», хотя казалось, что она смотрит на доску и слушает, как ее учитель говорит о математике.

Были времена, когда Эстель вспоминала, что на уроке математики не могла понять содержание, представленное ее учителем. Она объяснила, как пыталась справиться с этой ситуацией:

И я просто знаю из своего личного опыта, что особенно в старшей школе, когда я не мог понять концепцию, а учитель просто двигался дальше и дальше, я был потерян. И вы как бы возводите эту стену, как будто я этого не понимаю, и поэтому я не знаю, что еще делать, потому что учитель уже уходит.

Эстель искала убежища у стены, чтобы справиться с тревогой потеряться или быть отрезанной от содержания математики. Стена, казалось, дала ей некоторое облегчение от беспокойства, связанного с незнанием, что делать, когда она столкнулась с математикой, которую не понимала. Кроме того, стена давала ей временную передышку от учителей, которые, по ее мнению, оставили ее позади. Однако стена не могла обеспечить долгосрочное решение для доступа к математическим знаниям, в которых нуждалась Эстель.Тем не менее, Эстель продолжала использовать стену, чтобы скрыться от математического содержания, которого она не знала.

Обучение преподаванию математики во время методов математики и классной стажировки

Я дал клятву никогда не оставлять ученика позади

Когда Эстель всерьез задумывалась о том, чтобы стать учителем начальной школы, она беспокоилась, что ее математическое беспокойство могло стать для нее камнем преткновения. выбранная профессия. Когда она вошла в программу подготовки учителей, она пообещала, что подарит своим будущим ученикам положительный математический опыт, который будет способствовать их пониманию, а также вселит в них чувство уверенности.Более того, как заботливый человек, она хотела убедиться, что ни один из ее учеников не остался позади, — опыт, с которым она сталкивалась много раз в своем собственном изучении математики. Кроме того, Эстель хотела, чтобы ее ученики считали ее способным и компетентным учителем математики — ярлык, который не ассоциировался с ней как с ученицей. Она предполагала, что ее класс математики будет таким, в котором она будет:

разбивает для них методы и уроки, потому что я чувствовал, что это то, чего я не понимал в начальной школе.И я хочу, чтобы этот класс был очень разговорчивым, чтобы мы могли общаться по математике. Где не только учитель говорит, а дети делают то, что я не понимаю, где они чувствуют себя комфортно и задают вопросы, которые они чувствуют. … Я просто хочу быть тем замечательным учителем математики, которого запомнили дети.

Эстель также объяснила, что планировала создать атмосферу в классе, основанную на доверии.Она заявила, что ее класс станет местом, где ее ученики смогут делиться своими математическими мыслями и идеями и приходить к ней с любыми вопросами, которые могут у них возникнуть, без страха или стыда. Она сообщила, что хотела воспитывать уверенных в себе студентов-математиков, которые считали бы ошибки частью учебного процесса. Эстель представила себе класс, в котором она будет децентрализована как единственный авторитет в математике. Она представила себе класс, в котором от нее не ожидается, что она будет знать все о математике, и что она сможет ослабить бдительность.Другими словами, Эстель пообещала создать в классе культуру, в которой она и ее ученики смогут «сломать» психосоциальные стены, которые защищали и мешали им заниматься математикой. Кроме того, создавая среду в классе, которая не требовала, чтобы Эстель была единственным поставщиком математических знаний, она потенциально могла скрыть области математики, которые вызывали у нее беспокойство.

Когда Эстель подошла к концу семестра по математике, она признала, что узнала много важных вещей о преподавании математики.Тем не менее, она поделилась тем, что чрезвычайно важной является ее ответственность за то, чтобы ее ученики понимали концепции, которым она будет их обучать. Ее уверенность, казалось, возросла, когда она поделилась следующим наблюдением в конце своего курса математических методов:

Мне очень нравится преподавать математику, и я думаю, что этот семестр действительно помог мне обрести уверенность в математике … Это действительно было о понимании того, как преподавать эти концепции детям.И я думаю, что могу, весь мой хороший и плохой опыт в математике, я действительно думаю, что могу привнести позитивное отношение к своим ученикам и знаниям. … Вы можете иногда испытывать трудности в математике, но вы их преодолеете, и я просто, я хочу, чтобы мои ученики поняли это: «Ага, я понял».

Эстель очень хотела создать среду, способствующую изучению математики, которая, по ее мнению, была важна для ее будущих учеников.

Представляя свой идеальный класс математики, Эстель позиционировала себя как одну из своих учениц, равных им по социальному статусу, но также и по обязанностям. В этом видении Эстель отказалась быть единственным авторитетом в математике. Однако, хотя она пообещала «привнести позитивный настрой» и побудить своих учеников-математиков «общаться», неясно, какие «концепции» Эстель надеялась усвоить, кроме как «пройти через это». В самом деле, казалось, что в идеальном классе математики Эстель и она, и ее ученики будут заниматься математикой лишь постольку, поскольку переживет его.На этом этапе своей программы подготовки учителей Эстель не уточняла, как она и ее ученики будут преуспевать как изучающие математику. Таким образом, Эстель спроецировала свое прошлое, когда она была студенткой математики, на свой будущий урок математики и на учителя / ученика математики, которым она будет.

У меня есть проблемы с необходимыми знаниями математики

После завершения курса математических методов и сопровождающего ее семестра стажировки в классе Эстель рассказала о некоторых опасениях по поводу преподавания математики, которые у нее на уме.Она поделилась тем, что, поскольку ее студент преподает семестр впереди, она беспокоилась о том, как будет преподавать математику в областях, в которых она не была уверена, таких как десятичные дроби и дроби. Эстель сказала:

«Мне придется почти заново учить себя этим вещам. Я хочу стать уверенным учителем математики и уверенным в себе на этих уроках, чтобы мои дети, так что да, эта учительница знает, о чем говорит, мы можем это сделать ».

Вдобавок Эстель забеспокоилась, когда она подумала о следующем сценарии:

Когда я думаю о преподавании в старших классах, я иногда немного нервничаю, думая, черт возьми, знаете, когда они задают мне вопросы, как, что, если я не могу на них ответить? Что делать, если я не знаю этих ответов прямо на месте? … Как я с этим справлюсь? Я не хочу, чтобы мои будущие ученики застряли или не знали, что им нужно знать.

Эстель признала, что обучение детей пониманию математики — «одна из главных вещей, которыми должен заниматься учитель математики». Тем не менее, прежде чем приступить к учебному семестру, она спросила себя:

«Как я собираюсь стать хорошим учителем математики?» [посмеивается] «Что, если я не смогу охватить всех своих учеников и научить их?» Я продолжал думать: «Я должен понять, чему я учу для себя, прежде чем я смогу научить этому кого-то еще.Я все думал: «Это страшно». Математика — единственный предмет, который беспокоит меня. В конце я просто сказал себе: «Я хотел быть учителем математики, которого я всегда хотел, у которого был учитель, который поддерживал, ободрял и понимал, откуда приходят мои ученики, чтобы они могли добиться успеха в математике».

Несмотря на свою клятву, что она хочет стать учителем математики, Эстель беспокоилась о том, как она сможет это сделать. По мере того, как Эстель получила более широкое представление о том, что значит преподавать математику, она задалась вопросом, как она сможет уделить внимание всем различным аспектам, которые необходимы для успешного преподавания математики.Вступая в свой учебный семестр, она помнила о своей цели стать «уверенным учителем математики», несмотря на то, что считала, что «математика — единственный предмет, который меня беспокоит». Другими словами, когда Эстель глубоко задумывалась о преподавании математики, она не могла скрыть своего собственного математического беспокойства.

Учимся преподавать математику во время обучения студентов

Буду ли я процветать или проигрывать в классе г-жи С.?

Эстель сообщила, что вошла в семестр преподавателя, чувствуя некоторую тревогу из-за того, что ее перевели на миссис.В третьем классе С. (где она провела время во время семестра стажировки). Хотя Эстель уважала г-жу С. и знала, что она получит большую пользу от опыта г-жи С., она сообщила, что г-жа С. временами могла быть излишне критичной и суровой. Хотя Эстель была трудолюбивым и заботливым человеком, эти качества не спасли ее от того, что мисс С смутила ее перед учениками.

Эстель несколько раз в предыдущем семестре вспоминала, как публично разоблачала и стыдила за ошибки, которые она сделала во время работы со студентами.Она рассказала, что нервничала, когда г-жа С. критиковала ее, указывая на то, что она делала неправильно, а также на то, что, по мнению г-жи С., ей следовало делать. Однако Эстель сообщила, что ее наставничество, особенно в области математики, было бы неоценимым, поскольку она училась преподавать и приняла это место.

Эстель приняла решение, что она «просто попытается впитать все, что я могу», изучив стратегии, которые г-жа С. использовала при обучении студентов математике, одновременно руководя классом.Фактически, Эстель сказала, что в начале учебного семестра она спросила г-жу С., может ли она начать преподавать математику раньше, чем планировалось. Эстель считала, что, приобретя столько опыта, сколько она сможет преподавать математику, особенно под бдительным оком г-жи С., тем более комфортно она сможет освоить математику. Она заявила, что она надеялась, что ее опыт преподавания математики в классе г-жи С. заставит ее чувствовать себя более уверенно в математике. Возможно, тогда Эстель сможет разрушить свою стену и ей не придется скрывать математику, которую она не знала, которая, казалось, вызывала у нее беспокойство по поводу математики.

Работа над минимизацией математических ошибок

Когда Эстель начала преподавать математику, она обнаружила, что преподавание этой предметной области кажется таким же сложным, как и ее ученический опыт изучения математики. Ее опыт обучения преподаванию математики, особенно в том, что касается понимания мышления ее учеников, часто отражал ее переживания, связанные с ощущениями, которые она испытывала в детстве, когда она «терялась» в этой области содержания. Стена, которую Эстель построила, когда студентка изучала математику, продолжала использоваться, когда она училась преподавать, чтобы избавиться от математического беспокойства, с которым она столкнулась.Готовясь к урокам математики, Эстель пыталась скрыть то, чего не знала о содержании математики, пытаясь предвидеть все возможные стратегии, которые может использовать ученик. Однако, пока Эстель вела свои тщательно подготовленные уроки, ее ученики часто приходили к ответу, используя стратегию, которую она не планировала. Когда Эстель пыталась понять математическое мышление своих учеников, ее математическое беспокойство вспыхнуло, и она запуталась. На уроке умножения и деления она вспомнила:

Думаю, что в этом уроке я не особо указал, где они могут запутаться.Думаю, меня просто больше беспокоили те моменты, в которых я всегда путалась, и я не хотел сбивать с толку студентов. Но я не думаю, что был действительно удивлен, потому что я просто чувствую, что каждый раз, когда я преподаю урок, возникает что-то новое, чего я не ожидал.

В других случаях Эстель учила из-за стены, чтобы скрыть то, чего она не знала о различных областях математического содержания.Она добилась этого, попросив своих учеников объяснить определенные математические термины, которые вызвали ее замешательство, или поделилась своими объяснениями об используемых ими стратегиях, которые она не понимала. Эстель, казалось, почти затаила дыхание в ожидании, пока ждала и надеялась, что ее ученики смогут дать объяснения, которые она сама не могла дать. На уроке дробей она рассказала следующую историю:

Я ожидал, что некоторые студенты запутаются в некоторых….некоторые части, которые, как мне кажется, меня больше интересовали числитель и знаменатели, но в начале урока я спросил студентов, знают ли они, какое число было числителем, а какое — знаменателем, и у меня были студенты, которые повысили свои рука, чтобы сказать мне, что такое знаменатель и что он означает, что такое числитель и что он означает. Так что было просто здорово, что я этого не сделал, мне не пришлось им объяснять. Они объяснили это всему классу. Они точно знали, что это такое…гм … Я просто был сбит с толку, я не растерялся, я боялся, что ученики будут сбиты с толку по этой теме урока.

Несмотря на то, что она потратила значительное количество времени на подготовку определения двух математических терминов, которые она будет использовать на своем уроке дробей, замешательство и тревога Эстель взяли верх. Эстель могла учить из-за стены, поскольку ее ученики оградили ее от путаницы в том, как объяснить два математических термина.Их объяснения привели к тому, что класс понял эти два слова без участия Эстель. Обучая из-за стены, Эстель смогла скрыть свою неспособность объяснить два математических термина. Ее ученики смогли определить для нее термины, защитив ее от собственного беспокойства. Более того, обучая из-за стены, Эстель, возможно, смогла избежать чувства неудачи, одновременно сохранив собственное чувство собственного достоинства.

Могу ли я научить своих учеников математическим знаниям?

Когда Эстель подошла к концу учебного семестра, она признала, что в целом она все еще нервничала из-за преподавания математики.Когда ее спросили, что конкретно заставляло ее беспокоиться о преподавании математики, она ответила:

Я думаю, просто снова передать это и сказать правильные вещи своим ученикам … Мне, как правило, трудно использовать математику, я думаю, математический словарь или говорить правильные слова, и я просто запутываюсь в своих мыслях, и все это входит в Проведение урока … У меня, в последнее время, было всего несколько, как горстка студентов, которые говорят: «Я не понимаю», поэтому я более глубоко разбиваю инструкции для них, и они, в конце концов, понимают это.Но я думаю, когда студенты, когда я слышу, как студенты автоматически говорят: «Я не понимаю», я нервничаю, потому что мне кажется, что я плохо учу. Что они явно не понимают того, что я говорю. Вероятно, это самая большая вещь, о которой я беспокоюсь, — это то, что я не могу донести суть до учеников.

Клятва Эстель преподавать так, чтобы никого не оставлять без внимания, была подвергнута проверке, когда ее ученики заявили о своем непонимании математики.Проблемы, связанные с формированием взаимопонимания для всех ее учеников, заставили Эстель нервничать из-за того, хорошо ли она преподавала.

Стратегия, которую Эстель использовала в качестве студентки, изучающей математику, заключалась в том, чтобы скрыть или скрыть то, чего она не знала о математическом содержании, которое она должна была изучать. Хотя эта стратегия могла предложить Эстель временное облегчение от чувства некомпетентности в математике и беспокойства по поводу этой области содержания, эта стратегия неоднократно терпела неудачу.Однако Эстель продолжала использовать эту стратегию как будущий учитель, хотя она не всегда срабатывала.

Учащийся из группы риска — обзор

Психическое здоровье

Психическое здоровье необходимо учитывать на каждом этапе, и оно должно быть частью плана каждой школы и общего плана округа. Как минимум, в каждом округе должна быть группа кризисного вмешательства (CIT), которая работает и координирует работу групп, назначенных округом. Команда кризисного вмешательства обращается к эмоциональным потребностям студентов и сотрудников.В этом качестве команда должна уметь быстро оценивать потребности студентов и сотрудников, обеспечивать работу с семьей, планировать и проводить соответствующие вмешательства, использовать индивидуальные и групповые стратегии и при необходимости направлять специалистов в ресурсы психического здоровья. Группа также является ключевым компонентом процесса оценки угроз в школе, помогая выявить тех, кто представляет угрозу для себя или других, а затем помогает разработать соответствующие меры вмешательства и ответные меры.

Цели кризисного вмешательства:

ДО БЕДСТВИЯ / КРИТИЧЕСКОГО СОБЫТИЯ:

Создание сообщества в школе.

Выявление, мониторинг и поддержка студентов и сотрудников из групп риска.

Развивать связи с психическим здоровьем и другими ресурсами сообщества, которые поддерживают эмоциональное благополучие детей.

ВО ВРЕМЯ БЕДСТВИЯ / КРИТИЧЕСКОГО СОБЫТИЯ:

Защитить — детей, ограждая их от:

9

93 —

93 —

99 на травмирующие стимулы (вид, звуки, запахи)

Воздействие средств массовой информации

Непосредственный — ученики амбулатории, находящиеся в шоке и диссоциативном состоянии:

8 и твердое указание

Вдали от опасностей, разрушений и тяжело раненых

Connect

Для вас как для поддержки

0

0

Для опекунов

Для точной информации

9295 8

Сортировка на предмет признаков напряжения, угрожающего безопасности.

Разделите выживших по уровню воздействия.

При необходимости активируйте Региональную систему реагирования на вопросы психического здоровья национальной безопасности.

Начало оказания первой психологической помощи, включая работу по восстановлению восприятия безопасности и чувства власти.

ПОСЛЕ БЕДСТВИЯ / КРИТИЧЕСКОГО СОБЫТИЯ:

Как можно скорее воссоедините учащихся с опекунами.

Восстановите спокойный распорядок дня.

Восстановите среду обучения.

Продолжайте оказание первой психологической помощи.

Предоставлять оперативные консультации в кризисных ситуациях и в связи с горем.

Инициируйте направления к специалистам в области психического здоровья.

Предоставлять информацию и психологические материалы семьям и лицам, осуществляющим уход.

Содействовать усилиям сообщества по оказанию поддержки семьям.

Команда CIT может состоять из представителей широкого круга школьных сотрудников, которые соответствуют указанным выше критериям, включая школьных консультантов, психологов, социальных работников, медсестер, учителей, специалистов по специальному образованию, изучающих языки, специалистов по ресурсам. , или другие правоохранительные органы. Также учтите, что некоторые обслуживающие и диетические работники образуют особую связь со студентами и могут быть готовы пройти обучение и действовать в этом качестве.Эту команду будет возглавлять опытный школьный специалист в области психического здоровья, например школьный консультант, социальный работник или психолог.

Своевременное выявление и вмешательство учащихся, испытывающих академические, социальные и поведенческие трудности, является неотъемлемой частью усилий по смягчению последствий. Смягчение последствий поддерживает усилия по предотвращению или уменьшению насилия в отношении себя и других.

CIT также будет развивать связи с профессиональными службами охраны психического здоровья в этом районе.

Организации, предоставляющие ресурсы по охране психического здоровья, которые следует рассмотреть округу, включают:

Поддерживающие школы и команды соседних школьных округов

Местные общественные центры психического здоровья

Местный колледж и ресурсы университета

Частные психиатрические агентства

Капелланы и пасторы с соответствующей подготовкой

NOVA, Национальная организация помощи жертвам:

929

Контактная информация национальной штаб-квартиры NOVA в Вашингтоне, округ Колумбия, [электронная почта защищена] или 202-232-6682.Услуги NOVA включают:

Немедленная помощь в течение 24 часов

Координация планирования с аварийными службами

На месте, индивидуальное сопровождение

73

Кризисное вмешательство местных групп населения

CIT должно создать центр помощи семьям во время крупных катастроф. Центральное расположение обеспечивает как ресурс сообщества, так и координационный центр для друзей и семьи, облегчая работу службам реагирования.Члены группы CIT берут на себя функции связи, психического здоровья и помощи в контролируемой среде. Друзья и родственники постоянно получают обновленную информацию об усилиях по спасению или восстановлению, а также другую информацию, такую ​​как помощь с семьей, помощь в посещении места бедствия, кризисное вмешательство, направления к специалистам по психическому здоровью, подача документов о помощи для компенсации жертвам, помощь в чрезвычайных финансовых потребностях и помощь с формами для ускорения подтверждения смерти.

Центр помощи семьям может существовать еще долго после того, как кризис закончился, в зависимости от масштаба события.После урагана или торнадо, когда пропавшие без вести могут исчисляться тысячами, проблемы с психическим здоровьем, скорбью и оформлением личных документов могут существовать в течение нескольких месяцев.

Казначейство налагает санкции на физических и юридических лиц, являющихся членами группы Pacnet

Действия, направленные на значительную транснациональную преступную организацию, отмывающую миллионы незаконных средств по всему миру

ВАШИНГТОН — Сегодня Управление по контролю за иностранными активами Министерства финансов США (OFAC) обозначило PacNet Group («PacNet») как крупную транснациональную преступную организацию (TCO) в соответствии с Указом правительства (E.О.) 13581, «Блокирование собственности транснациональных преступных организаций». PacNet, международная компания по обработке платежей и денежных услуг, имеет долгую историю отмывания денег, сознательно обрабатывая платежи от имени широкого спектра схем мошенничества с использованием почты, нацеленных на жертв в Соединенных Штатах и ​​во всем мире. PacNet — седьмой TCO, на который нацелена компания E.O. 13581.

В рамках сегодняшних действий OFAC также определяет глобальную сеть из 12 физических и 24 юридических лиц в 18 странах.В частности, эти физические и юридические лица становятся объектами преследований за материальную помощь, спонсирование или предоставление финансовой, материальной или технологической поддержки, товаров или услуг для PacNet, или за то, что они принадлежат или контролируются другими лицами, обозначенными как часть этого действия. В результате сегодняшних действий вся собственность и интересы в имуществе указанных лиц, подпадающих под юрисдикцию США, заблокированы, и лицам из США запрещено совершать с ними операции.

«PacNet сознательно способствует мошеннической деятельности своих клиентов в течение многих лет, и сегодняшние обозначения направлены на защиту американцев и финансовой системы страны от крупномасштабных незаконных денежных потоков, которые создаются этими мошенниками против уязвимых лиц», — сказал Джон Э. Смит, исполняющий обязанности директора OFAC. «Казначейство продолжит использовать свои полномочия для реагирования на меняющийся характер транснациональной организованной преступности».

OFAC тесно координировало сегодняшние действия с отделом защиты прав потребителей США.S. Министерство юстиции и Служба почтовой инспекции США. В рамках своих собственных усилий по борьбе с мошенничеством с использованием почты Министерство юстиции также будет объявлять уголовные дела; оформление ордеров на обыск в нескольких местах в США; подача гражданских судебных запретов против нескольких поставщиков услуг по борьбе с почтовым мошенничеством; и арест банковского счета PacNet. OFAC также получило существенную помощь в проведении расследований от Национального агентства по борьбе с преступностью Соединенного Королевства.

PacNet

Имея операции в Канаде, Ирландии и Великобритании, а также дочерние компании или филиалы в 15 других странах, PacNet является сторонней платежной системой, которую предпочитают злоумышленники, совершающие широкий спектр схем мошенничества с использованием почты.Потребители в США почти каждый день получают десятки тысяч мошеннических лотерейных и других сообщений о мошенничестве с использованием почты, которые содержат ложные сведения, направленные на преследование пожилых или других уязвимых лиц. PacNet имеет почти 20-летнюю историю сознательной обработки платежей, связанных с этими мошенническими схемами запроса предложений, которые приводят к потере миллионов долларов для потребителей в США.

Операции обработки

PacNet помогают скрыть сущность и предотвратить обнаружение таких мошеннических схем.В типичном сценарии мошенники рассылают жертвам мошеннические запросы по почте, а затем договариваются о том, чтобы платежи жертв (как чеки, так и наличные) отправлялись напрямую или через партнерскую компанию в операции обработки PacNet. Деньги жертв за вычетом сборов и комиссий PacNet предоставляются мошенникам посредством банковских переводов с текущего счета PacNet и посредством PacNet, осуществляющего платежи от имени мошенников, тем самым скрывая связь с мошенниками. Этот процесс направлен на минимизацию вероятности того, что финансовые учреждения обнаружат мошенников и сочтут их деятельность подозрительной.

В 2002 году в рамках иска о конфискации в Окружном суде США Западного округа Вашингтона два крупных юридических лица PacNet в Канаде и Ирландии признали, что использование почты для продажи лотерейных шансов, акций и интересов внутри Соединенные Штаты, а также использование объектов межгосударственной или иностранной торговли на территории Соединенных Штатов для обработки платежей за такие виды мошенничества, нарушают федеральные законы США. Эти организации также признали, что сознательный перевод или депонирование доходов от нарушения двух из этих уголовных законов на счета в финансовых учреждениях либо с целью содействия таким нарушениям, либо для сокрытия характера, местонахождения, источника, владения или контроля над такими доходов, представляет собой преступное отмывание денег.Руководители PacNet Розанна Дэй и Пол Дэвис заявили в суде, что в будущем они не будут использовать почту для обработки платежей за незаконные лотерейные покупки.

Несмотря на предварительное подтверждение PacNet и множество полученных уведомлений о мошеннической деятельности своих клиентов, PacNet продолжает сознательно обрабатывать чеки от имени многочисленных компаний, которые активно участвуют в широко распространенных кампаниях по мошенничеству с использованием почты. В качестве примера явных предупреждений, которые PacNet проигнорировал, в 2009 году генеральный прокурор Северной Дакоты связался с PacNet по поводу обработки Группой платежей за мошенничество с использованием экстрасенсов «Мария Дюваль».Хотя PacNet в конечном итоге вернула деньги жертвам, PacNet продолжала обрабатывать транзакции по схеме Дюваля более пяти лет. Точно так же PacNet получила повестку в суд от генерального прокурора штата Айова в 2014 году относительно преследования пожилых людей и других жителей Айовы мошенниками, которых они определили как клиентов PacNet. PacNet продолжала обрабатывать транзакции для этих мошенников, пока правоохранительные органы не отключили клиентов PacNet.

Руководство PacNet

В рамках сегодняшнего мероприятия OFAC назначило 12 человек, которые являются руководителями или директорами, часто в нескольких связанных с PacNet компаниях одновременно, и, в некоторых случаях, предоставило конкретные рекомендации относительно того, как скрыть незаконный характер операций PacNet или обмануть финансовые учреждения, с которыми взаимодействует PacNet.

Пол Дэвис — президент, партнер, акционер или корпоративный директор нескольких компаний PacNet. Дэвис принимает непосредственное участие в доставке денежных средств от имени клиентов PacNet и инструктирует подчиненных неправильно маркировать таможенные формы отправки валюты, чтобы уклониться от требований международной отчетности. Дэвис также сознательно предоставил финансовым учреждениям ложную информацию о характере бизнеса клиентов PacNet.

Розанна Дэй наблюдает за повседневными операциями PacNet Services Limited, базирующейся в Канаде, и является президентом, членом совета директоров, директором или акционером в нескольких компаниях PacNet.Она проинструктировала своих подчиненных направлять транзакции через организацию PacNet, Indian River (Великобритания), чтобы скрыть принадлежность транзакций к PacNet Services Limited и избежать потенциального отклонения платежей финансовыми учреждениями.

Джерард Альфонсус Хамфрис — директор нескольких компаний, связанных с PacNet, а также главный пилот PacNet Air и директор по авиации. Вместе с Полом Дэвисом он участвовал в доставке наличных в Европе, а также числится директором нескольких компаний PacNet в Ирландии.

Рут Ферлоу является директором, менеджером или секретарем нескольких компаний, связанных с PacNet, включая менеджера по электронным платежам для PacNet Services Limited.

Мари Бойвин — директор компании Accu-Rate Corporation, связанной с PacNet, расположенной в Канаде.

Брайан Уикс был назначен руководителем отдела продаж, бизнес-менеджером и главой банковского подразделения PacNet Europe.

Моника Элизабет Ботчер — управляющий партнер PacNet Brazil.

Шивон Энн Ханрахан — секретарь нескольких связанных с PacNet компаний в Ирландии.

Рафаэлла Феррари является директором, администратором или акционером нескольких связанных с PacNet компаний в Италии и Великобритании.

Донна Мария МакБейн — директор компаний, связанных с PacNet, Counting House Services Ltd. и PacNet Services Limited, базирующихся в Соединенном Королевстве.

Мэри Энн Дрисколл — управляющий директор компании Chexx Inc., связанной с PacNet., базирующаяся в Канаде и Ирландии, и директор Indian River (UK) Ltd.

Эстель Снайман — директор PacNet Holdings Limited, базирующаяся в Ирландии.

Компании, связанные с PacNet

Кроме того, сегодня OFAC определило следующие 24 компании, которые входят в PacNet, как организации, принадлежащие или контролируемые руководителями PacNet или другими связанными с PacNet компаниями.

PacNet Services Limited, базирующаяся в Канаде, служит холдинговой компанией для множества компаний PacNet.Розанна Дэй является президентом и членом правления этой организации.

— PacNet Services Limited также контролирует дополнительные холдинговые компании, включая PacNet Holdings Limited (в Ирландии), единственным акционером которой является PacNet Services Limited. В свою очередь, PacNet Holdings Limited контролирует PacNet Services (Ireland) Limited как единственный акционер. PacNet Services Limited также является материнской компанией и единственным акционером PacNet Connections Limited (в Ирландии). PacNet Services Limited и PacNet Holdings Limited также являются материнскими компаниями Aeropay Limited (в Соединенном Королевстве).

— PacNet Connections Limited является материнской компанией Indian River (UK) Ltd. PacNet использовала Indian River (UK) Ltd. для направления платежей по крайней мере через один банк, который отклонял платежи от PacNet Services Limited.

— Дочерние или аффилированные компании PacNet Services Limited включают: PacNet Europe (в Ирландии), PacNet Brazil, PacNet Chile, PacNet France, PacNet HongKong, PacNet India, PacNet Malta, PacNet Suisse (в Швейцарии), PacNet UK и PacNet ZAR. (в Южной Африке).

PacNet Air, расположенный на острове Мэн, является дочерней или аффилированной компанией PacNet Services Limited. Пользователи PacNet, в том числе Дэвис и Хамфрис, используют PacNet Air для перемещения незаконных наличных денег в пределах Европы.

Chexx Inc. (Chexx), расположенная в Ирландии и Канаде, является дочерней или аффилированной компанией PacNet Services Limited. Chexx осуществляет исходящие платежи от имени клиентов PacNet с банковских счетов PacNet Europe и Chexx.

Chexx Italia Srl, расположенная в Италии, принадлежит или контролируется Полом Дэвисом, который указан в качестве партнера компании. Рафаэлла Феррари назначена администратором компании.

Accu-Rate Corporation (Accu-Rate), расположенная в Канаде, является дочерней или аффилированной компанией PacNet Services Limited. Пол Дэвис — президент компании, а Мари Бойвин — ее директор. Accu-Rate действует как компания по обмену иностранной валюты и содействует незаконным операциям с наличными от имени отдела обработки чеков PacNet Europe.

Counting House Services Ltd. (Counting House), расположенная в Канаде и Великобритании, является компанией, связанной с PacNet. Counting House принадлежит или контролируется Полом Дэвисом, который является управляющим директором и единственным акционером компании. Руководители PacNet Донна Мария МакБейн и Рафаэлла Феррари определены как директора. Counting House совмещен с несколькими другими компаниями, связанными с PacNet, включая PacNet Services Limited.

Deepcove Labs, расположенная в Канаде, обеспечивает ИТ-поддержку PacNet и работает совместно с несколькими другими компаниями PacNet, включая PacNet Services Limited.Исполнительный директор PacNet Розанна Дэй — президент и член правления Deepcove Labs.

Платежная фабрика, расположенная в нескольких юрисдикциях, включая Канаду, Ирландию и Соединенное Королевство, совмещена с другими компаниями PacNet во всех трех странах. Исполнительный директор PacNet Пол Дэвис и Рафаэлла Феррари определены как директора компании, и каждый из них владеет 50% акций.

Manx Rare Breeds Ltd., расположенная на острове Мэн, принадлежит или контролируется Полом Дэвисом.

Чтобы увидеть идентифицирующую информацию, относящуюся к сегодняшним действиям, щелкните здесь.

Чтобы увидеть диаграмму, относящуюся к сегодняшним действиям, щелкните здесь.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

последовательность ДНК . +
ORFBamHI 5′-GCGGATCCACATATGGCTATTGTTGAAACTG-3 ‘
ORFNotI 5′-TAGCGGCCGCTTAAAACATACAAGTTTCTCTTTT-3′
K143Rfor 5′-GGAACAAAGAAAGTTTGCTAAATTTGC-3 ‘
5′-GCAAATTTAGCAAACTTTCATTGTTCC-3 ‘
N136Yfor 5′-GTTATTTATGATTGTCCATATTCCAGATTAATG-3′
N136Yrev 5′-CATTAATCTGGAATATGGACAATCATAAATAAC-3 ‘
CaCYP51R2 5′-AATATAGTTGAGCAAATGAACG-3′
5’AOX1 5′-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3 ‘
3’AOX1 5′-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3′